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納米羥基磷灰石通過溶酶體-線粒體通路誘導(dǎo)腎小管上皮細(xì)胞的凋亡機(jī)制

發(fā)布時(shí)間:2021-10-13 00:36
  目的探索納米羥基磷灰石(HAP)對(duì)腎小管上皮細(xì)胞(HK-2細(xì)胞)凋亡的影響及其機(jī)制。方法將不同濃度的(0、5、10、20、40、80μg/mL)的HAP作用于HK-2細(xì)胞,使用MTT、活細(xì)胞/死細(xì)胞染色檢測(cè)HAP對(duì)HK-2細(xì)胞增殖的影響。以0、10、20、40μg/mL的HAP作用HK-2細(xì)胞6、24 h,用流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞的凋亡及壞死情況。HAP(40μg/mL)作用于HK-2細(xì)胞6 h,用激光共聚焦顯微鏡觀察HAP在細(xì)胞內(nèi)的分布。以0、10、20、40μg/mL的HAP作用HK-2細(xì)胞6 h,用酶標(biāo)儀檢測(cè)過氧化氫(H2O2)水平和加入抗氧化劑N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)后HK-2細(xì)胞活性的改變,用流式細(xì)胞儀檢測(cè)活性氧(ROS)、線粒體膜電位(Δψm)、caspase-3水平。結(jié)果 HAP可明顯的抑制HK-2細(xì)胞的增殖,且呈濃度-時(shí)間依賴性。HAP誘導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)ROS升高、線粒體膜電位(Δψm)降低、溶酶體完整性破壞、caspase-3水平增加,從而導(dǎo)致細(xì)胞凋亡。結(jié)論 HAP通過溶酶體和線粒體途徑誘導(dǎo)HK-2細(xì)胞凋亡,并呈濃度依賴性。 

【文章來源】:實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志. 2020,36(12)北大核心

【文章頁數(shù)】:7 頁

【文章目錄】:
1 材料與方法
    1.1 主要試劑
    1.2 實(shí)驗(yàn)方法
        1.2.1 HAP的合成和表征
        1.2.2 細(xì)胞培養(yǎng)
        1.2.3 HK-2細(xì)胞存活率和活細(xì)胞/死細(xì)胞染色檢測(cè)
        1.2.4 HK-2細(xì)胞凋亡測(cè)定
        1.2.5 HAP在HK-2細(xì)胞內(nèi)分布
        1.2.6 ROS的檢測(cè)
        1.2.7 溶酶體完整性檢測(cè)
    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 HAP表征
    2.2 HAP對(duì)的HK-2細(xì)胞存活率影響
    2.3 HAP引起的HK-2細(xì)胞調(diào)亡
    2.4 HAP在HK-2細(xì)胞中的分布
    2.5 HAP誘導(dǎo)HK-2細(xì)胞ROS的釋放
    2.6 HAP對(duì)HK-2細(xì)胞溶酶體膜完整性的影響
    2.7 HAP對(duì)HK-2細(xì)胞線粒體功能的影響
    2.8 caspase-3的釋放
3 討論


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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本文編號(hào):3433615

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