內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激在對(duì)比劑誘導(dǎo)的人腎小管上皮細(xì)胞凋亡中的作用及阿托伐他汀對(duì)其的保護(hù)作用
發(fā)布時(shí)間:2017-05-12 06:14
本文關(guān)鍵詞:內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激在對(duì)比劑誘導(dǎo)的人腎小管上皮細(xì)胞凋亡中的作用及阿托伐他汀對(duì)其的保護(hù)作用,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:目的:探討內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激(ERS)在對(duì)比劑(CM)誘導(dǎo)人腎小管上皮細(xì)胞(HKC)凋亡中的作用及阿托伐他汀(ATO)對(duì)其的保護(hù)作用。方法:以HKC為研究對(duì)象,在ATO預(yù)處理及缺血缺氧條件下,將細(xì)胞株隨機(jī)分為六組:空白組、CM組(加入120mg I/m L碘普羅胺預(yù)處理2h)、抗凋亡劑N-乙酰半胱氨酸(NAC)組(加入10mmol/L NAC預(yù)處理2h,再加120mg I/m L碘普羅胺處理2h)、ATO低、中、高劑量組(分別加入10-8、10-7、10-6mol/L的ATO預(yù)處理后再加120mg I/m L碘普羅胺處理2h),在預(yù)先設(shè)定的處理?xiàng)l件下將6組細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)。此后,用細(xì)胞計(jì)數(shù)試劑-8法(CCK-8)檢測(cè)細(xì)胞增殖情況,乳酸脫氫酶(LDH)檢測(cè)細(xì)胞損傷,全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)和培養(yǎng)液中髓過氧化物酶(MPO)、丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)水平,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡,蛋白質(zhì)印跡法(Western Blot)檢測(cè)細(xì)胞中GPR78、CHOP和caspase-12的蛋白表達(dá)水平,實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(real-time PCR)檢測(cè)細(xì)胞中GPR78、CHOP和caspase-12的m RNA表達(dá)水平。結(jié)果:CM可明顯降低細(xì)胞活性并造成正常HKC細(xì)胞和缺血缺氧HKC細(xì)胞的損傷,引起細(xì)胞內(nèi)MPO、MDA減少,細(xì)胞外SOD增多。ATO可提高細(xì)胞活性并減輕細(xì)胞損傷,引起細(xì)胞內(nèi)MPO、MDA增多,細(xì)胞外SOD減少。其中ATO對(duì)缺血缺氧HKC細(xì)胞的影響較為明顯,且呈現(xiàn)明顯的劑量依賴性。CM明顯增加了GPR78、CHOP和caspase-12的蛋白表達(dá)和細(xì)胞凋亡率,抗凋亡劑NAC明顯降低了caspase-12的表達(dá)和細(xì)胞凋亡率,但不能明顯降低對(duì)比劑誘導(dǎo)的GPR78和CHOP高表達(dá)。ATO預(yù)處理可降低GPR78、CHOP和caspase-12的表達(dá),且呈現(xiàn)明顯的劑量依賴性,從而起到對(duì)HKC的保護(hù)作用。結(jié)論:在缺血缺氧條件下,CM誘導(dǎo)HKC細(xì)胞活性下降、凋亡,此作用可能與細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)。阿托伐他汀對(duì)對(duì)比劑誘導(dǎo)的HKC細(xì)胞凋亡具有一定的保護(hù)作用,其可通過降低細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激水平來減少對(duì)比劑誘導(dǎo)的HKC細(xì)胞凋亡。
【關(guān)鍵詞】:人腎小管上皮細(xì)胞 阿托伐他汀 細(xì)胞凋亡 對(duì)比劑 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激 氧化應(yīng)激
【學(xué)位授予單位】:福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:R692
【目錄】:
- 英文縮略表4-5
- 中文摘要5
- 英文摘要5-7
- 1 前言7-9
- 2 材料9-10
- 3 方法10-21
- 4 結(jié)果21-30
- 5 討論30-33
- 6 結(jié)論33-34
- 參考文獻(xiàn)34-38
- 綜述38-43
- 參考文獻(xiàn)41-43
- 致謝43
【參考文獻(xiàn)】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條
1 鐘理,宋治遠(yuǎn);模擬缺血-再灌注誘導(dǎo)原代培養(yǎng)乳鼠竇房結(jié)細(xì)胞凋亡的研究[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2001年01期
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本文編號(hào):358966
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