目的隱睪作為一種泌尿生殖系統(tǒng)畸形是男性不育癥的常見病因之一,高度保守的mi R-34c在精子發(fā)生中具有重要作用,Nanos2通過抑制精原細(xì)胞分化維持精原細(xì)胞池穩(wěn)定。mi R-34c和Nanos2在隱睪組織中的表達(dá)情況目前尚不清楚,本文旨在探究mi R-34c和Nanos2在隱睪組織中的表達(dá)情況以及其與隱睪患者精子發(fā)生障礙之間的聯(lián)系。方法收集6例隱睪患者以及6例梗阻性無精癥患者的睪丸組織,定量RT-PCR檢測mi R-34c在隱睪患者睪丸組織中的相對表達(dá)情況。使用生物信息學(xué)工具Target Scan和mi RDB預(yù)測mi R-34c的靶標(biāo),GC-1小鼠精原細(xì)胞中檢測mi R-34c過表達(dá)和敲低對Nanos2表達(dá)的影響。構(gòu)建小鼠隱睪模型,檢測mi R-34c和Nanos2在小鼠隱睪模型中的表達(dá)情況,統(tǒng)計Plzf陽性精原細(xì)胞數(shù)目,探究mi R-34c以及Nanos2的異常表達(dá)對隱睪小鼠精原細(xì)胞池穩(wěn)定性的影響。結(jié)果本研究中我們發(fā)現(xiàn)隱睪會嚴(yán)重?fù)p害患者的精子發(fā)生,與梗阻性無精癥相比mi R-34c在隱睪患者的睪丸組織中表達(dá)水平顯著下調(diào)。生物信息學(xué)預(yù)測結(jié)果顯示Nanos2可能是mi R-34c的靶標(biāo)... 

【文章來源】：安徽醫(yī)科大學(xué)安徽省

【文章頁數(shù)】：52 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

miR-34c在隱睪患者睪丸組織中表達(dá)水平顯著下調(diào)

圖 2. GC-1 細(xì)胞系內(nèi) miR-34c 抑制 Nanos2 基因表達(dá)。 a GC-1 細(xì)胞系內(nèi)轉(zhuǎn)染 miR-34c 質(zhì)粒后 miR-34c 和 Nanos2 mRNA 的相對表達(dá)水平；b GC-1 細(xì)胞系內(nèi)加入 miR-34c 抑制劑后 miR-34c 和 Nanos2 mRNA 的相對表達(dá)水平；c GC-1 細(xì)胞系內(nèi) miR-34c 過表達(dá)或抑制后 Nanos2 蛋白表達(dá)水平。Con：對照組；NC：陰性對照組。**P < 0.01；***P < 0.001。Fig 2. miR-34c inhibit the expression of Nanos2 in GC-1 cells. a Relative expression levels ofmiR-34c and Nanos2 mRNA after transfecting the plasmid of miR-34c in GC-1 cell; b Relativeexpression levels of miR-34c and Nanos2 mRNA after miR-34c inhibition in GC-1 cell; c Theexpression level of Nanos2 protein in GC-1 cell culture after miR-34c overexpression or inhibition.Con: control; NC: negative control.**P < 0.01;***P < 0.001.3.3 小鼠隱睪模型

22圖 3. 小鼠隱睪模型。 a 隱睪組和對照組的睪丸圖片，正常（紅圈）以及隱睪（黑圈）的小鼠睪丸；b 隱睪組和對照組的睪丸指數(shù)。睪丸指數(shù)=（睪丸質(zhì)量/體重）×100%；c 隱睪組和對照組睪丸組織的組織學(xué)比較。Con：對照組；T：處理側(cè)；UT：未處理側(cè)。*P < 0.05；**P <0.01；***P < 0.001。Fig 3. Mouse model of cryptorchidism. a Photograph of testes of cryptorchidism group andcontrol group. The normal (red circle) and cryptorchid (black circle) mouse testes. b The testis indexof cryptorchidism group and control group. Testis index = (testis weight/whole body weight) × 100%.c The histological comparison of testicular tissues between cryptorchidism group and control group.Con: control; UT: untreated side; T: treated side.**P < 0.05;**P < 0.01;***P < 0.001.

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Nanos2在雄性生殖系統(tǒng)內(nèi)的研究進(jìn)展[J]. 黃振宇,張賢生.  中華男科學(xué)雜志. 2018(06)



本文編號：3288388