目的:探討尿酸誘導(dǎo)腎小管上皮細(xì)胞上皮-間充質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)化（epithelia-mesenchymal transition,EMT）的作用及機(jī)制。為防治腎小管上皮細(xì)胞EMT提供有效干預(yù)靶點(diǎn)。方法:本研究以人腎小管上皮細(xì)胞（HK-2細(xì)胞）為研究對(duì)象,尿酸為處理因素,采用不同質(zhì)量濃度的尿酸預(yù)孵育HK-2細(xì)胞48 h,通過(guò)倒置顯微鏡觀察尿酸對(duì)HK-2細(xì)胞形態(tài)的影響;Western blot檢測(cè)間充質(zhì)細(xì)胞標(biāo)志物Fibronectin、α-SMA和上皮細(xì)胞標(biāo)志E-cadherin的表達(dá)變化,并觀察尿酸對(duì)TLR4/NF-κB信號(hào)通路的影響;Real-time PCR檢測(cè)炎癥因子IL-1β、IL-6及TNF-αmRNA的表達(dá)變化;用小干擾RNA抑制TLR4的活化,Western blot檢測(cè)磷酸化NF-κB、α-SMA表達(dá)變化;用NF-κB的特異性抑制劑PDTC抑制NF-κB的活化,Western blot檢測(cè)Fibronectin、α-SMA及E-cadherin的表達(dá)情況,采用免熒光染色,共聚焦顯微鏡觀察上皮細(xì)胞標(biāo)志物cytokeratin和間充質(zhì)細(xì)胞標(biāo)志物vimentin的表達(dá)變化。結(jié)果:與正常對(duì)... 

【文章來(lái)源】：貴州醫(yī)科大學(xué)貴州省

【文章頁(yè)數(shù)】：50 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

倒置顯微鏡觀察尿酸處理48h后HK-2細(xì)胞形態(tài)變化(×100)

～C：Fibronectin、E-cadherin 和α-SMA 表達(dá)改變； a:P<0.05, b:P<0.01,與對(duì)照組比較圖 2 Western blot 檢測(cè)尿酸對(duì) HK-2 細(xì)胞 EMT 標(biāo)志物影響Fig2.western blot test for the effect of uric acid on the EMT marker of hk-2 cells.

A、B：不同濃度的尿酸對(duì) TLR4/NF-κB 信號(hào)通路的影響；b:P<0.01,與對(duì)照組比較圖 3 Western blot 檢測(cè)尿酸對(duì) HK-2 細(xì)胞 TLR4/NF-κB 信號(hào)通路的影響Fig3.the effect of Western blot in detecting uric acid on the TLR4/NF- B signpathway in hk-2 cells.

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]腎小管上皮間充質(zhì)轉(zhuǎn)化與腎臟纖維化[J]. 王來(lái)亮,羅群.  中國(guó)病理生理雜志. 2014(10)
[2]尿酸對(duì)人腎小管上皮細(xì)胞HK-2纖維化相關(guān)調(diào)控因子的影響[J]. 陳繼承,康潔,高碧珍,廖凌虹,丁珊珊.  福建醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2014(01)



本文編號(hào)：3266597