目的：研究人膀胱癌5637細(xì)胞系CD133陽性細(xì)胞中的分離方法以及CD133細(xì)胞的體外增殖、分化、自我更新及遷徙能力，初步探討膀胱癌中CD133陽性細(xì)胞亞群的干細(xì)胞特性。方法：流式細(xì)胞儀檢測膀胱癌5637細(xì)胞中CD133陽性細(xì)胞表達(dá)情況；免疫磁珠分選技術(shù)純化CD133陽性腫瘤細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測免疫磁珠發(fā)分選的純度；MTT法檢測CD133陽性細(xì)胞體外增殖能力；平板實(shí)驗(yàn)檢測其克隆能力；劃痕實(shí)驗(yàn)檢測其體外遷徙能力，流式細(xì)胞儀檢測其分化能力。結(jié)果：1、流式細(xì)胞儀檢測CD133陽性細(xì)胞在膀胱癌5637細(xì)胞中比例為1.45%。2、經(jīng)免疫磁珠法分離、流式細(xì)胞儀檢測，CD133⁺細(xì)胞純度高達(dá)93.42%。3、MTT實(shí)驗(yàn)、平板實(shí)驗(yàn)、劃痕實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示CD133⁺細(xì)胞增殖克隆能力及遷徙能力較CD133^-細(xì)胞有明顯差異。4、分化潛能測定：CD133⁺細(xì)胞體外培養(yǎng)1周，分別在第2、4、6天利用流式細(xì)胞儀檢測CD133⁺細(xì)胞的比例，培養(yǎng)至第2天，CD133⁺細(xì)胞的比例由原來的98%... 

【文章來源】：吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：40 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞系中CD133+亞群的比例，提示CD133+細(xì)胞在細(xì)胞系中的比例為1.45%

未分選膀胱癌 5637 細(xì)胞系中 CD133+表達(dá)率為 1.45%(圖 3.1)，分選后CD133+細(xì)胞表達(dá)率為 93.42%(圖三)，二組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。免疫磁珠技術(shù)是目前腫瘤干細(xì)胞可靠的分選方法，苔盼藍(lán)拒染實(shí)驗(yàn)表明，免疫磁珠法分選所得腫瘤細(xì)胞活力好，可直接進(jìn)行下一步實(shí)驗(yàn)。利用免疫磁珠分選技術(shù)（圖 4.1、4.2）純化膀胱癌 5637 細(xì)胞系中 CD133陽細(xì)胞，分選前流式細(xì)胞儀檢測 CD133+細(xì)胞的百分比為 1.45%;分選后，流式細(xì)胞儀檢測 CD133+細(xì)胞群的百分比為 93.42%（如圖 4.3），達(dá)到了試驗(yàn)的目的及后續(xù)試驗(yàn)的純度要求。

免疫磁珠細(xì)胞分選示意圖

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：3233930