目的:巨噬細(xì)胞浸潤是糖尿病腎�。―iabetic Nephropathy,DN）的重要組織病理特征,其在局部微環(huán)境中的活化狀態(tài)是決定疾病轉(zhuǎn)歸和預(yù)后的主要因素。前期研究結(jié)果表明DN患者腎組織中浸潤的巨噬細(xì)胞以M1型活化為主,M2型所占比例明顯下降。自噬是一種由溶酶體介導(dǎo)的對(duì)細(xì)胞內(nèi)過多或異常的蛋白質(zhì)及細(xì)胞器進(jìn)行降解的過程,是一個(gè)高度動(dòng)態(tài)的、多階段的過程,也稱為自噬流,主要包括自噬體和自噬溶酶體兩個(gè)階段。近來研究發(fā)現(xiàn),自噬在許多細(xì)胞功能的調(diào)節(jié)中發(fā)揮著重要作用,然而其在巨噬細(xì)胞M1/M2表型轉(zhuǎn)換中是否存在作用及具體機(jī)制尚需進(jìn)一步探討。本研究擬通過體外培養(yǎng)巨噬細(xì)胞,探討自噬對(duì)高糖環(huán)境下巨噬細(xì)胞活化狀態(tài)的影響,并進(jìn)一步探索自噬流各階段對(duì)巨噬細(xì)胞表型轉(zhuǎn)化的影響,為利用自噬調(diào)控巨噬細(xì)胞活化狀態(tài)來防治疾病的發(fā)生和發(fā)展提供可能。方法:（1）用30.0 mmol/L葡萄糖孵育小鼠巨噬細(xì)胞RAW264.7,用自噬激活劑（RAPA）及抑制劑（3-MA）干預(yù),通過Western blot、免疫熒光檢測(cè)M1型標(biāo)志物iNOS、TNF-α和M2型標(biāo)志物MR、Arg-1,及自噬標(biāo)志物L(fēng)C3、Beclin-1、p62的表達(dá)... 

【文章頁數(shù)】：64 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮寫詞表
第一章 緒論
    1.1 糖尿病腎病與巨噬細(xì)胞
    1.2 自噬失調(diào)參與糖尿病腎病發(fā)展
    1.3 自噬與巨噬細(xì)胞表型
    1.4 自噬流的概念
    1.5 展望
第二章 文獻(xiàn)綜述
    2.1 巨噬細(xì)胞概述
    2.2 巨噬細(xì)胞表型與功能
    2.3 巨噬細(xì)胞與腎臟損傷和修復(fù)
    2.4 總結(jié)
第三章 研究材料
    3.1 細(xì)胞株選擇
    3.2 主要儀器
    3.3 主要試劑及配制
第四章 實(shí)驗(yàn)方法
    4.1 細(xì)胞培養(yǎng)
    4.2 Westernblot
    4.3 免疫熒光技術(shù)
    4.4 超薄切片技術(shù)
    4.5 數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計(jì)學(xué)統(tǒng)計(jì)
第五章 研究內(nèi)容
    5.1 自噬對(duì)高糖誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞(RAW264.7)活化狀態(tài)的影響
    5.2 巨噬細(xì)胞(RAW264.7)經(jīng)典活化模型(M1模型)的自噬情況
    5.3 自噬流各階段對(duì)巨噬細(xì)胞(RAW264.7)經(jīng)典活化模型(M1模型)表型轉(zhuǎn)化的影響
第六章 技術(shù)路線
    6.1 自噬對(duì)高糖誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞(RAW264.7)活化狀態(tài)的影響
    6.2 自噬流各階段對(duì)巨噬細(xì)胞(RAW264.7)M1/M2型表型轉(zhuǎn)化的影響
第七章 研究結(jié)果
    7.1 自噬參與高糖誘導(dǎo)的小鼠巨噬細(xì)胞(RAW264.7)M1型活化
    7.2 調(diào)節(jié)自噬流可調(diào)控小鼠巨噬細(xì)胞(RAW264.7)M1/M2表型轉(zhuǎn)化
第八章 討論
第九章 結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
作者簡介


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Diabetic nephropathy and inflammation[J]. Montserrat B Duran-Salgado,Alberto F Rubio-Guerra.  World Journal of Diabetes. 2014(03)



本文編號(hào)：3668480