納米羥基磷灰石通過溶酶體-線粒體通路誘導腎小管上皮細胞的凋亡機制
發(fā)布時間:2021-10-13 00:36
目的探索納米羥基磷灰石(HAP)對腎小管上皮細胞(HK-2細胞)凋亡的影響及其機制。方法將不同濃度的(0、5、10、20、40、80μg/mL)的HAP作用于HK-2細胞,使用MTT、活細胞/死細胞染色檢測HAP對HK-2細胞增殖的影響。以0、10、20、40μg/mL的HAP作用HK-2細胞6、24 h,用流式細胞儀檢測細胞的凋亡及壞死情況。HAP(40μg/mL)作用于HK-2細胞6 h,用激光共聚焦顯微鏡觀察HAP在細胞內(nèi)的分布。以0、10、20、40μg/mL的HAP作用HK-2細胞6 h,用酶標儀檢測過氧化氫(H2O2)水平和加入抗氧化劑N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)后HK-2細胞活性的改變,用流式細胞儀檢測活性氧(ROS)、線粒體膜電位(Δψm)、caspase-3水平。結(jié)果 HAP可明顯的抑制HK-2細胞的增殖,且呈濃度-時間依賴性。HAP誘導細胞內(nèi)ROS升高、線粒體膜電位(Δψm)降低、溶酶體完整性破壞、caspase-3水平增加,從而導致細胞凋亡。結(jié)論 HAP通過溶酶體和線粒體途徑誘導HK-2細胞凋亡,并呈濃度依賴性。
【文章來源】:實用醫(yī)學雜志. 2020,36(12)北大核心
【文章頁數(shù)】:7 頁
【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 主要試劑
1.2 實驗方法
1.2.1 HAP的合成和表征
1.2.2 細胞培養(yǎng)
1.2.3 HK-2細胞存活率和活細胞/死細胞染色檢測
1.2.4 HK-2細胞凋亡測定
1.2.5 HAP在HK-2細胞內(nèi)分布
1.2.6 ROS的檢測
1.2.7 溶酶體完整性檢測
1.3 統(tǒng)計學方法
2 結(jié)果
2.1 HAP表征
2.2 HAP對的HK-2細胞存活率影響
2.3 HAP引起的HK-2細胞調(diào)亡
2.4 HAP在HK-2細胞中的分布
2.5 HAP誘導HK-2細胞ROS的釋放
2.6 HAP對HK-2細胞溶酶體膜完整性的影響
2.7 HAP對HK-2細胞線粒體功能的影響
2.8 caspase-3的釋放
3 討論
【參考文獻】:
期刊論文
[1]Coprecipitation Synthesis of Fluorides Nanoparticles with Multiform Structures and Mechanisms Research[J]. 吳睿,ZHANG Shenghai,ZHANG Qiang,LIU Cunfang,SONG Juan,HAO Liang,TIAN Guanghui,呂家根. Journal of Wuhan University of Technology(Materials Science). 2019(03)
[2]納米細菌對腎小管上皮細胞損傷在腎結(jié)石形成中作用的研究[J]. 王議鶴,王勤章,吳雙,申茂磊,褚浩,錢成,錢彪. 中國全科醫(yī)學. 2018(35)
[3]血漿輸注通過抑制肝細胞凋亡對脂多糖/D-半乳糖誘導的小鼠急性肝損傷的保護作用(英文)[J]. Bing-yu CHEN,Lu-xi JIANG,Ke HAO,Lu WANG,Ying WANG,Yi-wei XIE,Jian SHEN,Meng-hua ZHU,Xiang-ming TONG,Kai-qiang LI,Zhen WANG. Journal of Zhejiang University-Science B(Biomedicine & Biotechnology). 2018(06)
[4]羥基磷灰石對人腎小管上皮細胞骨橋蛋白表達的影響及機制探討[J]. 余駿川,鄧耀良,黎承楊,陶芝偉,關曉峰,吳基華,寧鑫,劉云龍,何子奇,劉權. 山東醫(yī)藥. 2017(14)
[5]糖基化終產(chǎn)物通過其受體激活NADPH氧化酶及其下游通路誘導L細胞的凋亡[J]. 胡穎輝,張振,雷蕾,楊銳,林江虹,曾惠嫻,陳宏. 實用醫(yī)學雜志. 2017(03)
[6]常熟地區(qū)728例尿結(jié)石患者的尿石成分與24小時尿液分析異常的相關性[J]. 朱海亮,王競,程靜,范波. 實用醫(yī)學雜志. 2016(04)
[7]PCNL與FURL在腎結(jié)石治療中的應用進展[J]. 王一行,關超. 海南醫(yī)學院學報. 2016(04)
本文編號:3433615
【文章來源】:實用醫(yī)學雜志. 2020,36(12)北大核心
【文章頁數(shù)】:7 頁
【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 主要試劑
1.2 實驗方法
1.2.1 HAP的合成和表征
1.2.2 細胞培養(yǎng)
1.2.3 HK-2細胞存活率和活細胞/死細胞染色檢測
1.2.4 HK-2細胞凋亡測定
1.2.5 HAP在HK-2細胞內(nèi)分布
1.2.6 ROS的檢測
1.2.7 溶酶體完整性檢測
1.3 統(tǒng)計學方法
2 結(jié)果
2.1 HAP表征
2.2 HAP對的HK-2細胞存活率影響
2.3 HAP引起的HK-2細胞調(diào)亡
2.4 HAP在HK-2細胞中的分布
2.5 HAP誘導HK-2細胞ROS的釋放
2.6 HAP對HK-2細胞溶酶體膜完整性的影響
2.7 HAP對HK-2細胞線粒體功能的影響
2.8 caspase-3的釋放
3 討論
【參考文獻】:
期刊論文
[1]Coprecipitation Synthesis of Fluorides Nanoparticles with Multiform Structures and Mechanisms Research[J]. 吳睿,ZHANG Shenghai,ZHANG Qiang,LIU Cunfang,SONG Juan,HAO Liang,TIAN Guanghui,呂家根. Journal of Wuhan University of Technology(Materials Science). 2019(03)
[2]納米細菌對腎小管上皮細胞損傷在腎結(jié)石形成中作用的研究[J]. 王議鶴,王勤章,吳雙,申茂磊,褚浩,錢成,錢彪. 中國全科醫(yī)學. 2018(35)
[3]血漿輸注通過抑制肝細胞凋亡對脂多糖/D-半乳糖誘導的小鼠急性肝損傷的保護作用(英文)[J]. Bing-yu CHEN,Lu-xi JIANG,Ke HAO,Lu WANG,Ying WANG,Yi-wei XIE,Jian SHEN,Meng-hua ZHU,Xiang-ming TONG,Kai-qiang LI,Zhen WANG. Journal of Zhejiang University-Science B(Biomedicine & Biotechnology). 2018(06)
[4]羥基磷灰石對人腎小管上皮細胞骨橋蛋白表達的影響及機制探討[J]. 余駿川,鄧耀良,黎承楊,陶芝偉,關曉峰,吳基華,寧鑫,劉云龍,何子奇,劉權. 山東醫(yī)藥. 2017(14)
[5]糖基化終產(chǎn)物通過其受體激活NADPH氧化酶及其下游通路誘導L細胞的凋亡[J]. 胡穎輝,張振,雷蕾,楊銳,林江虹,曾惠嫻,陳宏. 實用醫(yī)學雜志. 2017(03)
[6]常熟地區(qū)728例尿結(jié)石患者的尿石成分與24小時尿液分析異常的相關性[J]. 朱海亮,王競,程靜,范波. 實用醫(yī)學雜志. 2016(04)
[7]PCNL與FURL在腎結(jié)石治療中的應用進展[J]. 王一行,關超. 海南醫(yī)學院學報. 2016(04)
本文編號:3433615
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