目的：在小型豬自體腎移植模型中探究短效Caspase-3小干擾RNA （small interfering ribonucleic acid, siRNA）在體內(nèi)外研究中實(shí)驗(yàn)結(jié)果相悖的機(jī)制,進(jìn)一步探討短效Caspase-3siRNA對(duì)凋亡通路蛋白caspase-3活化的影響,闡明短效Caspase-3siRNA的激活固有免疫反應(yīng)機(jī)制,為其臨床轉(zhuǎn)化提供理論依據(jù)與實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。方法：選擇25-30kg雄性廣西巴馬小型豬12只,隨機(jī)分為I/R組6只（I/R）,Caspase-3siRNA組6只（IR+siRNA）。建立小型豬原位自體腎移植模型,根據(jù)前期研究,左腎切取后siRNA組應(yīng)用預(yù)配40ml UW器官保存液+0.3mg短效Caspase-3siRNA（合成序列5’-GGGAGACCUUCACAAACUUtt-3’與5’-AAGUUUGUGAAGGUCUCCCtg-3’）加壓灌注,I/R組應(yīng)用UW器官保存液同樣加壓灌注,冷藏24小時(shí),移植前留取冷藏后腎臟穿刺標(biāo)本,再移植到右腎原位。各組于缺血再灌注后48h切取腎臟組織標(biāo)本。應(yīng)用real time PCR檢測(cè)各組腎臟組織中Caspase-3mRN... 

【文章來源】：復(fù)旦大學(xué)上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：48 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖I.免疫印跡法檢測(cè)兩組小型豬腎組織內(nèi)Toll樣受體3.7的蛋白含量結(jié)果圖

短效Caspase-3小千擾RNA對(duì)小型豬自體腎移植缺血再灌注損傷保護(hù)作用的探究 正文實(shí)驗(yàn)結(jié)果一、Toll樣受體活化結(jié)果測(cè)定：免疫印跡法檢測(cè)移植后48小時(shí)IR組與IR+siRNA組小型豬腎臟組織內(nèi)To】】樣受體3、7的蛋白水平結(jié)果如圖1所示，兩組小型豬腎臟組織內(nèi)Toll樣受體3、7的蛋白水平半定量結(jié)果比較如圖2、圖3所示。結(jié)果顯示，移植后48小時(shí)IR+siRNA組腎臟組織內(nèi)TLR-3、TLR-7蛋白水平均顯著較IR組增高（p<0.01，p<0.05)。IR IR+siRNA

圖3.半定量法比較兩組小型豬腎組織內(nèi)Toll樣受體7蛋白含量結(jié)果柱(p<0.05)二、Toll樣受體下游信號(hào)通路活化檢測(cè)免疫印跡法檢測(cè)移植后48小時(shí)IR_組與IR+siRNA組小型豬腎臟組MyD88蛋白及TRIF蛋白水平結(jié)果如圖4所示，兩組小型豬腎臟組織內(nèi)My蛋白水平半定量結(jié)果比較如圖5所示，TRIF蛋白水平半定量結(jié)果比較圖6所示結(jié)果顯示，移植后48小時(shí)，IR+siRMA組腎臟組織內(nèi)MyD88、TRIF蛋白水平顯著較IR組增高（p〈0.01，p<0.05)。IR iR+siRNAI 1 i iMyDS8


本文編號(hào)：3362350