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前列腺癌骨轉移蛋白質組學研究及CD59在骨轉移過程中表達上調的機制探討

發(fā)布時間:2021-06-11 07:55
  目的:1.篩選前列腺癌伴骨轉移患者的血清差異蛋白,并對關鍵差異蛋白進行驗證。2.分別建立前列腺癌細胞PC3與人骨髓間充質干細胞(hBMSCs)及成骨細胞(hFOB1.19)的共培養(yǎng)體系,研究PC3細胞與hBMSCs及hFOB1.19細胞之間的相互影響及CD59表達變化的機制。方法:1.收集前列腺癌伴骨轉移和無轉移患者的血清各30例,采用iTRAQ蛋白質組學方法比較兩組患者的血清差異蛋白。2.收集前列腺癌伴骨轉移、前列腺癌無轉移及前列腺增生患者血清樣本各50例及三組患者的前列腺組織切片各30張,另收集前列腺癌骨轉移灶切片5張,采用ELISA和免疫組化對3個具有顯著變化倍數的關鍵差異蛋白進行驗證。3.用Western blot、流式細胞術和免疫熒光分析三種關鍵差異蛋白在前列腺癌細胞株PC3、LNCaP、DU145中的表達情況。4.分別建立PC3細胞與hBMSCs及hFOB1.19細胞的共培養(yǎng)體系,研究hBMSCs及hFOB1.19對PC3的增殖、遷移和侵襲能力的影響及PC3對hFOB1.19增殖能力的影響。5.通過流式細胞周期檢測、Western blot、RT-PCR及細胞免疫熒光分析各... 

【文章來源】:南方醫(yī)科大學廣東省

【文章頁數】:121 頁

【學位級別】:博士

【部分圖文】:

前列腺癌骨轉移蛋白質組學研究及CD59在骨轉移過程中表達上調的機制探討


圖1-3前列腺癌及前列腺増生組織光密度值分析示意圖(10x40)??Fig.?1-3?Analysis?of?optical?density?in?prostate?cancer?and?benign?prostatic?hyperplasia?(10x40)??

示意圖,光密度值,示意圖,間質


?區(qū)域。四連接素在腺上皮及間質均有表達,故將腺上皮和間質區(qū)域分別分析。??光密度分析示意圖如圖1-2和1-3所示。??1':.?*_##k??圖1-2前列腺癌骨轉移灶光密度值分析示意圖(10x40)??Fig?1-2?Analysis?of?optical?density?of?bone?metastases?from?prostate?cancer?(10x40)??骨轉移灶內除骨組織外,均為密集的前列腺癌上皮細胞,無明顯間質,故將整個轉移??瘤組織圈選,然后通過軟件自動計算平均光密度值。右圖紅色區(qū)域代表軟件自動識別的染??色陽性的細胞。??'wmSf??>?jl?r?*?'?A?-1??圖1-3前列腺癌及前列腺増生組織光密度值分析示意圖(10x40)??Fig.?1-3?Analysis?of?optical?density?in?prostate?cancer?and?benign?prostatic?hyperplasia?(10x40)??左圖所示為圈選前列腺組織上皮所在區(qū)域為感興趣區(qū)域,右圖紅色區(qū)域代表軟件自動??識別的染色陽性的細胞,然后通過軟件自動計算平均光密度值。??13??

前列腺癌,結合珠蛋白,前列腺增生,觸珠蛋白


??圖1-8?CD59、觸珠蛋白和四連接素免疫組化分析??Fig.?1-8?Confirmation?of?the?differential?expression?of?CD59,?haptoglobin,?and?tetranectin?by??immunohistochemical?analysis??綠色箭頭指示前列腺癌或前列腺增生組織的上皮細胞,藍色箭頭在圖A)和I)指示骨??組織,在其他圖片中指示前列腺間質。所有圖片放大400倍。???02=?A^?i?04?B?—????〇4?^?叩版lium?1〇3?\?D?…5lroma??5:貧卜曆卜醉??yit?eIdl?eIl?tm??///,w'//,?///,?/?/,??圖1-9前列腺癌和增生組織中CD59、結合珠蛋白和四連接素的平均光密度值比較??Fig.?1-9?The?mean?optical?density?of?CD59,?haptoglobin?and?tetranectin?in?prostate?cancer?and??hyperplasia?tissues.??BMT:骨轉移瘤;PCaBM:伴骨轉移的前列腺癌組織;PCaNM:無轉移的前列腺癌組??織;PH:前列腺增生組織。*代表p<0.05

【參考文獻】:
期刊論文
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博士論文
[1]前列腺癌中RANK/RANKL/OPG的表達與前列腺癌侵襲及骨轉移的關系[D]. 李曉鳴.蘭州大學 2010
[2]骨保護素在前列腺癌骨轉移中作用的基礎與臨床研究[D]. 陳海昕.中國協(xié)和醫(yī)科大學 2007

碩士論文
[1]慢性心理應激通過β2-AR/AKT/PKA信號通路對前列腺癌骨轉移影響的研究[D]. 齊思勇.中國人民解放軍醫(yī)學院 2017
[2]臍血造血干細胞移植NOD/SCID小鼠后人免疫功能重建的研究[D]. 譚玉波.暨南大學 2006
[3]CXCR4在非小細胞肺癌細胞中的表達和意義[D]. 李醒.重慶醫(yī)科大學 2006



本文編號:3224157

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