目的篩選人精子中與PHF7相互作用的蛋白質(zhì)并分析其作用。方法構(gòu)建質(zhì)粒表達(dá)GST-PHF7融合蛋白,通過GST pull-down實(shí)驗(yàn)串聯(lián)質(zhì)譜檢測(cè)人精子中與PHF7特異性結(jié)合的蛋白質(zhì),進(jìn)行GO富集分析和KEGG通路分析。結(jié)果利用GST-PHF7誘餌蛋白從人精子細(xì)胞總蛋白中成功釣取靶蛋白。經(jīng)過質(zhì)譜檢測(cè),篩選出人精子中與PHF7特異結(jié)合的蛋白75個(gè)。GO分析結(jié)果表明,這些蛋白在生物學(xué)過程上主要富集在蛋白運(yùn)輸和細(xì)胞內(nèi)定位等;在細(xì)胞成分上主要富集在細(xì)胞器,囊泡和外泌體等;在分子功能上主要富集在結(jié)合蛋白質(zhì),核酸和酶類等。KEGG分析結(jié)果表明,這些蛋白富集在細(xì)胞代謝和遺傳信息的處理等通路。結(jié)論 PHF7與精子內(nèi)多種蛋白質(zhì)相互作用,調(diào)節(jié)蛋白合成,運(yùn)輸和降解及能量代謝等可能是其調(diào)節(jié)精子發(fā)生的機(jī)制。

【文章頁數(shù)】：8 頁

【文章目錄】：
材料與方法
    一、GST-PHF7表達(dá)載體的構(gòu)建
    二、GST-PHF7融合蛋白的表達(dá)與純化
    三、精子總蛋白提取
    四、GST pull-down實(shí)驗(yàn)
    五、質(zhì)譜檢測(cè)與生信分析
實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    一、GST pull-down實(shí)驗(yàn)與質(zhì)譜分析
    二、PHF7相互作用蛋白的GO富集分析
    三、PHF7相互作用蛋白的KEGG分析
討論



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