目的:探討通過雷帕霉素誘導(dǎo)腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞（TAMs）自噬以及對(duì)TAMs自噬的調(diào)控來調(diào)節(jié)膀胱癌細(xì)胞上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）的機(jī)制。方法:用免疫組化染色、免疫熒光檢測(cè)膀胱癌組織和癌旁組織中的自噬相關(guān)蛋白LC3、EMT相關(guān)調(diào)節(jié)因子的表達(dá)水平,并用電鏡觀察其中自噬小體數(shù)量。人單核細(xì)胞（THP-1）細(xì)胞用PMA和IL-4+IL-10相繼作用72h,誘導(dǎo)細(xì)胞極化為TAMs（M2）,觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化,并用流式細(xì)胞術(shù)及免疫熒光檢測(cè)M1和M2表面CD86,CD206,F4/80等標(biāo)志性分子表達(dá)情況,鑒定TAMs極化效率。用自噬調(diào)節(jié)劑雷帕霉素、3-MA干預(yù)TAMs 24h,去除自噬調(diào)節(jié)藥物的干預(yù)48h后,通過Western Blot以及免疫熒光檢測(cè)LC3表達(dá),以及電鏡觀察自噬小體數(shù)量,確定藥物干預(yù)后的TAMs自噬水平。將雷帕霉素干預(yù)后的TAMs與人膀胱癌細(xì)胞（T24）進(jìn)行非接觸共培養(yǎng),Western Blot檢測(cè)膀胱癌細(xì)胞EMT相關(guān)因子的表達(dá),并通過transwell、劃痕方法檢測(cè)膀胱癌細(xì)胞的侵襲和遷移能力。結(jié)果:免疫組化染色檢測(cè)顯示,膀胱癌組織中的自噬相關(guān)蛋白LC3和EMT相關(guān)調(diào)節(jié)因子的表達(dá)水平以及自... 

【文章頁(yè)數(shù)】：66 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
引言
材料與方法
結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
附錄A 中英文對(duì)照縮略詞表
附錄B 主要試劑配制方法
附錄C 個(gè)人簡(jiǎn)介
附錄D 腫瘤微環(huán)境與膀胱癌相關(guān)性的研究進(jìn)展
    參考文獻(xiàn)


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]同步熱放化療治療在中晚期宮頸癌的應(yīng)用價(jià)值[J]. 俞青青,唐榮軍,樓軍,俞玉鳳,何玲紅.  中國(guó)婦幼健康研究. 2015 (04)
[2]肺癌中血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子及突變型p53基因表達(dá)及其臨床意義研究[J]. 李印,車國(guó)衛(wèi),周清華,許金良.  中國(guó)肺癌雜志. 2001(05)



本文編號(hào)：3703709