本文關(guān)鍵詞：初步探討腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因TMSG-1入核機(jī)制及檢測其在人前列腺癌中表達(dá)，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：第一部分初步探討腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因TMSG-1蛋白的入核機(jī)制目的腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因TMSG-1是新發(fā)現(xiàn)的一種重要的轉(zhuǎn)移抑制基因,通過檢測自然狀態(tài)及刺激狀態(tài)下Hela細(xì)胞中TMSG-1蛋白的表達(dá)及Hela細(xì)胞凋亡情況,初步探討TMSG-1蛋白的入核機(jī)制。方法免疫熒光檢測Hela細(xì)胞內(nèi)自然存在的TMSG-1蛋白表達(dá)情況,對生長狀態(tài)良好的細(xì)胞進(jìn)行不同劑量的H2O2刺激后,再利用免疫熒光檢測TMSG-1蛋白在細(xì)胞內(nèi)表達(dá)情況有無差異;不同劑量H2O2刺激Hela細(xì)胞后,提取細(xì)胞m RNA和總蛋白,分別用反轉(zhuǎn)錄PCR和Western blot測定TMSG-1基因及蛋白表達(dá)變化;流式細(xì)胞儀測定不同劑量H2O2刺激后Hela細(xì)胞凋亡情況。結(jié)果免疫熒光結(jié)果表明,在自然存在及刺激狀態(tài)下,腫瘤細(xì)胞內(nèi)均有TMSG-1蛋白表達(dá),H2O2刺激狀態(tài)下細(xì)胞內(nèi)蛋白表達(dá)量明顯高于細(xì)胞內(nèi)自然存在的蛋白量,且細(xì)胞核內(nèi)蛋白量增加;反轉(zhuǎn)錄PCR檢測結(jié)果表明,H2O2刺激后的Hela細(xì)胞內(nèi)TMSG-1基因表達(dá)量可能高于腫瘤細(xì)胞自然存在的蛋白量,H2O2刺激劑量為1.5m M時(shí),蛋白表達(dá)量增加較明顯。Western blot檢測結(jié)果表明,H2O2刺激劑量前后的Hela細(xì)胞內(nèi)TMSG-1蛋白表達(dá)量有顯著性差異(P0.05),以H2O2刺激劑量1.5m M時(shí)最明顯。流式細(xì)胞儀測定結(jié)果顯示,H2O2刺激前后,細(xì)胞凋亡發(fā)生率有顯著改變(P0.05),H2O2刺激劑量為1.5m M時(shí),凋亡細(xì)胞百分率最高。結(jié)論H2O2刺激狀態(tài)下細(xì)胞內(nèi)TMSG-1蛋白表達(dá)量明顯高于細(xì)胞內(nèi)自然存在的蛋白量,在經(jīng)一定量的H2O2刺激后,細(xì)胞內(nèi)TMSG-1蛋白表達(dá)量均有增加,細(xì)胞核內(nèi)蛋白量增加,且細(xì)胞凋亡發(fā)生率一定程度地增加,H2O2刺激能促進(jìn)TMSG-1蛋白入核并使TMSG-1表達(dá)增加,入核后TMSG-1蛋白發(fā)揮促進(jìn)細(xì)胞凋亡的作用。第二部分檢測腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因TMSG-1在人前列腺癌組織中的表達(dá)目的腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因TMSG-1是新發(fā)現(xiàn)的一種重要的腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因,通過檢測TMSG-1蛋白在前列腺增生、原發(fā)性前列腺腺癌及轉(zhuǎn)移性前列腺腺癌組織中的表達(dá),探討其在人前列腺腺癌轉(zhuǎn)移過程中發(fā)揮的作用。方法采用免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測TMSG-1蛋白在22例前列腺增生、38例原發(fā)性前列腺腺癌及18例轉(zhuǎn)移性前列腺腺癌組織中的表達(dá),并結(jié)合患者臨床信息、腫瘤的病理學(xué)特點(diǎn)及預(yù)后綜合分析。應(yīng)用Kaplan-Meier對原發(fā)性及轉(zhuǎn)移性前列腺腺癌患者進(jìn)行生存分析。結(jié)果免疫組織化學(xué)結(jié)果表明,TMSG-1蛋白在前列腺增生(20/22)、原發(fā)性前列腺腺癌(34/38)及轉(zhuǎn)移性前列腺腺癌(10/18)中均有表達(dá),原發(fā)性前列腺腺癌中的陽性表達(dá)率明顯高于轉(zhuǎn)移性前列腺腺癌中的陽性表達(dá)率,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);前列腺增生中的陽性表達(dá)率高于轉(zhuǎn)移性前列腺腺癌者,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);前列腺增生與原發(fā)性前列腺腺癌中的陽性表達(dá)率無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。原發(fā)性前列腺腺癌中TMSG-1蛋白的表達(dá)與神經(jīng)侵犯有關(guān)(P0.05),而與Gleason評分、鄰近組織侵犯及年齡均無關(guān)(P0.05)。Kaplan-Meier生存分析結(jié)果表明,TMSG-1蛋白陽性組生存時(shí)間和生存率明顯高于TMSG-1蛋白陰性組(P0.05)。結(jié)論TMSG-1蛋白在原發(fā)性前列腺腺癌中的表達(dá)明顯高于轉(zhuǎn)移性前列腺腺癌中的表達(dá),TMSG-1蛋白的低表達(dá)可以作為預(yù)測前列腺腺癌轉(zhuǎn)移的重要危險(xiǎn)因素,其在前列腺腺癌的轉(zhuǎn)移過程中發(fā)揮重要作用,為前列腺腺癌的臨床治療和預(yù)后預(yù)測提供了新靶點(diǎn)。
【關(guān)鍵詞】：基因 蛋白 入核 應(yīng)激反應(yīng) 細(xì)胞凋亡 基因 腫瘤抑制 腫瘤轉(zhuǎn)移 前列腺腺癌 預(yù)后
【學(xué)位授予單位】：青島大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R737.25
【目錄】：

• 第一部分 初步探討腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因 TMSG-1 蛋白的入核機(jī)制2-26
• 摘要2-3
• Abstract3-6
• 引言6-7
• 第一章 材料與方法7-16
• 1.1 實(shí)驗(yàn)材料7-9
• 1.1.1 細(xì)胞系7
• 1.1.2 主要試劑7-8
• 1.1.3 主要儀器及材料8-9
• 1.2 實(shí)驗(yàn)方法9-16
• 1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)及細(xì)胞成分提取9-11
• 1.2.2 細(xì)胞免疫熒光11
• 1.2.3 反轉(zhuǎn)錄PCR11-12
• 1.2.4 Western Blot12-14
• 1.2.5 流式細(xì)胞術(shù)14-15
• 1.2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法15-16
• 第二章 結(jié)果16-21
• 2.1 熒光顯微鏡觀察蛋白入核情況16-17
• 2.2 反轉(zhuǎn)錄PCR檢測TMSG-1 基因表達(dá)17-18
• 2.3 Western Blot檢測TMSG-1 蛋白表達(dá)18
• 2.4 流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡18-21
• 第三章 討論21-23
• 結(jié)論23-24
• 參考文獻(xiàn)24-26
• 第二部分 檢測腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因 TMSG-1 在人前列腺癌組織中的表達(dá)26-43
• 摘要26-27
• Abstract27-30
• 引言30-31
• 第一章 材料與方法31-34
• 1.1 實(shí)驗(yàn)材料31-32
• 1.1.1 主要試劑31
• 1.1.2 主要儀器及材料31
• 1.1.3 組織標(biāo)本來源31-32
• 1.2 實(shí)驗(yàn)方法32-34
• 1.2.1 免疫組織化學(xué)基本步驟32-33
• 1.2.2 結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)33
• 1.2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法33-34
• 第二章 結(jié)果34-38
• 2.1 TMSG-1 蛋白在前列腺增生、原發(fā)性及轉(zhuǎn)移性前列腺腺癌組織中的表達(dá)34-36
• 2.2 TMSG-1 蛋白表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系36
• 2.3 TMSG-1 蛋白表達(dá)與病人術(shù)后生存期的關(guān)系36-38
• 第三章 討論38-40
• 結(jié)論40-41
• 參考文獻(xiàn)41-43
• 綜述43-54
• 參考文獻(xiàn)51-54
• 攻讀學(xué)位期間研究成果54-55
• 致謝55-56

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 徐曉艷;裴斐;由江峰;;一種新的腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因TMSG—l的研究現(xiàn)狀(英文)[J];癌癥;2010年07期

  本文關(guān)鍵詞：初步探討腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因TMSG-1入核機(jī)制及檢測其在人前列腺癌中表達(dá)，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：341097