目的：探討骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（BM-MSC）分離、純化和細(xì)胞鑒定的方法和超順磁氧化鐵（SPIO）標(biāo)記BM-MSC方法的安全性及可行性,分析BM-MSC在體內(nèi)分布與細(xì)胞輸注途徑的關(guān)系,以確定BM-MSC的最佳輸注途徑。方法：取西藏小型豬骨髓,采用密度梯度離心法對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞進(jìn)行分離和純化,觀察其生長(zhǎng)曲線。對(duì)所獲取的細(xì)胞進(jìn)行成脂、成骨誘導(dǎo)分化,并應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞表面標(biāo)志物CD45/CD90/CD105,以鑒定所純化細(xì)胞是否為BM-MSC。應(yīng)用SPIO對(duì)BM-MSC進(jìn)行體外標(biāo)記,用MTT法檢測(cè)不同濃度SPIO對(duì)標(biāo)記后細(xì)胞活力和增殖能力的影響。建立西藏小型豬同種異體腎移植模型,分別經(jīng)移植腎動(dòng)脈和經(jīng)髂總靜脈輸注SPIO標(biāo)記的BM-MSC,切取受體豬各器官,通過普魯士藍(lán)染色和透射電鏡觀察標(biāo)記的BM-MSC在移植腎、肺臟及其他器官的分布情況。結(jié)果：應(yīng)用梯度密度離心法可獲取高純度的BM-MSC,細(xì)胞具有良好的生長(zhǎng)活力和傳代能力。BM-MSC可經(jīng)誘導(dǎo)向成骨細(xì)胞和脂肪細(xì)胞分化,應(yīng)用茜紅素和油紅O染色可檢測(cè)出細(xì)胞中鈣結(jié)節(jié)和脂肪顆粒；經(jīng)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞表面標(biāo)志物CD90陽(yáng)性率為96.9%,CD105... 

【文章來源】：中南大學(xué)湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：139 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮略飼表
前言
第一部分 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分離、純化、鑒定及體內(nèi)分布與輸注途徑的關(guān)系
    前言
    材料和方法
    結(jié)果
    討論
    結(jié)論
    參考文獻(xiàn)
第二部分 自體BM-MSC誘導(dǎo)親屬活體供腎移植免疫耐受的臨床初步研究
    前言
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
    結(jié)論
    參考文獻(xiàn)
第三部分 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞修復(fù)慢性移植腎損傷的臨床實(shí)驗(yàn)研究
    前言
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
    結(jié)論
    參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀博士學(xué)位期間的主要研究成果
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)異種胰島移植排斥反應(yīng)的影響[J]. 張劍,張琪,張英才,姜楠,汪國(guó)營(yíng),李華,汪根樹,楊揚(yáng),陳規(guī)劃.  器官移植. 2011(06)
[2]第三方骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)同種異體移植受體免疫耐受機(jī)制的研究[J]. 齊丙迪,孟寶璽,楊陽(yáng),劉蓓,李翅翅,夏煒,郭樹忠,張晨.  中華整形外科雜志. 2011 (03)
[3]CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg調(diào)節(jié)性T細(xì)胞與移植腎長(zhǎng)期存活的關(guān)系[J]. 楊一芬,陳遠(yuǎn)林,楊靜芬.  廣東醫(yī)學(xué). 2011(01)
[4]一種簡(jiǎn)便可靠的兔腎移植模型的建立[J]. 曾春林,肖序仁,郁華亮.  軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院學(xué)報(bào). 2009(02)
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[6]骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)肝移植術(shù)后免疫耐受的研究[J]. 洪再發(fā),黃小進(jìn),尹震宇,王效民.  肝膽外科雜志. 2008(05)
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