膀胱癌是第二常見的泌尿生殖系統(tǒng)惡性腫瘤。隨著年齡的增長(zhǎng),男性和女性的發(fā)病率逐漸增加。男性發(fā)病率約為女性的三倍。在美國(guó),2012年約50,000男性和17,000名女性患膀胱癌。對(duì)香煙及工作環(huán)境致癌物的過度暴露或泌尿系統(tǒng)感染可能引起男性高患病率。然而,即使在缺乏這些危險(xiǎn)因素的情況下,與性別有關(guān)的發(fā)病率的差異依然存在。因此,男女患者間的性激素及其受體的差異可能是膀胱癌發(fā)生率性別差異的潛在因素,然而有關(guān)此方面的證據(jù)仍較少。第一部分雌激素受體α（ERα）抑制膀胱癌細(xì)胞侵襲目的：探討ERα與膀胱癌細(xì)胞侵襲的關(guān)系方法：首先穩(wěn)定轉(zhuǎn)染ERa或空載體質(zhì)粒（vector）進(jìn)入膀胱癌細(xì)胞。嘌呤霉素篩選5天后,免疫熒光測(cè)轉(zhuǎn)染效率。并收集蛋白,Western Blot進(jìn)一步證實(shí)轉(zhuǎn)染效率。同時(shí)利用RNA干擾技術(shù),選擇性的沉默人膀胱癌細(xì)胞株647v中ERα基因的表達(dá)。之后,使用3種ERa陰性膀胱癌細(xì)胞株（T24,UMUC3和J82）和一種ERa陽(yáng)性膀胱癌細(xì)胞株（647v）進(jìn)行Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)。三維侵襲實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步驗(yàn)證這些膀胱癌細(xì)胞株的侵襲能力。結(jié)果：1.成功建立了穩(wěn)定轉(zhuǎn)染ERα及shERα的膀胱癌細(xì)胞株。2... 

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【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
縮略語(yǔ)/符號(hào)說明
前言
    研究現(xiàn)狀、成果
    研究目的、方法
一、ERa抑制膀胱癌細(xì)胞侵襲
    1.1 對(duì)象和方法
        1.1.1 細(xì)胞株
        1.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
        1.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
        1.1.4 主要試劑溶液的配制
        1.1.5 實(shí)驗(yàn)方法
        1.1.6 統(tǒng)計(jì)分析
    1.2 結(jié)果
        1.2.1 Western Blot法驗(yàn)證轉(zhuǎn)染效率
        1.2.2 免疫熒光法驗(yàn)證轉(zhuǎn)染效率
        1.2.3 Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)
        1.2.4 降表達(dá)ERα對(duì)膀胱癌647v細(xì)胞侵襲力影響
        1.2.5 三維侵襲實(shí)驗(yàn)
    1.3 討論
        1.3.1 膀胱癌發(fā)病的病因及性別因素的影響
        1.3.2 雌激素及其受體在膀胱癌的表達(dá)
        1.3.3 腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移
    1.4 小結(jié)
二、ERα敲除鼠模型建立及ERα抑制膀胱癌侵襲
    2.1 對(duì)象和方法
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
        2.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
        2.1.4 主要試劑溶液的配制
        2.1.5 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1.6 統(tǒng)計(jì)分析
    2.2 結(jié)果
        2.2.1 建立ERαKO鼠模型及其基因型分析
        2.2.2 BBN誘導(dǎo)膀胱癌發(fā)生及血尿檢測(cè)
        2.2.3 膀胱癌侵襲性
        2.2.4 生存率分析
    2.3 討論
        2.3.1 ERaKO基因敲除鼠模型
        2.3.2 BBN誘導(dǎo)膀胱癌鼠模型
        2.3.3 其他膀胱癌動(dòng)物模型
    2.4 小結(jié)
三、ERa調(diào)節(jié)IGF1、MMP2表達(dá)抑制膀胱癌侵襲
    3.1 對(duì)象和方法
        3.1.1 細(xì)胞株
        3.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
        3.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
        3.1.4 主要試劑溶液的配制
        3.1.5 實(shí)驗(yàn)方法
        3.1.6 統(tǒng)計(jì)分析
    3.2 結(jié)果
        3.2.1 UMUC3細(xì)胞過表達(dá)ERα后侵襲相關(guān)因子表達(dá)差異
        3.2.2 過表達(dá)ERα后IGF1和MMP2表達(dá)降低
        3.2.3 降表達(dá)ERα后IGF1和MMP2表達(dá)升高
        3.2.4 IGF1調(diào)控MMP2表達(dá)
        3.2.5 ERα/IGF1影響膀胱癌侵襲
        3.2.6 MMP2影響膀胱癌侵襲
        3.2.7 ERα/IGF1/MMP2在膀胱癌組織中表達(dá)
    3.3 討論
        3.3.1 IGF1與腫瘤侵襲
        3.3.2 MMP2與腫瘤侵襲
        3.3.3 ERα/IGF1/MMP2軸影響膀胱癌侵襲
    3.4 小結(jié)
四、ERα激動(dòng)劑體外和體內(nèi)治療膀胱癌
    4.1 對(duì)象和方法
        4.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與細(xì)胞
        4.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
        4.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
        4.1.4 主要試劑溶液的配制
        4.1.5 實(shí)驗(yàn)方法
        4.1.6 統(tǒng)計(jì)分析
    4.2 結(jié)果
        4.2.1 ERα激動(dòng)劑PPT抑制膀胱癌細(xì)胞侵襲
        4.2.2 ERα激動(dòng)劑PPT抑制BBN鼠模型膀胱癌侵襲
        4.2.3 PPT治療對(duì)鼠生存率影響
    4.3 討論
        4.3.1 膀胱癌的治療
        4.3.2 雌激素受體調(diào)節(jié)劑治療膀胱癌
    4.4 小結(jié)
全文結(jié)論
論文創(chuàng)新點(diǎn)
參考文獻(xiàn)
發(fā)表論文和參加科研情況說明
綜述
    綜述參考文獻(xiàn)
致謝



本文編號(hào)：3673725