發(fā)布時(shí)間：2023-05-10 18:11

　　目的：觀察良性前列腺增生組織與前列腺癌組織中多重腫瘤相關(guān)信號通路關(guān)鍵基因的表達(dá)差異情況,了解前列腺癌重要相關(guān)基因的相互關(guān)系,從系統(tǒng)的角度分析PCa相關(guān)生物分子的交互網(wǎng)絡(luò),揭示PCa發(fā)生發(fā)展的動(dòng)態(tài)過程,從而為篩選有效的前列腺癌治療藥物和方案提供新線索。 方法：用德國Qiagen公司人前列腺癌的RT2Profiler PCR Array基因芯片篩選良性前列腺增生組織與前列腺癌組織中相關(guān)信號通路的關(guān)鍵基因,并用熒光定量RT-PCR檢測篩選出的關(guān)聯(lián)基因mRNA在良性前列腺增生組織與前列腺癌組織中的表達(dá)。所有數(shù)據(jù)采用SPSS15.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。 結(jié)果：RT2Profiler PCR Array基因芯片篩選出17個(gè)興趣基因,將這17個(gè)興趣基因?qū)朐诰�基因網(wǎng)絡(luò)數(shù)據(jù)庫得到8個(gè)關(guān)聯(lián)基因構(gòu)成的網(wǎng)絡(luò)調(diào)控模擬圖,而AKT1和EGFR是該交互網(wǎng)絡(luò)的中樞節(jié)點(diǎn)。8個(gè)關(guān)聯(lián)基因在良性前列腺增生組織與前列腺癌組織中的相對表達(dá)量有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。 結(jié)論：EGFR、FASN與GSTP1等17個(gè)興趣基因可能與前列腺癌的發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移密切相關(guān)；KT-1、KLK-3與IGF-1等8個(gè)目的基因構(gòu)成網(wǎng)絡(luò)調(diào)...

【文章頁數(shù)】：84 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
目錄
1 緒論
2 材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 組織標(biāo)本收集
        2.1.2 主要實(shí)驗(yàn)儀器
        2.1.3 主要實(shí)驗(yàn)試劑
    2.2 熒光定量RT—PCR檢測PCA中信號通路相關(guān)基因
        2.2.1 總RNA提取
        2.2.2 總RNA純化
        2.2.3 總RNA純度及濃度檢測
        2.2.4 cDNA合成
        2.2.5 實(shí)時(shí)熒光定量PCR
        2.2.6 RT² PROFILER PCR ARRAY實(shí)驗(yàn)流程圖
    2.3 熒光定量RT—PCR檢測BPH與PCA中目的基因的表達(dá)差異
        2.3.1 引物設(shè)計(jì)合成
        2.3.2 組織總RNA提取與純化
        2.3.3 總RNA純度、濃度以及完整性檢測
        2.3.4 逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)
        2.3.5 熒光定量PCR反應(yīng)
    2.4 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
        2.4.1 熒光定量PCR數(shù)據(jù)處理
        2.4.2 統(tǒng)計(jì)分析
3 結(jié)果
    3.1 總RNA濃度及完整性鑒定結(jié)果
    3.2 熒光定量PCR擴(kuò)增結(jié)果
        3.2.1 PCA和BPH組熒光定量PCR動(dòng)力學(xué)曲線圖
        3.2.2 PCA和BPH組熒光定量PCR融解曲線圖
        3.2.3 BPH和PCA組熒光定量PCR的CT值
    3.3 PCRARRAY數(shù)據(jù)分析軟件對原始CT值分析結(jié)果
        3.3.1 96基因在PCA與BPH中的相對表達(dá)及評價(jià)結(jié)果
        3.3.2 96基因在PCA與BPH組中構(gòu)成的散點(diǎn)圖
        3.3.3 84關(guān)鍵基因在PCA與BPH組中構(gòu)成的熱圖
        3.3.4 17興趣基因在PCA與BPH組中構(gòu)成的柱形圖
    3.4 GNCPRO數(shù)據(jù)分析軟件模擬興趣基因的交互網(wǎng)絡(luò)
    3.5 統(tǒng)計(jì)結(jié)果
        3.5.1 BPH和PCA組的MANN—-WHITNEY U檢驗(yàn)結(jié)果
        3.5.2 8個(gè)關(guān)聯(lián)基因在BPH與PCA中的相對表達(dá)量比較
4 討論
    4.1 改良法提取組織總RNA
        4.1.1 RNEAS YMINI KIT試劑盒提取組織總RNA
        4.1.2 TRIZOL法提取組織總RNA
        4.1.3 TRIZOL法提取組織總RNA后用試劑盒純化
    4.2 前列腺癌相關(guān)信號通路基因的網(wǎng)絡(luò)調(diào)控
        4.2.1 17興趣基因在BPH和PCA的表達(dá)及其意義
        4.2.2 8個(gè)關(guān)聯(lián)基因在PCA中的表達(dá)及其意義
        4.2.3 EGFR/PI3K/AKT信號通路在PCA中的網(wǎng)絡(luò)調(diào)控作用
5 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
附錄一
附錄二
攻讀學(xué)位期間主要的研究成果
致謝



本文編號：3813253