目的:探討普魯卡因(PCA)及CXC趨化因子受體7(CXCR7)對膀胱癌細(xì)胞活力、遷移和侵襲的影響及潛在的作用機(jī)制。方法:用不同濃度PCA處理人膀胱癌RT4細(xì)胞,并將細(xì)胞分為PBS組(無PCA處理)、PCA組(4 mmol/L PCA處理)、siRNA陰性對照(si-Con)組(轉(zhuǎn)染si-Con)、CXCR7 siRNA(si-CXCR7)組(轉(zhuǎn)染si-CXCR7)、PCA+pcDNA組(4 mmol/L PCA處理并轉(zhuǎn)染pcDNA)和PCA+pcDNA-CXCR7組(4 mmol/L PCA處理并轉(zhuǎn)染pcDNACXCR7),siRNA和pcDNA均用脂質(zhì)體法轉(zhuǎn)染至RT4細(xì)胞。運用RT-qPCR檢測RT4細(xì)胞中CXCR7的mRNA表達(dá)水平;采用CCK-8法檢測各組細(xì)胞的活力;Transwell實驗檢測各組細(xì)胞的侵襲和遷移能力;Western blot檢測各組細(xì)胞中CXCR7、AKT、STAT3、p-AKT和p-STAT3的蛋白水平。結(jié)果:相較于PBS組,不同濃度PCA處理后RT4細(xì)胞的活力、遷移能力和侵襲能力顯著降低(P<0. 05),PCA組RT4細(xì)胞中CXCR7的mRNA和蛋...

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【文章目錄】：
材料和方法
    1 材料與試劑
    2 方法
        2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.2 PCA處理膀胱癌細(xì)胞
        2.3 細(xì)胞分組和轉(zhuǎn)染
        2.4 RT-qPCR分析CXCR7的mRNA表達(dá)水平
        2.5 CCK-8法測定RT4細(xì)胞活力的變化
        2.6 Transwell實驗檢測細(xì)胞的遷移和侵襲能力
        2.7 Western blot法檢測蛋白水平
    3 統(tǒng)計學(xué)處理
結(jié)果
    1不同濃度的PCA對RT4細(xì)胞活力的影響
    2 PCA對RT4細(xì)胞遷移和侵襲能力的影響
    3 PCA對RT4細(xì)胞CXCR7表達(dá)的影響
    4 敲減CXCR7表達(dá)對RT4細(xì)胞的活力、遷移和侵襲的影響
    5 過表達(dá)CXCR7逆轉(zhuǎn)PCA對RT4細(xì)胞活力、遷移和侵襲的抑制作用
    6 過表達(dá)CXCR7和PCA對RT4細(xì)胞AKT/STAT3信號通路的影響
討論



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