目的勃起功能障礙(erectile dysfunction,ED)是最常見的男性性功能障礙疾病。我們前期研究發(fā)現(xiàn)缺氧調(diào)控大鼠陰莖海綿體平滑肌細(xì)胞(corpora cavernosum smooth muscle cells,CCSMCs)表型轉(zhuǎn)化,但是其中的分子機制仍然不清楚。血小板衍生生長因子(platelet-derived growth factor,PDGF)相關(guān)的通路與細(xì)胞表型轉(zhuǎn)化關(guān)系密切,但是多數(shù)研究都集中在血管和氣道平滑肌細(xì)胞。我們通過體外實驗探究PDGF相關(guān)信號通路在大鼠陰莖海綿體平滑肌細(xì)胞表型轉(zhuǎn)化過程中所起到的作用。方法采用Ⅰ型膠原酶消化法獲得大鼠海綿體平滑肌細(xì)胞并進(jìn)行體外培養(yǎng);以不同濃度PDGF干預(yù)CCSMCs,觀察細(xì)胞形態(tài)變化,Western-blot法觀察細(xì)胞表型變化;使用PDGF受體(PDGF receptor,PDGFR)阻斷劑 crenolanib 和 PDGFR 小分子干擾 RNA(siRNA)處理平滑肌細(xì)胞后再以20ng/ml PDGF處理平滑肌細(xì)胞,檢測表型相關(guān)蛋白、PDGFR蛋白及信號通路蛋白表達(dá)的變化;采用細(xì)胞轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄活化因子3(signal ...

【文章頁數(shù)】：42 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
ABSTRACT
前言
一、材料和方法
    (一) 實驗材料
        1. 實驗動物
        2. 主要試劑
        3. 主要儀器和設(shè)備
    (二) 實驗方法
        1. 大鼠海綿體平滑肌細(xì)胞的分離、培養(yǎng)
        2. 免疫熒光法(Immunofluorescence,IF)鑒定細(xì)胞
        3. PDGF處理平滑肌細(xì)胞
        4. PDGF受體阻斷劑crenolanib處理平滑肌細(xì)胞
        5. PDGFR、STAT3和AKT基因沉默處理平滑肌細(xì)胞
        6. STAT3過表達(dá)處理平滑肌細(xì)胞
        7. Western-Blot蛋白印跡
        8. 統(tǒng)計方法
二、結(jié)果
    (一) CCSMCs的鑒定
    (二) PDGF-BB促平滑肌細(xì)胞肥大及由收縮型向合成型轉(zhuǎn)化
    (三) PDGFR抑制劑可抑制PDGF-BB引起的CCSMCs表型轉(zhuǎn)化
    (四) STAT3 siRNA可抑制PDGF-BB引起的CCSMCs表型轉(zhuǎn)化
    (五) STAT3過表達(dá)削弱crenolanib對PDGF-BB促表型轉(zhuǎn)化的抑制作用
三、分析與討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附圖
致謝
文獻(xiàn)綜述 PDGF在勃起功能障礙中的研宄進(jìn)展
    參考文獻(xiàn)



本文編號：3751537