目的:1.篩選前列腺癌伴骨轉移患者的血清差異蛋白,并對關鍵差異蛋白進行驗證。2.分別建立前列腺癌細胞PC3與人骨髓間充質干細胞（hBMSCs）及成骨細胞（hFOB1.19）的共培養(yǎng)體系,研究PC3細胞與hBMSCs及hFOB1.19細胞之間的相互影響及CD59表達變化的機制。方法:1.收集前列腺癌伴骨轉移和無轉移患者的血清各30例,采用iTRAQ蛋白質組學方法比較兩組患者的血清差異蛋白。2.收集前列腺癌伴骨轉移、前列腺癌無轉移及前列腺增生患者血清樣本各50例及三組患者的前列腺組織切片各30張,另收集前列腺癌骨轉移灶切片5張,采用ELISA和免疫組化對3個具有顯著變化倍數的關鍵差異蛋白進行驗證。3.用Western blot、流式細胞術和免疫熒光分析三種關鍵差異蛋白在前列腺癌細胞株PC3、LNCaP、DU145中的表達情況。4.分別建立PC3細胞與hBMSCs及hFOB1.19細胞的共培養(yǎng)體系,研究hBMSCs及hFOB1.19對PC3的增殖、遷移和侵襲能力的影響及PC3對hFOB1.19增殖能力的影響。5.通過流式細胞周期檢測、Western blot、RT-PCR及細胞免疫熒光分析各... 

【文章來源】：南方醫(yī)科大學廣東省

【文章頁數】：121 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

圖１－３前列腺癌及前列腺増生組織光密度值分析示意圖（１０ｘ４０）??Ｆｉｇ．?１－３?Ａｎａｌｙｓｉｓ?ｏｆ?ｏｐｔｉｃａｌ?ｄｅｎｓｉｔｙ?ｉｎ?ｐｒｏｓｔａｔｅ?ｃａｎｃｅｒ?ａｎｄ?ｂｅｎｉｇｎ?ｐｒｏｓｔａｔｉｃ?ｈｙｐｅｒｐｌａｓｉａ?（１０ｘ４０）??

?區(qū)域。四連接素在腺上皮及間質均有表達，故將腺上皮和間質區(qū)域分別分析。??光密度分析示意圖如圖１－２和１－３所示。??１＇：．?＊＿＃＃ｋ??圖１－２前列腺癌骨轉移灶光密度值分析示意圖（１０ｘ４０）??Ｆｉｇ?１－２?Ａｎａｌｙｓｉｓ?ｏｆ?ｏｐｔｉｃａｌ?ｄｅｎｓｉｔｙ?ｏｆ?ｂｏｎｅ?ｍｅｔａｓｔａｓｅｓ?ｆｒｏｍ?ｐｒｏｓｔａｔｅ?ｃａｎｃｅｒ?（１０ｘ４０）??骨轉移灶內除骨組織外，均為密集的前列腺癌上皮細胞，無明顯間質，故將整個轉移??瘤組織圈選，然后通過軟件自動計算平均光密度值。右圖紅色區(qū)域代表軟件自動識別的染??色陽性的細胞。??＇ｗｍＳｆ??＞?ｊｌ?ｒ?＊?＇?Ａ?－１??圖１－３前列腺癌及前列腺増生組織光密度值分析示意圖（１０ｘ４０）??Ｆｉｇ．?１－３?Ａｎａｌｙｓｉｓ?ｏｆ?ｏｐｔｉｃａｌ?ｄｅｎｓｉｔｙ?ｉｎ?ｐｒｏｓｔａｔｅ?ｃａｎｃｅｒ?ａｎｄ?ｂｅｎｉｇｎ?ｐｒｏｓｔａｔｉｃ?ｈｙｐｅｒｐｌａｓｉａ?（１０ｘ４０）??左圖所示為圈選前列腺組織上皮所在區(qū)域為感興趣區(qū)域，右圖紅色區(qū)域代表軟件自動??識別的染色陽性的細胞，然后通過軟件自動計算平均光密度值。??１３??

??圖１－８?ＣＤ５９、觸珠蛋白和四連接素免疫組化分析??Ｆｉｇ．?１－８?Ｃｏｎｆｉｒｍａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｔｈｅ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｏｆ?ＣＤ５９，?ｈａｐｔｏｇｌｏｂｉｎ，?ａｎｄ?ｔｅｔｒａｎｅｃｔｉｎ?ｂｙ??ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａｌ?ａｎａｌｙｓｉｓ??綠色箭頭指示前列腺癌或前列腺增生組織的上皮細胞，藍色箭頭在圖Ａ）和Ｉ）指示骨??組織，在其他圖片中指示前列腺間質。所有圖片放大４００倍。??？０２＝?Ａ＾?ｉ？０４?Ｂ?—???？〇４?＾?叩版ｌｉｕｍ?１〇３?＼?Ｄ?…５ｌｒｏｍａ??５：貧卜曆卜醉??ｙｉｔ?ｅＩｄｌ?ｅＩｌ?ｔｍ??／／／，ｗ＇／／，?／／／，?／?／，??圖１－９前列腺癌和增生組織中ＣＤ５９、結合珠蛋白和四連接素的平均光密度值比較??Ｆｉｇ．?１－９?Ｔｈｅ?ｍｅａｎ?ｏｐｔｉｃａｌ?ｄｅｎｓｉｔｙ?ｏｆ?ＣＤ５９，?ｈａｐｔｏｇｌｏｂｉｎ?ａｎｄ?ｔｅｔｒａｎｅｃｔｉｎ?ｉｎ?ｐｒｏｓｔａｔｅ?ｃａｎｃｅｒ?ａｎｄ??ｈｙｐｅｒｐｌａｓｉａ?ｔｉｓｓｕｅｓ．??ＢＭＴ：骨轉移瘤；ＰＣａＢＭ：伴骨轉移的前列腺癌組織；ＰＣａＮＭ：無轉移的前列腺癌組??織；ＰＨ：前列腺增生組織。＊代表ｐ＜０．０５

【參考文獻】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
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本文編號：3224157