發(fā)布時(shí)間：2021-11-19 07:19

　　目的探討游離脂肪酸（Free Fatty Acid,FFA）對人前列腺癌細(xì)胞PC-3生物學(xué)行為的影響及可能機(jī)制。方法1. 5mmol/L FFA混合液（油酸∶棕櫚酸=2∶1）刺激體外培養(yǎng)的PC-3細(xì)胞,CCK-8法檢測對細(xì)胞的毒性作用,流式細(xì)胞儀檢測對增殖的影響,Transwell法檢測對侵襲、遷移的影響。細(xì)胞轉(zhuǎn)染和RNA干擾技術(shù)上/下調(diào)AMPK。qRT-PCR技術(shù)檢測AMPK、Vimentin及VEGF的mRNA表達(dá)水平。Western Blot檢測蛋白表達(dá)水平。結(jié)果 （1）1. 5 mmol/L FFA混合液處理48h后,PC-3細(xì)胞的增殖、侵襲和遷移能力均顯著增強(qiáng)（P<0. 05）,細(xì)胞內(nèi)AMPK、Vimentin及VEGF的mRNA表達(dá)顯著升高（P<0. 05）。（2） 1. 5 mmol/L FFA混合液作用于PC-3細(xì)胞的同時(shí)下調(diào)AMPK,PC-3細(xì)胞的增殖、侵襲和遷移能力顯著降低（P<0. 05）,Vimentin的mRNA表達(dá)顯著降低（P<0. 05）。（3）上調(diào)AMPK表達(dá)48 h后,PC-3細(xì)胞的增殖、侵襲和遷移能力顯著增強(qiáng)（P<0. ... 

【文章來源】：石河子大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2020,38(02)北大核心

【文章頁數(shù)】：7 頁

【部分圖文】：

FFA混合液對PC-3細(xì)胞生物學(xué)行為以及AMPK、Vimentin和VEGF表達(dá)的影響

Transwell實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，與FFA單純干預(yù)組相比，PC-3細(xì)胞的侵襲和遷移能力顯著降低(P<0.01)(圖2B)。qRT-PCR結(jié)果顯示:與FFA單純干預(yù)組相比，PC-3細(xì)胞中Vimentin的表達(dá)顯著降低(P<0.01)(圖2C)。2.3 AMPK可通過調(diào)控Vimentin的表達(dá)，促進(jìn)PC-3細(xì)胞的增殖、侵襲和遷移

細(xì)胞周期實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:過表達(dá)AMPK后處于G0/G1期的PC-3細(xì)胞數(shù)目顯著降低，而處于S期的PC-3細(xì)胞數(shù)目顯著增加(P<0.05)(圖3C)。Transwell實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:與對照組相比，PC-3細(xì)胞的侵襲和遷移能力均顯著增加(P<0.01)(圖3D)。qRT-PCR結(jié)果顯示:過表達(dá)AMPK可顯著促進(jìn)PC-3細(xì)胞Vimentin的表達(dá)，而抑制VEGF的表達(dá)(P<0.01)(圖3E)。轉(zhuǎn)染si-AMPK 24 h后，與對照組相比，PC-3細(xì)胞內(nèi)AMPK的mRNA和蛋白表達(dá)水平均顯著降低(P<0.05)，提示下調(diào)AMPK模型構(gòu)建成功，可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)(圖4A、圖4B)。細(xì)胞周期實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:與對照組相比，下調(diào)AMPK后處于G0/G1期的PC-3細(xì)胞數(shù)目顯著增加，而處于S期和G2/M期的PC-3細(xì)胞數(shù)目顯著降低(P<0.05)(圖4C)。


本文編號：3504554