伴PTEN突變前列腺癌細(xì)胞株P(guān)C-3細(xì)胞增殖機(jī)制的研究
發(fā)布時(shí)間：2021-10-02 04:00
目的通過(guò)蛋白激酶抑制劑敏感性分析揭示伴PTEN突變前列腺癌細(xì)胞株P(guān)C-3細(xì)胞增殖的分子機(jī)制。方法選擇9種關(guān)鍵激酶抑制劑作用于PC-3細(xì)胞,CCK8法檢測(cè)蛋白激酶抑制劑對(duì)PC-3細(xì)胞增殖的影響;PTEN基因經(jīng)RT-PCR擴(kuò)增后測(cè)序檢測(cè)PC-3細(xì)胞中PTEN的突變;Western blot分析PI3K和mTOR抑制劑對(duì)PC-3細(xì)胞信號(hào)通路中關(guān)鍵激酶表達(dá)水平的影響;細(xì)胞經(jīng)蛋白激酶抑制劑處理后,采用Annexin V-FITC和溴化丙啶染色,熒光顯微鏡觀察PC-3細(xì)胞的凋亡情況。結(jié)果 GSK2126458、AZD6482、Rapamycin和OSI-027可明顯抑制PC-3細(xì)胞增殖,且AZD6482和Rapamycin對(duì)PC-3細(xì)胞增殖具有協(xié)同抑制作用;測(cè)序結(jié)果顯示PC-3細(xì)胞存在PTEN第78位氨基酸錯(cuò)義突變;Western blot結(jié)果表明,與對(duì)照組和AZD6482單藥組相比,Rapamycin單藥以及AZD6482聯(lián)合Rapamycin作用于PC-3細(xì)胞后AKT蛋白磷酸化水平明顯下降,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。藥物作用于細(xì)胞48和72 h后,AZD6482單藥組、Rapam...
【文章來(lái)源】：毒理學(xué)雜志. 2020,34(04)CSCD
【文章頁(yè)數(shù)】：6 頁(yè)
【部分圖文】：
不同濃度蛋白激酶抑制劑作用PC-3細(xì)胞后
結(jié)果表明,AZD6482+Rapamycin聯(lián)合使用對(duì)PC-3細(xì)胞的抑制作用與單藥抑制作用比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。AZD6482和Rapamycin對(duì)PC-3細(xì)胞增殖具有協(xié)同抑制作用,而AZD6482+AZD6244聯(lián)合使用對(duì)PC-3細(xì)胞增殖不具有協(xié)同抑制作用,見(jiàn)圖2。2.3 PTEN基因突變的檢測(cè)
2015年,Park等[15]發(fā)現(xiàn)聯(lián)合應(yīng)用PI3K和MEK抑制劑對(duì)PCa細(xì)胞生長(zhǎng)有抑制作用。AZD6482是一種有效的、選擇性的PI3Kβ抑制劑,能阻斷該激酶與ATP相互作用[16]。Rapamycin是一種mTOR蛋白特異性抑制劑,早期用于免疫排斥反應(yīng),目前已廣泛應(yīng)用于臨床腫瘤的治療[17]。AZD6244是一種高選擇性的MEK1/2抑制劑,其用于實(shí)體瘤的治療已進(jìn)入Ⅱ期臨床[18]。本研究使用多種蛋白激酶抑制劑作用于PC-3細(xì)胞,結(jié)果表明,PI3K抑制劑(GSK2126458和AZD6482)和mTOR抑制劑(Rapamycin和OSI-027)對(duì)PC-3細(xì)胞增殖的抑制作用更加明顯,但Mek抑制劑(AZD6244)對(duì)PC-3細(xì)胞的抑制作用不明顯。本研究進(jìn)一步探究聯(lián)合使用抑制劑對(duì)PC-3細(xì)胞的影響。由于GSK2126458和OSI-027作用靶點(diǎn)較為廣譜,所以最終選擇AZD6482和Rapamycin聯(lián)合使用,結(jié)果顯示二者對(duì)PC-3細(xì)胞增殖有協(xié)同抑制作用。這提示PC-3細(xì)胞增殖主要依賴于PI3K/AKT信號(hào)通路。在小鼠模型中,PI3K和MEK抑制劑聯(lián)合應(yīng)用能夠阻止前列腺上皮內(nèi)瘤變?yōu)槿?shì)抵抗性前列腺癌,并對(duì)伴有PTEN缺失的前列腺腫瘤生長(zhǎng)有抑制作用[19]。然而,本研究結(jié)果顯示,AZD6482和AZD6244聯(lián)合使用與單獨(dú)使用對(duì)PC-3細(xì)胞的抑制作用差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。圖4 抑制劑對(duì)PC-3細(xì)胞凋亡的影響
【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]前列腺癌發(fā)生發(fā)展的流行病學(xué)研究進(jìn)展[J]. 楊進(jìn)益,楊明州,魏偉,岳文昌. 臨床泌尿外科雜志. 2017(09)
[2]PTEN/MMAC1/TEP1、TGF-β1在前列腺癌及前列腺增生中的表達(dá)及其意義[J]. 蔣宏毅,趙曉昆,鐘朝暉,姚干,王蔭槐,張磊,歐陽(yáng)時(shí)鋒,謝續(xù)標(biāo),彭龍開(kāi),易東生,張選志,揚(yáng)羅艷,劉任,黃循. 中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志. 2008(09)
本文編號(hào)：3417965
【文章來(lái)源】：毒理學(xué)雜志. 2020,34(04)CSCD
【文章頁(yè)數(shù)】：6 頁(yè)
【部分圖文】：
不同濃度蛋白激酶抑制劑作用PC-3細(xì)胞后
結(jié)果表明,AZD6482+Rapamycin聯(lián)合使用對(duì)PC-3細(xì)胞的抑制作用與單藥抑制作用比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。AZD6482和Rapamycin對(duì)PC-3細(xì)胞增殖具有協(xié)同抑制作用,而AZD6482+AZD6244聯(lián)合使用對(duì)PC-3細(xì)胞增殖不具有協(xié)同抑制作用,見(jiàn)圖2。2.3 PTEN基因突變的檢測(cè)
2015年,Park等[15]發(fā)現(xiàn)聯(lián)合應(yīng)用PI3K和MEK抑制劑對(duì)PCa細(xì)胞生長(zhǎng)有抑制作用。AZD6482是一種有效的、選擇性的PI3Kβ抑制劑,能阻斷該激酶與ATP相互作用[16]。Rapamycin是一種mTOR蛋白特異性抑制劑,早期用于免疫排斥反應(yīng),目前已廣泛應(yīng)用于臨床腫瘤的治療[17]。AZD6244是一種高選擇性的MEK1/2抑制劑,其用于實(shí)體瘤的治療已進(jìn)入Ⅱ期臨床[18]。本研究使用多種蛋白激酶抑制劑作用于PC-3細(xì)胞,結(jié)果表明,PI3K抑制劑(GSK2126458和AZD6482)和mTOR抑制劑(Rapamycin和OSI-027)對(duì)PC-3細(xì)胞增殖的抑制作用更加明顯,但Mek抑制劑(AZD6244)對(duì)PC-3細(xì)胞的抑制作用不明顯。本研究進(jìn)一步探究聯(lián)合使用抑制劑對(duì)PC-3細(xì)胞的影響。由于GSK2126458和OSI-027作用靶點(diǎn)較為廣譜,所以最終選擇AZD6482和Rapamycin聯(lián)合使用,結(jié)果顯示二者對(duì)PC-3細(xì)胞增殖有協(xié)同抑制作用。這提示PC-3細(xì)胞增殖主要依賴于PI3K/AKT信號(hào)通路。在小鼠模型中,PI3K和MEK抑制劑聯(lián)合應(yīng)用能夠阻止前列腺上皮內(nèi)瘤變?yōu)槿?shì)抵抗性前列腺癌,并對(duì)伴有PTEN缺失的前列腺腫瘤生長(zhǎng)有抑制作用[19]。然而,本研究結(jié)果顯示,AZD6482和AZD6244聯(lián)合使用與單獨(dú)使用對(duì)PC-3細(xì)胞的抑制作用差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。圖4 抑制劑對(duì)PC-3細(xì)胞凋亡的影響
【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]前列腺癌發(fā)生發(fā)展的流行病學(xué)研究進(jìn)展[J]. 楊進(jìn)益,楊明州,魏偉,岳文昌. 臨床泌尿外科雜志. 2017(09)
[2]PTEN/MMAC1/TEP1、TGF-β1在前列腺癌及前列腺增生中的表達(dá)及其意義[J]. 蔣宏毅,趙曉昆,鐘朝暉,姚干,王蔭槐,張磊,歐陽(yáng)時(shí)鋒,謝續(xù)標(biāo),彭龍開(kāi),易東生,張選志,揚(yáng)羅艷,劉任,黃循. 中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志. 2008(09)
本文編號(hào)：3417965
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