miR-613通過下調(diào)Wnt/β-catenin信號通路活性抑制前列腺癌細胞的增殖與侵襲
發(fā)布時間:2023-05-09 18:38
目的:研究miR-613在人前列腺癌組織中的表達情況,探討miR-613是否通過下調(diào)Wnt信號通路活性抑制前列腺癌細胞系細胞的增殖和侵襲能力。方法:收集臨床前列腺癌組織及配對癌旁組織20例,通過實時熒光定量PCR(RT-qPCR)檢測各組組織中miR-613的表達情況。進一步在細胞實驗中,通過轉(zhuǎn)染miR-613 mimic和miR-NC至離體培養(yǎng)的PC-3、DU-145細胞中,隨后,采用MTT法、平板克隆實驗檢測細胞增殖和Matrigel侵襲實驗測定前列腺癌細胞的侵襲情況,采用熒光素酶分析方法評估Wnt信號通路活性變化,采用實時熒光定量PCR(RT-qPCR)檢測Wnt/β-catenin信號通路下游靶基因的轉(zhuǎn)錄(包括Cyclin D1和c-Myc),WB法檢測細胞中β-catenin、c-Myc和Cyclin D1的表達量。結(jié)果:相比配對癌旁組織,miR-613在前列腺癌組織中的表達降低(P<0.01);在體外細胞實驗中,相比于miR-NC組,轉(zhuǎn)染miR-613 mimic后,PC-3、DU-145細胞增殖能力下降(P<0.05),PC-3、DU-145細胞的遷移侵襲能力...
【文章頁數(shù)】:5 頁
【文章目錄】:
1 材料和方法
1.1 細胞
1.2 反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-qPCR)分析
1.3 細胞轉(zhuǎn)染
1.4 細胞增殖
1.5 細胞侵襲實驗
1.6 免疫印跡分析
1.7 Wnt信號通路的活性測定
1.8 前列腺癌臨床組織收集
2 結(jié)果
2.1 miR-613在前列腺癌組織中的表達
2.2 miR-613對前列腺癌細胞增殖和侵襲能力的影響
2.3 miR-613對Wnt/β-catenin信號通路及相關(guān)蛋白的影響
3 討論
本文編號:3812176
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1 材料和方法
1.1 細胞
1.2 反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-qPCR)分析
1.3 細胞轉(zhuǎn)染
1.4 細胞增殖
1.5 細胞侵襲實驗
1.6 免疫印跡分析
1.7 Wnt信號通路的活性測定
1.8 前列腺癌臨床組織收集
2 結(jié)果
2.1 miR-613在前列腺癌組織中的表達
2.2 miR-613對前列腺癌細胞增殖和侵襲能力的影響
2.3 miR-613對Wnt/β-catenin信號通路及相關(guān)蛋白的影響
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