發(fā)布時間：2023-02-27 22:18

　　目的勃起功能障礙(erectile dysfunction,ED)是最常見的男性性功能障礙疾病。我們前期研究發(fā)現(xiàn)缺氧調控大鼠陰莖海綿體平滑肌細胞(corpora cavernosum smooth muscle cells,CCSMCs)表型轉化,但是其中的分子機制仍然不清楚。血小板衍生生長因子(platelet-derived growth factor,PDGF)相關的通路與細胞表型轉化關系密切,但是多數(shù)研究都集中在血管和氣道平滑肌細胞。我們通過體外實驗探究PDGF相關信號通路在大鼠陰莖海綿體平滑肌細胞表型轉化過程中所起到的作用。方法采用Ⅰ型膠原酶消化法獲得大鼠海綿體平滑肌細胞并進行體外培養(yǎng);以不同濃度PDGF干預CCSMCs,觀察細胞形態(tài)變化,Western-blot法觀察細胞表型變化;使用PDGF受體(PDGF receptor,PDGFR)阻斷劑 crenolanib 和 PDGFR 小分子干擾 RNA(siRNA)處理平滑肌細胞后再以20ng/ml PDGF處理平滑肌細胞,檢測表型相關蛋白、PDGFR蛋白及信號通路蛋白表達的變化;采用細胞轉導和轉錄活化因子3(signal ...

【文章頁數(shù)】：42 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
ABSTRACT
前言
一、材料和方法
    (一) 實驗材料
        1. 實驗動物
        2. 主要試劑
        3. 主要儀器和設備
    (二) 實驗方法
        1. 大鼠海綿體平滑肌細胞的分離、培養(yǎng)
        2. 免疫熒光法(Immunofluorescence,IF)鑒定細胞
        3. PDGF處理平滑肌細胞
        4. PDGF受體阻斷劑crenolanib處理平滑肌細胞
        5. PDGFR、STAT3和AKT基因沉默處理平滑肌細胞
        6. STAT3過表達處理平滑肌細胞
        7. Western-Blot蛋白印跡
        8. 統(tǒng)計方法
二、結果
    (一) CCSMCs的鑒定
    (二) PDGF-BB促平滑肌細胞肥大及由收縮型向合成型轉化
    (三) PDGFR抑制劑可抑制PDGF-BB引起的CCSMCs表型轉化
    (四) STAT3 siRNA可抑制PDGF-BB引起的CCSMCs表型轉化
    (五) STAT3過表達削弱crenolanib對PDGF-BB促表型轉化的抑制作用
三、分析與討論
結論
參考文獻
附圖
致謝
文獻綜述 PDGF在勃起功能障礙中的研宄進展
    參考文獻



本文編號：3751537