發(fā)布時間：2021-08-20 21:13

　　目的：研究大黃素體外誘導(dǎo)人腎透明細胞癌細胞株786-0的凋亡作用，并初步探討其誘導(dǎo)腎透明細胞癌細胞凋亡的可能分子機制，旨在為大黃素在抗人腎透明細胞癌方面的臨床應(yīng)用提供實驗依據(jù)，增加對其藥理作用及量效時效關(guān)系的深入認識。方法：（1）將同代的人腎透明細胞癌細胞株786-0分組，分為空白對照組，陰性對照組以及藥物作用組（分別為10、20、40、60和80μmol/L組）。（2）普通光學(xué)顯微鏡觀察細胞增殖抑制及HE細胞染色觀察。（3）采用DAPI染色進行細胞凋亡形態(tài)學(xué)改變檢測。（4）采用CCK法觀察大黃素作用下腎癌細胞的增殖抑制率。（5）利用RT-PCR技術(shù)從mRNA水平研究bax、bcl-2的表達差異。（6）利用Western-Blot技術(shù)在蛋白水平研究bax、bcl-2的表達差異。（7）采用JC-1探針法明確786-0細胞內(nèi)線粒體跨膜電位的改變。（8）通過caspase-9、 caspase-3活性試劑盒檢測caspase-9、caspase-3上調(diào)水平。結(jié)果：倒置顯微鏡下觀察，隨著大黃素作用濃度的增加和作用時間的延長，786-0細胞形態(tài)逐漸變圓或者不規(guī)則，胞內(nèi)空泡增多，部分細胞脫壁并漂浮... 

【文章來源】：福建醫(yī)科大學(xué)福建省

【文章頁數(shù)】：51 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
英文縮略語對照表
摘要
Abstract
前言
材料與方法
    1. 材料
    2. 方法
實驗結(jié)果
    3.1 不同濃度的大黃素對786-0細胞形態(tài)的影響
    3.2 不同濃度的大黃素對 786-0 細胞核的影響
    3.3 不同濃度的大黃素對786-0細胞生長抑制率的影響
    3.4 RT-PCR檢測不同濃度作用下細胞Bcl-2 ，Bax的mRNA表達
    3.5 Western-blo檢測不同濃度作用下細胞Bcl-2 ，Bax的蛋白表達
    3.6 JC-1 法檢測 786-0 細胞內(nèi)線粒體跨膜電位的改變
    3.7 不同濃度的大黃素對786-0細胞caspase-9，caspase-3相對活性的影響
討論
結(jié)論
參考文獻
致謝
綜述
    參考文獻


【參考文獻】：
期刊論文
[1]索拉非尼治療晚期腎癌患者33例長期臨床觀察[J]. 楊琳,丁英俊,石磊,于世英.  疑難病雜志. 2012(10)
[2]大黃素增強吉西他濱對裸鼠SW1990細胞移植瘤的抑瘤作用[J]. 魏為添,郭亞飛,陳輝,劉殿雷,郭洪春,林勝璋.  中國中藥雜志. 2010(24)
[3]索拉非尼治療轉(zhuǎn)移性腎癌的臨床研究[J]. 周愛萍,何志嵩,于世英,張沂平,杜春霞,孫永昆,石遠凱,王金萬,那彥群,孫燕.  中華泌尿外科雜志. 2009 (01)
[4]Nuclear factor-kB p65 （RelA） transcription factor is constitutively activated in human colorectal carcinoma tissue[J]. Liang-Liang Yu Jie-Ping Yu He-Sheng Luo Xi-Ming Xu Jun-Hua Li Department of Gastroenterology,Renmin Hospital,Wuhan University,Wuhan 430060,Hubei Province,China Hong-Gang Yu,Laboratory for Experimental Gastroenterology,Department of Medicine I,St.Joseph Hospital,Ruhr-University Bochum,Bochum,Germany.  World Journal of Gastroenterology. 2004(22)
[5]大黃素抑制人高轉(zhuǎn)移巨細胞肺癌PG細胞的腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)性質(zhì)[J]. 王心華,甄永蘇.  癌癥. 2001(08)



本文編號：3354239