目的:研究miR-613在人前列腺癌組織中的表達(dá)情況,探討miR-613是否通過下調(diào)Wnt信號(hào)通路活性抑制前列腺癌細(xì)胞系細(xì)胞的增殖和侵襲能力。方法:收集臨床前列腺癌組織及配對癌旁組織20例,通過實(shí)時(shí)熒光定量PCR(RT-qPCR)檢測各組組織中miR-613的表達(dá)情況。進(jìn)一步在細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中,通過轉(zhuǎn)染miR-613 mimic和miR-NC至離體培養(yǎng)的PC-3、DU-145細(xì)胞中,隨后,采用MTT法、平板克隆實(shí)驗(yàn)檢測細(xì)胞增殖和Matrigel侵襲實(shí)驗(yàn)測定前列腺癌細(xì)胞的侵襲情況,采用熒光素酶分析方法評(píng)估Wnt信號(hào)通路活性變化,采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(RT-qPCR)檢測Wnt/β-catenin信號(hào)通路下游靶基因的轉(zhuǎn)錄(包括Cyclin D1和c-Myc),WB法檢測細(xì)胞中β-catenin、c-Myc和Cyclin D1的表達(dá)量。結(jié)果:相比配對癌旁組織,miR-613在前列腺癌組織中的表達(dá)降低(P<0.01);在體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中,相比于miR-NC組,轉(zhuǎn)染miR-613 mimic后,PC-3、DU-145細(xì)胞增殖能力下降(P<0.05),PC-3、DU-145細(xì)胞的遷移侵襲能力...

【文章頁數(shù)】：5 頁

【文章目錄】：
1 材料和方法
    1.1 細(xì)胞
    1.2 反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-qPCR)分析
    1.3 細(xì)胞轉(zhuǎn)染
    1.4 細(xì)胞增殖
    1.5 細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)
    1.6 免疫印跡分析
    1.7 Wnt信號(hào)通路的活性測定
    1.8 前列腺癌臨床組織收集
2 結(jié)果
    2.1 miR-613在前列腺癌組織中的表達(dá)
    2.2 miR-613對前列腺癌細(xì)胞增殖和侵襲能力的影響
    2.3 miR-613對Wnt/β-catenin信號(hào)通路及相關(guān)蛋白的影響
3 討論



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