發(fā)布時間：2022-01-08 01:49

　　目的：探討骨髓間充質(zhì)干細胞（BM-MSC）分離、純化和細胞鑒定的方法和超順磁氧化鐵（SPIO）標記BM-MSC方法的安全性及可行性,分析BM-MSC在體內(nèi)分布與細胞輸注途徑的關系,以確定BM-MSC的最佳輸注途徑。方法：取西藏小型豬骨髓,采用密度梯度離心法對骨髓間充質(zhì)干細胞進行分離和純化,觀察其生長曲線。對所獲取的細胞進行成脂、成骨誘導分化,并應用流式細胞術(shù)檢測細胞表面標志物CD45/CD90/CD105,以鑒定所純化細胞是否為BM-MSC。應用SPIO對BM-MSC進行體外標記,用MTT法檢測不同濃度SPIO對標記后細胞活力和增殖能力的影響。建立西藏小型豬同種異體腎移植模型,分別經(jīng)移植腎動脈和經(jīng)髂總靜脈輸注SPIO標記的BM-MSC,切取受體豬各器官,通過普魯士藍染色和透射電鏡觀察標記的BM-MSC在移植腎、肺臟及其他器官的分布情況。結(jié)果：應用梯度密度離心法可獲取高純度的BM-MSC,細胞具有良好的生長活力和傳代能力。BM-MSC可經(jīng)誘導向成骨細胞和脂肪細胞分化,應用茜紅素和油紅O染色可檢測出細胞中鈣結(jié)節(jié)和脂肪顆粒；經(jīng)流式細胞術(shù)檢測細胞表面標志物CD90陽性率為96.9%,CD105... 

【文章來源】：中南大學湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：139 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮略飼表
前言
第一部分 骨髓間充質(zhì)干細胞的分離、純化、鑒定及體內(nèi)分布與輸注途徑的關系
    前言
    材料和方法
    結(jié)果
    討論
    結(jié)論
    參考文獻
第二部分 自體BM-MSC誘導親屬活體供腎移植免疫耐受的臨床初步研究
    前言
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
    結(jié)論
    參考文獻
第三部分 骨髓間充質(zhì)干細胞修復慢性移植腎損傷的臨床實驗研究
    前言
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
    結(jié)論
    參考文獻
綜述
    參考文獻
攻讀博士學位期間的主要研究成果
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]骨髓間充質(zhì)干細胞對異種胰島移植排斥反應的影響[J]. 張劍,張琪,張英才,姜楠,汪國營,李華,汪根樹,楊揚,陳規(guī)劃.  器官移植. 2011(06)
[2]第三方骨髓間充質(zhì)干細胞誘導同種異體移植受體免疫耐受機制的研究[J]. 齊丙迪,孟寶璽,楊陽,劉蓓,李翅翅,夏煒,郭樹忠,張晨.  中華整形外科雜志. 2011 (03)
[3]CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg調(diào)節(jié)性T細胞與移植腎長期存活的關系[J]. 楊一芬,陳遠林,楊靜芬.  廣東醫(yī)學. 2011(01)
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[5]食蟹猴腎移植模型的建立[J]. 李綱,尚玉璞,曾林,馬蘭芝,黃斌,侯知源.  中國比較醫(yī)學雜志. 2008(10)
[6]骨髓間充質(zhì)干細胞誘導肝移植術(shù)后免疫耐受的研究[J]. 洪再發(fā),黃小進,尹震宇,王效民.  肝膽外科雜志. 2008(05)
[7]同種異體骨髓間充質(zhì)干細胞對腎小管周毛細血管叢修復影響的研究[J]. 鄒杰,馮江敏,李維,郭偉,王力寧.  中國中西醫(yī)結(jié)合雜志. 2008(02)
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[9]未分化骨髓間充質(zhì)干細胞的免疫學特性研究[J]. 張曉玲,戴尅戎,湯亭亭,張超,周蕓,周光炎.  中華實驗外科雜志. 2006(02)
[10]供體骨髓間充質(zhì)干細胞干預非協(xié)調(diào)性異種肝移植免疫排斥反應的實驗研究[J]. 王建偉,劉穎斌,許斌,李江濤,錢浩然,張茂,彭淑牖.  中華外科雜志. 2005(19)



本文編號：3575665