目的：研究表明，F(xiàn)GF8b在前列腺癌中高表達(dá)，但在正常前列腺組織中幾乎不表達(dá)。故我們選擇FGF8b為靶標(biāo)，從噬菌體展示肽庫中篩選獲得FGF8b特異結(jié)合肽，研究其對前列腺癌的治療潛力及作用機制，從而為抗FGF8b多肽類新藥的研發(fā)奠定基礎(chǔ)。 方法：利用Ph.D.-7噬菌體展示肽庫，以FGF8b為靶標(biāo)經(jīng)過3輪淘選分離獲得高親和力結(jié)合的單克隆噬菌體，ELISA檢測它們對FGF8b的親和力和特異性，從中挑選適合度最高的陽性克隆，經(jīng)DNA測序推導(dǎo)肽序列。對獲得的7組候選肽進(jìn)行序列分析和特性預(yù)測，挑選具有與FGFR3c D2高同源序列的先導(dǎo)肽。選用前列腺癌細(xì)胞PC-3細(xì)胞系和人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞HUVEC細(xì)胞系研究先導(dǎo)肽的細(xì)胞生物活性，采用MTT法檢測細(xì)胞增殖，流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞周期，Western blot檢測相關(guān)信號蛋白Erk1/2、Akt、Cyclin D1、PCNA、p38、JNK、FRS2、STAT5的表達(dá)水平，細(xì)胞劃痕實驗檢測細(xì)胞遷移，探討先導(dǎo)肽對前列腺癌的治療潛力。 結(jié)果：經(jīng)過3輪淘選，我們獲得12個陽性克隆，從中選定了7種候選短肽。序列分析和特性預(yù)測顯示，候選肽P12（H... 

【文章頁數(shù)】：69 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

FGF8b-FGFR2c分子界面示意圖

FGF8與嵌合FGFRs的結(jié)合[33]

FGFR1c和FGFR3c的FGF結(jié)合特異性區(qū)域[33]

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]microRNA與前列腺癌的發(fā)生和轉(zhuǎn)移[J]. 許潑實.  中華臨床醫(yī)師雜志(電子版). 2011(05)
[2]成纖維細(xì)胞生長因子8（FGF8）研究進(jìn)展[J]. 王一,田海山,李校堃.  中國生物工程雜志. 2011(01)
[3]正常血管和腫瘤血管生成的調(diào)節(jié)機制研究進(jìn)展[J]. 孫慧勤,鄒仲敏,卞修武,陳意生,史景泉.  中華病理學(xué)雜志. 2000(03)



本文編號：3685297