目的:漿細(xì)胞瘤變異型易位體1（PVT1）是一種新的長鏈非編碼RNA,定位于8q24.21,在許多腫瘤研究中,PVT1過表達(dá)已被報道,PVT1與腫瘤細(xì)胞的增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移密切相關(guān),本研究采用多種技術(shù)結(jié)合研究PVT1在前列腺癌中的作用。包括生物信息學(xué)分析、Westernblotting和細(xì)胞遷移分析,我們報道PVT1通過調(diào)節(jié)上皮間質(zhì)化（EMT）,促進(jìn)前列腺癌的侵襲和轉(zhuǎn)移,并且PVT1通過上調(diào)Twist1（一種與EMT相關(guān)的轉(zhuǎn)錄因子）來促進(jìn)EMT,然后我們證實PVT1作為mi RNA-186-5p的海綿,并通過海綿效應(yīng)對Twist1進(jìn)行了正向調(diào)節(jié)。因此,本研究揭示了一種新的機(jī)制。PVT1促進(jìn)前列腺癌中EMT的表達(dá),提示PVT1/mir-186/Twist 1調(diào)節(jié)軸可能成為前列腺癌治療的新靶點。研究方法:1.分析TCGA數(shù)據(jù)庫所下載的前列腺組織以及前列腺癌基因序列中l(wèi)nc RNA-PVT1的表達(dá)情況,應(yīng)用real time-PCR檢測前列腺細(xì)胞系WPMY-1以及前列腺癌細(xì)胞系PC-3,DU145,22RV1中l(wèi)nc RNA-PVT1的表達(dá)情況;2.應(yīng)用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染技術(shù),構(gòu)建高/低表達(dá)lnc RN... 

【文章頁數(shù)】：47 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略語
1 前言
2 材料與方法
    2.1 數(shù)據(jù)獲取以及相關(guān)試劑
        2.1.1 TCGA數(shù)據(jù)庫分析
        2.1.2 細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)試劑及細(xì)胞系
        2.1.3 CCK8試劑盒相關(guān)試劑
        2.1.4 real-timePCR相關(guān)試劑及引物
        2.1.5 westernblot相關(guān)試劑
        2.1.6 westernblot相關(guān)溶液的配置
        2.1.7 transwell相關(guān)試劑
    2.2 實驗方法
        2.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)及細(xì)胞轉(zhuǎn)染
        2.2.2 CCK8增殖實驗
        2.2.3 細(xì)胞蛋白提取及定量
        2.2.4 細(xì)胞mRNA提取及定量
        2.2.5 Real-timePCR檢測RNA方法
        2.2.6 westernblot
        2.2.7 transwell實驗
        2.2.8 平板克隆實驗
3 結(jié)果
    3.1 長鏈非編碼RNAPVT1在前列腺癌組織中表達(dá)增高,并且高表達(dá)PVT1與患者不良預(yù)后呈正相關(guān)
    3.2 體外實驗結(jié)果顯示PVT1促進(jìn)前列腺癌細(xì)胞系的增殖、侵襲與轉(zhuǎn)移
    3.3 LncRNAPVT1在前列腺癌細(xì)胞系中通過調(diào)控Twist1誘導(dǎo)EMT
    3.4 PVT1通過海綿效應(yīng)吸附miR-186從而促進(jìn)Twist1表達(dá)
4 討論
5 結(jié)論
本研究創(chuàng)新性的自我評價
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文及其它成果
致謝
個人簡歷



本文編號：3718368