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過(guò)表達(dá)人核糖核酸酶抑制因子對(duì)人膀胱癌侵襲轉(zhuǎn)移及上表皮間質(zhì)化的影響

發(fā)布時(shí)間:2022-10-11 17:55
  目的 檢測(cè)過(guò)表達(dá)人核糖核酸酶抑制因子(Ribonuclease inhibitor, RI)基因的質(zhì)粒對(duì)人膀胱癌侵襲轉(zhuǎn)移及上皮細(xì)胞間質(zhì)轉(zhuǎn)化(Epithelial-mesenchymal transitio,EMT)現(xiàn)象的影響。探索其可能存在的機(jī)制。 方法 1.將過(guò)表達(dá)RI的質(zhì)粒pIRES2-EGFP-RI及空質(zhì)粒pIRES2-EGFP分別轉(zhuǎn)染人膀胱癌細(xì)胞T24后利用G418篩選陽(yáng)性克。桓鶕(jù)轉(zhuǎn)染的質(zhì)粒不同將細(xì)胞分為3組,分別命名為:T24組(未轉(zhuǎn)染組)、T24Vector (轉(zhuǎn)染pIRES2-EGFP質(zhì)粒)和T24-RI組(轉(zhuǎn)染pIRES2-EGFP-RI質(zhì)粒);RT-PCR檢測(cè)T24細(xì)胞中RI的mRNA水平變化,細(xì)胞免疫熒光及Western blot檢測(cè)RI蛋白的表達(dá)。 2.HE染色及普通光學(xué)顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)的改變;鬼筆環(huán)肽實(shí)驗(yàn)觀察細(xì)胞微管的變化;流式細(xì)胞術(shù)分析各組細(xì)胞的周期變化情況;MTT檢測(cè)細(xì)胞增殖情況;激光共聚焦檢測(cè)RI與ILK的相互關(guān)系;細(xì)胞免疫熒光檢測(cè)ILK下游信號(hào)蛋白p-Akt和p-GSK3β的表達(dá)情況。 3.粘附實(shí)驗(yàn),劃痕實(shí)驗(yàn)及Tran... 

【文章頁(yè)數(shù)】:55 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
英漢縮略語(yǔ)名詞對(duì)照
摘要
ABSTRACT
前言
    參考文獻(xiàn)
第一部分 pIRES2-EGFP-RI 載體對(duì)人膀胱癌細(xì)胞 T24 中 RI 基因及蛋白表達(dá)影響
    1 材料
    2 方法
    3 結(jié)果
    4 結(jié)論
第二部分 過(guò)表達(dá) RI 對(duì)膀胱癌 T24 細(xì)胞形態(tài),周期,增值的影響
    1 材料
    2 方法
    3 結(jié)果
    4 結(jié)論
第三部分 過(guò)表達(dá) RI 對(duì)膀胱癌 T24 細(xì)胞侵襲,遷移及粘附能力的影響
    1 材料
    2 方法
    3 結(jié)果
    4 結(jié)論
第四部分 過(guò)表達(dá) RI 對(duì)膀胱癌 T24 細(xì)胞裸鼠移植瘤生長(zhǎng)的影響
    1 材料
    2 方法
    3 結(jié)果
    4 結(jié)論
討論
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的文章
附圖



本文編號(hào):3691025

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