目的通過對(duì)尿毒癥患者血小板活化及凋亡的檢測(cè)，探明尿毒癥患者是否存在血小板凋亡現(xiàn)象,進(jìn)一步探討其機(jī)制。方法收集尿毒癥患者的外周靜脈血，分離得到富含血小板的血漿（PRP）,通過血小板聚集儀檢測(cè)尿毒癥患者血小板聚集功能，流式細(xì)胞儀檢測(cè)血小板線粒體跨膜電位（ΔΨm）的變化，磷脂酰絲氨酸（PS）有無外翻表達(dá)，血小板活化指標(biāo)P-選擇素（P-Selectin）及血小板膜糖蛋白Ibα（GPIbα）的表達(dá)；用Western Blot檢測(cè)尿毒癥患者少血小板血漿（PPP）與正常人洗滌血小板刺激孵育后血小板Caspase-3有無活化裂解,抗凋亡蛋白Bcl-2家族、凋亡蛋白Bax等表達(dá)。不同濃度尿毒癥毒素肌酐、甲狀旁腺激素、尿素于37°C、90轉(zhuǎn)/分鐘（rpm）搖床內(nèi)與正常洗滌血小板共孵育3小時(shí)，檢測(cè)血小板ΔΨm。結(jié)果血小板聚集儀檢測(cè)結(jié)果表明尿毒癥患者血小板聚集功能降低；流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)果表明，與正常對(duì)照組相比，尿毒癥患者血小板PS外翻表達(dá)增加（P<0.05），P-Selectin表達(dá)降低,但無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05），ΔΨm明顯降低（P<0.01），GPIbα表達(dá)增加，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P&l... 

【文章來源】：蘇州大學(xué)江蘇省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：53 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

尿毒癥患者血小板膜PS外翻表達(dá)流式結(jié)果

（P<0.05）；圖 3 所示，與正常對(duì)照組相比，非透析組、血透組及腹透組 PS 均表達(dá)增加，但非透析組、血透組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，腹透組有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。FluorescenceintensityP<0.05圖 1 尿毒癥患者血小板膜 PS 外翻表達(dá)流圖 2 尿毒癥患者血小板膜 PS 外翻熒光

2.2 尿毒癥患者血小板 ΔΨm 的變化尿毒癥患者 PRP 與 TMRE（終濃度 100nM）在 37°C, 轉(zhuǎn)速 90 rpm 搖床內(nèi)避光育 30min, 流式細(xì)胞儀檢測(cè) ΔΨm 變化，結(jié)果如下：流式峰狀圖（圖 4 所示），與正對(duì)照組相比，尿毒癥患者體內(nèi)血小板 TMRE 熒光曲線左移，熒光強(qiáng)度降低，經(jīng)統(tǒng)分析（圖 5 所示）尿毒癥患者血小板 ΔΨm 明顯降低（P<0.01）；圖 6 所示，與正常照組相比，非透析組、血透組及腹透組 ΔΨm 表達(dá)均降低，均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。Non-dialysis Peritoneal dialysis HemodialysisFluorescenceP<0.01圖 3 非透析組、腹透組及血透組血小板膜 PS 外翻表達(dá)熒光強(qiáng)度算術(shù)均值與正常對(duì)照組比較


本文編號(hào)：3280314