目的:本實驗旨在利用高通量測序的方法探討中藥金錢草聯(lián)合西藥碳酸鋰,對草酸鈣結(jié)石大鼠腸道菌群的影響。方法:采用1%乙二醇溶液自由飲水及2%氯化銨2ml灌胃的方法建立實驗性草酸鈣腎結(jié)石大鼠模型,以金錢草及碳酸鋰作為藥物干預手段,以枸櫞酸鉀作為治療藥物對照組。SPF級雄性SD大鼠48只,隨機分成8組(n=6):空白組(Z組)、成石組(M組)、金錢草治療組(JQC組)、碳酸鋰治療組(L組)、檸檬酸鉀治療組(PC組)、金錢草聯(lián)合低劑量碳酸鋰治療組(JLD組)、金錢草聯(lián)合中劑量碳酸鋰治療組(JLZ組)、金錢草聯(lián)合高劑量碳酸鋰治療組(JLG組)。各組大鼠在相同條件下干預56天后將大鼠進行標本收集。取各組大鼠糞便標本,提取標本中原核生物全基因組后采用16S rDNA V3/V4區(qū)基因測序方法分析菌群結(jié)構。左腎組織在顯微鏡下觀察組織病理學改變和結(jié)晶沉淀的情況。探討藥物干預對草酸鈣腎結(jié)石大鼠腸道菌群變化的影響。結(jié)果:(1)大鼠左腎石蠟切片結(jié)果:M組草酸鈣結(jié)晶呈粗大廣泛成堆結(jié)晶、連接成片狀;JQC組、JLD組、JLZ組、PC組的晶體形成均少于M組;L組與JLG組組內(nèi)表現(xiàn)不一致。(2)高通量測序分析結(jié)果:藥物...

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【學位級別】：碩士

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中文摘要
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第一章 前言
    1.1 已知與草酸鈣代謝相關的主要腸道菌群的分類
        1.1.1 乳桿菌屬
        1.1.2 梭菌屬
        1.1.3 瘤胃球菌屬
        1.1.4 普雷沃菌屬
        1.1.5 草酸桿菌屬
        1.1.6 擬桿菌門
        1.1.7 軟壁菌門
    1.2 正常腸道菌群在人體中的作用
        1.2.1 代謝功能
        1.2.2 營養(yǎng)作用
        1.2.3 防御作用
        1.2.4 抑瘤作用
        1.2.5 與胃腸道腫瘤的形成相關
    1.3 胃腸道菌群在抑制泌尿系結(jié)石形成及降低尿草酸水平所起的作用
    1.4 腸道菌群作為藥品應用方面的現(xiàn)狀及不足
    1.5 選擇金錢草及碳酸鋰做為干預藥物的理由
第二章 材料與方法
    2.1 研究對象
    2.2 研究試劑及主要耗材
    2.3 主要試驗儀器
    2.4 研究方法及內(nèi)容
        2.4.1 建立大鼠草酸鈣腎結(jié)石模型
        2.4.2 大鼠糞便標本采集
        2.4.3 大鼠取材及處理
        2.4.4 左腎取材及固定
        2.4.5 制備石蠟切片、H.E染色及讀片
        2.4.6 大鼠血清、尿生化指標的檢測
        2.4.7 大鼠糞便DNA提取/QC
        2.4.8 PCR擴增、文庫擴建及上機測序
    2.5 數(shù)據(jù)處理
        2.5.1 測序數(shù)據(jù)處理
        2.5.2 OUT分析及物種注釋
第三章 結(jié)果
    3.1 尿和血清生化指標
    3.2 大鼠病理石蠟切片結(jié)果
    3.3 各組OUT統(tǒng)計
    3.4 物種相對豐度圖形展示
        3.4.1 門水平物種相對豐度圖
        3.4.2 屬水平物種相對豐度圖
    3.5 樣本復雜度分析
        3.5.1 α多樣性指數(shù)
        3.5.2 α多樣性指數(shù)組間差異分析
    3.6 多樣本比較分析
        3.6.1 Unifrac分析
        3.6.2 PCA分析
    3.7 組間群落結(jié)構差異顯著性分析
        3.7.1 Anosim組間差異性分析
        3.7.2 Metastats差異分析
第四章 討論
結(jié)論
參考文獻
附錄 :文獻綜述 腸道菌群對草酸鈣結(jié)石形成影響進展
    參考文獻
在學期間成果
致謝



本文編號：3853546