目的：通過(guò)研究IL-6對(duì)前列腺癌細(xì)胞增殖、遷移和生存力的影響，探索IL-6在前列腺癌進(jìn)展中的作用機(jī)制；同時(shí)研究二甲雙胍對(duì)IL-6過(guò)表達(dá)的前列腺癌細(xì)胞株增殖、遷移和細(xì)胞周期的影響，探索二甲雙胍抑制前列腺癌發(fā)生發(fā)展的相關(guān)分子機(jī)制。方法：（1）運(yùn)用慢病毒載體轉(zhuǎn)染技術(shù)，構(gòu)建IL-6過(guò)表達(dá)的前列腺癌LNCaP細(xì)胞株，利用激光共聚焦顯微鏡觀察細(xì)胞綠色熒光的表達(dá)以明確慢病毒轉(zhuǎn)染情況，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)變化；運(yùn)用ELISA檢測(cè)IL-6表達(dá)水平；運(yùn)用MTT技術(shù)比較IL-6過(guò)表達(dá)LNCaP細(xì)胞（LNCaP-IL-6）與空病毒載體轉(zhuǎn)染的LNCaP細(xì)胞（LNCaP-ctr）在比卡魯胺處理不同時(shí)間段的生存率；運(yùn)用western blot技術(shù)比較IL-6過(guò)表達(dá)的LNCaP細(xì)胞和正常LNCaP細(xì)胞Twist和E-cadherin蛋白表達(dá)；運(yùn)用RT-PCR技術(shù)比較上述蛋白的基因轉(zhuǎn)錄水平。（2）加入不同濃度的二甲雙胍刺激，運(yùn)用MTT實(shí)驗(yàn)檢測(cè)不同濃度的二甲雙胍對(duì)正常LNCaP和IL-6過(guò)表達(dá)的LNCaP細(xì)胞生存率的影響，并選取最佳工作濃度；流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)細(xì)胞周期；將LNCaP-IL-6細(xì)胞分為二甲雙胍處理組與非... 

【文章來(lái)源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

【文章頁(yè)數(shù)】：68 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

慢病毒載體轉(zhuǎn)染LNCaP細(xì)胞后采用激光共聚焦顯微鏡掃描綠色熒光表達(dá)情況（×200）

LNCaP-ctr和LNCaP-IL-6細(xì)胞形態(tài)觀察Fig1-3MorphologyobservationofLNCaP-ctrandLNCaP-IL-6cells.A:LNCaP-ctr(×200);B:LNCaP-IL-6(×200);C:LNCaP-ctr(×400);D:LNCaP-IL-6(×400)

0.2.4.6.81.2.41 2 3 time（day）圖 1-4 各組細(xì)胞生長(zhǎng)曲線Fig 1-4 Cell growth curve in each group1 2 3

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]2003～2007年中國(guó)前列腺癌發(fā)病與死亡分析[J]. 韓仁強(qiáng),武鳴,陳萬(wàn)青,張思維,鄭榮壽.  中國(guó)腫瘤. 2012(11)
[2]Epidemiology of prostate cancer and treatment remarks[J]. Stefano Arcangeli,Valentina Pinzi,Giorgio Arcangeli.  World Journal of Radiology. 2012(06)



本文編號(hào)：3301387