目的:腎細(xì)胞癌(renal cell carcinoma,RCC)是最常見泌尿生殖系統(tǒng)的惡性腫瘤之一,其中60⁸5%為腎透明細(xì)胞癌(clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)。近1/3的ccRCC患者在診斷時發(fā)生轉(zhuǎn)移,預(yù)后不良。早期診斷和靶向治療是目前提高ccRCC生存率的主要手段。鋅指結(jié)構(gòu)反義轉(zhuǎn)錄本1(NFX1-type zinc finger-containing protein 1 antisense RNA 1,ZFAS1)在人類多種惡性腫瘤組織中存在異常高表達(dá),并與腫瘤患者不良預(yù)后密切相關(guān),但其在ccRCC中的作用尚不明確。本研究旨在探討ZFAS1在ccRCC中的作用,并通過研究ZFAS1與miR-10a和紡錘體和著絲粒相關(guān)蛋白1(spindle and kinetochore associated 1,SKA1)的關(guān)系,尋找ccRCC中存在的lncRNA-miRNA-mRNA的調(diào)控通路,揭示ccRCC的發(fā)生發(fā)展的分子機(jī)制,以期為ccRCC尋找新的分子治療靶點(diǎn)。方法:本研究以人ccRCC組織60例、癌旁組織20例,人腎透...

【文章頁數(shù)】：71 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略語
1 前言
2 材料和方法
    2.1 主要器材耗材、試劑和儀器
        2.1.1 主要器材耗材
        2.1.2 主要試劑
        2.1.3 主要儀器
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 組織標(biāo)本收集及Real-time PCR檢測相關(guān)基因表達(dá)
        2.2.2 細(xì)胞培養(yǎng)及相關(guān)實(shí)驗(yàn)
        2.2.3 質(zhì)粒構(gòu)建
        2.2.4 慢病毒顆粒的制備
        2.2.5 慢病毒感染及篩選
        2.2.6 瞬時轉(zhuǎn)染
        2.2.7 CCK-8 檢測細(xì)胞增殖-毒性檢測
        2.2.8 Transwell檢測細(xì)胞遷移及侵襲能力
        2.2.9 蛋白印跡(Western blot,WB)
        2.2.10 熒光素酶報告基因
        2.2.11 RNA結(jié)合蛋白免疫沉淀
        2.2.12 動物實(shí)驗(yàn)相關(guān)操作
        2.2.13 統(tǒng)計學(xué)處理
3 結(jié)果
    3.1 ZFAS1在cc RCC組織中高表達(dá)并與cc RCC患者臨床病理特征及不良預(yù)后相關(guān)
    3.2 ZFAS1在cc RCC細(xì)胞系中的表達(dá)及ZFAS1 穩(wěn)定地表達(dá)cc RCC細(xì)胞株的構(gòu)建及確認(rèn)
    3.3 ZFAS1 敲低抑制 ccRCC 細(xì)胞增殖、遷移和侵襲能力
    3.4 ZFAS1 對小鼠ccRCC瘤生長及轉(zhuǎn)移的影響
    3.5 ZFAS1 靶向作用miR-10a
    3.6 cc RCC組織中miR-10a低表達(dá)并與ZFAS1 負(fù)相關(guān)
    3.7 ZFAS1 通過miR-10a調(diào)控ccRCC增殖、遷移和侵襲
    3.8 miR-10a靶向作用SKA1
    3.9 ccRCC組織中SKA1 高表達(dá)并與miR-10a表達(dá)負(fù)相關(guān)
    3.10 ZFAS1 通過miR-10a促進(jìn)SKA1 表達(dá)
    3.11 SKA1 敲低抑制ccRCC細(xì)胞增殖、遷移和侵襲
4 討論
5 結(jié)論
本研究創(chuàng)新性的自我評價
參考文獻(xiàn)
綜述 ZFAS1:一種新的腫瘤相關(guān)性長鏈非編碼 RNA
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
個人簡歷



本文編號：3844712