目的:隨著工業(yè)化進(jìn)程的發(fā)展,世界上7%的男性患有不育癥,使其成為公共關(guān)注的焦點(diǎn),男性不育癥的影響因素是多方面的,環(huán)境污染是重要的影響因素之一。引起生殖系統(tǒng)損傷的環(huán)境污染物種類復(fù)雜多樣,重金屬則是其中之一。錳(Manganese,Mn)作為重金屬的一種,是人體必須的微量元素,參與人體的多種功能活動。但環(huán)境中過量的錳暴露也會對雄性生殖系統(tǒng)產(chǎn)生影響,已有研究表明,錳可通過血睪屏障而蓄積于睪丸,從而損害雄性生殖系統(tǒng)。精子發(fā)生是哺乳動物睪丸中貫穿一生每天產(chǎn)生數(shù)以億計(jì)精子的基礎(chǔ)。其包含精原干細(xì)胞的自我更新、精原細(xì)胞的有絲分裂、精母細(xì)胞的減數(shù)分裂以及精子變形這四個階段,任何環(huán)節(jié)的失調(diào)都將導(dǎo)致精子發(fā)生障礙。細(xì)胞周期各個階段交替變化可精確的調(diào)控精子發(fā)生過程,其細(xì)胞周期蛋白B1(CCNB1)和細(xì)胞周期蛋白B2(CCNB2)為調(diào)節(jié)亞基,推動細(xì)胞周期各時相的有序進(jìn)行。生精功能障礙是男性不育的一個關(guān)鍵因素,從不同層面探究精子發(fā)生中的調(diào)控機(jī)制對于有效防治男性不育具有重要意義。m6A識別蛋白YTHDC2對于小鼠精子發(fā)生不可或缺,但其在精子發(fā)生中的功能和作用機(jī)制尚不清楚。因此,本研究探討m6A識別蛋白YTHDC2在錳...

【文章頁數(shù)】：82 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略語
1 前言
2 材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 人群樣本、實(shí)驗(yàn)動物、細(xì)胞系
    2.2 主要試劑和儀器
        2.2.1 主要試劑
        2.2.2 主要儀器
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 人群樣本
        2.3.2 動物實(shí)驗(yàn)
        2.3.3 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)
        2.3.4 數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
3 結(jié)果
    3.1 接觸Mn作業(yè)對男工精液的影響
        3.1.1 研究對象的基本信息
        3.1.2 接觸Mn作業(yè)男工精液質(zhì)量的改變
        3.1.3 接觸Mn作業(yè)男工精漿中錳含量的改變
        3.1.4 接觸Mn作業(yè)男工精漿中與精子發(fā)生有關(guān)的m6A相關(guān)基因mRNA表達(dá)的變化
    3.2 染錳對小鼠生殖功能的影響
        3.2.1 染錳后小鼠睪丸組織的變化
        3.2.2 染錳后小鼠精子質(zhì)量的變化
        3.2.3 染錳后睪丸中YTHDC2 mRNA表達(dá)和蛋白水平
    3.3 染錳對GC-1spg細(xì)胞的影響
        3.3.1 不同染錳劑量及暴露時間對GC-1 spg細(xì)胞活力的影響
        3.3.2 染錳對GC-1 spg細(xì)胞形態(tài)的影響
        3.3.3 染錳后GC-1 spg細(xì)胞中YTHDC2 mRNA表達(dá)和蛋白水平
        3.3.4 染錳對GC-1 spg細(xì)胞周期的影響
    3.4 錳對YTHDC2下游基因的篩選
        3.4.1 通過Pathway分析進(jìn)行YTHDC2下游基因的篩選
        3.4.2 染錳后GC-1 spg細(xì)胞中CCNB1和CCNB2 mRNA表達(dá)和蛋白水平
        3.4.3 染錳后小鼠睪丸中CCNB1和CCNB2 mRNA表達(dá)和蛋白水平
        3.4.4 錳暴露的精漿中CCNB1和CCNB2的mRNA表達(dá)
    3.5 YTHDC2在錳致GC-1 spg細(xì)胞周期阻滯中的作用
        3.5.1 GC-1 spg細(xì)胞YTHDC2 基因轉(zhuǎn)染效率鑒定
        3.5.2 轉(zhuǎn)染后各實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞周期的分析
        3.5.3 轉(zhuǎn)染后染錳GC-1 spg細(xì)胞中CCNB1和CCNB2 mRNA表達(dá)
        3.5.4 轉(zhuǎn)染后染錳GC-1 spg細(xì)胞中CCNB1和CCNB2的蛋白水平
4 討論
5 結(jié)論
附件1
附件2
本研究創(chuàng)新性的自我評價(jià)
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
實(shí)踐報(bào)告
致謝
個人簡介



本文編號：3751691