CRISPR/Cas9敲除BLM解旋酶基因?qū)η傲邢侔┘毎鲋车挠绊?/H1>

發(fā)布時間：2021-07-26 17:05

　　RecQ解旋酶是DNA解旋酶家族中的一個重要成員,在DNA復(fù)制、重組、修復(fù)、轉(zhuǎn)錄等細胞代謝和維持基因組穩(wěn)定性等方面具有至關(guān)重要的作用。BLM解旋酶是在人體中目前發(fā)現(xiàn)的5種RecQ解旋酶之一,BLM解旋酶基因的突變會導(dǎo)致Bloom綜合征,患者表現(xiàn)出一系列癌癥的高發(fā)率,如前列腺癌、乳腺癌、黑色素瘤等。許多科學(xué)研究證實,腫瘤的發(fā)生是由于某些基因表達量的上調(diào)或下調(diào),從而導(dǎo)致細胞增殖分化和凋亡失調(diào)的結(jié)果。本課題組前期研究發(fā)現(xiàn),在許多癌細胞中BLM解旋酶均高表達,該酶的特異性抑制作用可降低癌細胞的增殖,提示可以將BLM解旋酶作為抗癌藥物作用的分子靶標來進行相關(guān)理論研究。CRISPR/Cas9是第三代基因編輯技術(shù),可對生物體基因組特異位點進行定點改造。目前,CRISPR/Cas9技術(shù)已經(jīng)在許多模式動物的基因敲除方面取得了成功,其方法大部分都是利用注射直接獲得模式動物,然而采用CRISPR/Cas9技術(shù)敲除人前列腺癌細胞中BLM解旋酶基因,觀察BLM解旋酶基因敲除后對細胞增殖的影響還未見報道。因此,本研究以此為出發(fā)點,設(shè)計4條針對于BLM解旋酶基因位點的gRNA,構(gòu)建CRISPR/Cas9打靶載體和D... 

【文章來源】：貴州大學(xué)貴州省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：64 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

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