目的通過構(gòu)建的遺傳性高鈣尿大鼠模型,探討骨形成相關(guān)因子和1,25（OH）2D3/VDR在腎結(jié)石形成中的作用。方法1.18只大鼠被分成2組,10只20代高鈣尿大鼠作為實(shí)驗(yàn)組,8只體重與高鈣尿大鼠相當(dāng)?shù)腟D大鼠作為對(duì)照組。大鼠處死后取出腎臟,應(yīng)用RT-PCR和Western blot分別檢測(cè)兩組大鼠腎組織中BMP2, Runx2, Osterix, MSX2,OPN和ALP在mRNA和蛋白水平的表達(dá)。2.45只22代高鈣尿大鼠和30只23代高鈣尿大鼠被分成三組,每組25只,分別為生理鹽水組,VDR干擾組和空病毒組。在實(shí)驗(yàn)開始前和開始后的第3、7、14和28天,每組分別處死5只高鈣尿大鼠,檢測(cè)兩組大鼠腎組織中BMP2,Runx2, Osterix和OPN在mRNA和蛋白水平的表達(dá)；應(yīng)用Van kossa染色法顯示腎組織鈣化情況；應(yīng)用免疫組化法檢測(cè)OPN的表達(dá)。3.取高鈣尿大鼠腎臟,分離、培養(yǎng)腎小管上皮細(xì)胞。將腎小管上皮細(xì)胞分別用生理鹽水,VDR慢病毒載體和空病毒載體進(jìn)行處理,在細(xì)胞處理后6,12,24,48和96小時(shí)后分別收集細(xì)胞,檢測(cè)處理前后不同時(shí)間點(diǎn)BMP2, Runx2和Osterix... 

【文章來源】：華中科技大學(xué)湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：118 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
縮略語表
中文摘要
ABSTRACT
第一部分 慢病毒載體介導(dǎo)RNAi抑制VDR表達(dá)對(duì)遺傳性高鈣尿大鼠腎臟內(nèi)骨形成相關(guān)因子及腎結(jié)石形成的影響
    前言
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
    結(jié)論
    參考文獻(xiàn)
第二部分 1，25(0H)2D3/VDR對(duì)腎小管上皮細(xì)胞骨形成相關(guān)因子及細(xì)胞媽化的影響
    前言
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
    結(jié)論
    參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間的主要研究成果
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]腎結(jié)石患者血清中納米細(xì)菌的培養(yǎng)和形態(tài)學(xué)研究[J]. 陳亮,黃曉波,許清泉,李建興,賈曉軍,王曉峰.  北京大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2010(04)
[2]遺傳特發(fā)性高鈣尿大鼠模型的建立[J]. 王少剛,羅冬喜,劉繼紅,楊奕,孫曉松,席啟林,陳志強(qiáng),楊為民,葉章群.  中華泌尿外科雜志. 2006(S2)



本文編號(hào)：3546679