目的：研究人膀胱癌5637細胞系CD133陽性細胞中的分離方法以及CD133細胞的體外增殖、分化、自我更新及遷徙能力，初步探討膀胱癌中CD133陽性細胞亞群的干細胞特性。方法：流式細胞儀檢測膀胱癌5637細胞中CD133陽性細胞表達情況；免疫磁珠分選技術(shù)純化CD133陽性腫瘤細胞，流式細胞儀檢測免疫磁珠發(fā)分選的純度；MTT法檢測CD133陽性細胞體外增殖能力；平板實驗檢測其克隆能力；劃痕實驗檢測其體外遷徙能力，流式細胞儀檢測其分化能力。結(jié)果：1、流式細胞儀檢測CD133陽性細胞在膀胱癌5637細胞中比例為1.45%。2、經(jīng)免疫磁珠法分離、流式細胞儀檢測，CD133⁺細胞純度高達93.42%。3、MTT實驗、平板實驗、劃痕實驗結(jié)果顯示CD133⁺細胞增殖克隆能力及遷徙能力較CD133^-細胞有明顯差異。4、分化潛能測定：CD133⁺細胞體外培養(yǎng)1周，分別在第2、4、6天利用流式細胞儀檢測CD133⁺細胞的比例，培養(yǎng)至第2天，CD133⁺細胞的比例由原來的98%... 

【文章來源】：吉林大學吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：40 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

流式細胞儀檢測細胞系中CD133+亞群的比例，提示CD133+細胞在細胞系中的比例為1.45%

未分選膀胱癌 5637 細胞系中 CD133+表達率為 1.45%(圖 3.1)，分選后CD133+細胞表達率為 93.42%(圖三)，二組間差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。免疫磁珠技術(shù)是目前腫瘤干細胞可靠的分選方法，苔盼藍拒染實驗表明，免疫磁珠法分選所得腫瘤細胞活力好，可直接進行下一步實驗。利用免疫磁珠分選技術(shù)（圖 4.1、4.2）純化膀胱癌 5637 細胞系中 CD133陽細胞，分選前流式細胞儀檢測 CD133+細胞的百分比為 1.45%;分選后，流式細胞儀檢測 CD133+細胞群的百分比為 93.42%（如圖 4.3），達到了試驗的目的及后續(xù)試驗的純度要求。

免疫磁珠細胞分選示意圖

【參考文獻】：
期刊論文
[1]腫瘤干細胞理論及腫瘤干細胞分離和鑒定研究進展[J]. 宋東穎,王毅,孫嵐,張英鴿.  中國藥理學與毒理學雜志. 2012(05)
[2]膀胱癌細胞株T24中側(cè)群細胞的分離和功能鑒定[J]. 寧志豐,江春,許可慰,黃海,尹心寶,黃健.  中華實驗外科雜志. 2010 (03)
[3]實體腫瘤干細胞分離鑒定技術(shù)的研究進展[J]. 劉平平,李曉明.  西南軍醫(yī). 2009(03)



本文編號：3233930