發(fā)布時(shí)間：2023-10-08 17:28

　　目的:通過腹腔注射環(huán)磷酰胺建立小鼠間質(zhì)性膀胱炎(IC)模型,研究小鼠IC模型中Toll樣受體4/p38絲裂原活化蛋白激酶(TLR4/p38 MAPK)信號通路的表達(dá)情況,為研究TLR4/p38 MAPK信號通路是否可作為IC治療靶點(diǎn)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法:C57BL/6J雌性小鼠60只,隨機(jī)分為IC組(n=30)和對照組(n=30)。IC組小鼠分別于第1、3、5、7天腹腔注射環(huán)磷酰胺(100mg/kg)建模,對照組小鼠分別于第1、3、5、7天腹腔注射等量生理鹽水作為空白對照。于第8天時(shí)觀察兩組小鼠的刻板行為,統(tǒng)計(jì)刻板行為評分。于第9天時(shí)統(tǒng)計(jì)兩組小鼠的排尿次數(shù)并分析兩組小鼠之間排尿次數(shù)的差異。統(tǒng)計(jì)完成后將小鼠處死,取膀胱組織進(jìn)行下列實(shí)驗(yàn):1.通過蘇木精-伊紅染色(HE染色)觀察小鼠IC模型病理學(xué)特征;2.通過甲苯胺藍(lán)染色對比兩組小鼠膀胱組織中肥大細(xì)胞浸潤程度;3.通過酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)檢測兩組小鼠膀胱組織勻漿的上清液中白細(xì)胞介素-1β(IL-1β)、白細(xì)胞介素-6(IL-6)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)的含量;4.通過免疫印跡試驗(yàn)(Western blot)檢測TLR4/p3...

【文章頁數(shù)】：51 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
引言
第一章 材料與方法
    1.實(shí)驗(yàn)材料
        1.1 實(shí)驗(yàn)對象
        1.2 主要試劑
        1.3 主要儀器設(shè)備
    2.實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 小鼠IC模型的構(gòu)建
        2.2 小鼠刻板行為評分
        2.3 小鼠排尿次數(shù)的統(tǒng)計(jì)
        2.4 石蠟切片的制備
        2.5 HE染色
        2.6 甲苯胺藍(lán)染色
        2.7 ELISA檢測膀胱組織中IL-1β、IL-6和TNF-α的表達(dá)
        2.8 Western blot檢測膀胱組織中TLR4/p38 MAPK信號通路相關(guān)蛋白的表達(dá)
        2.9 qRT-PCR檢測膀胱組織中TLR4、p38 MAPK、IL-1β、IL-6和TNF-αmRNA的表達(dá)
    3.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
第二章 結(jié)果
    1.小鼠的行為改變
        1.1 小鼠刻板行為評分
        1.2 小鼠排尿次數(shù)
    2.小鼠膀胱組織病理學(xué)檢查
        2.1 膀胱組織切片HE染色
        2.2 膀胱組織切片甲苯胺藍(lán)染色及肥大細(xì)胞計(jì)數(shù)
    3.小鼠膀胱組織中TLR4/p38 MAPK信號通路相關(guān)因子表達(dá)水平的檢測
        3.1 TLR4/p38 MAPK信號通路炎性因子IL-1β、IL-6和TNF-α的表達(dá)水平
        3.2 TLR4/p38 MAPK信號通路相關(guān)分子的蛋白表達(dá)水平
        3.3 TLR4/p38 MAPK信號通路相關(guān)分子的m RNA表達(dá)水平
第三章 討論
第四章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    綜述參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間的研究成果
附錄 (縮略詞表)
致謝



本文編號：3852470