研究背景與目的:以往對(duì)終末期腎�。╡nd-stage renal disease,ESRD）患者免疫失調(diào)大多數(shù)研究都集中在T淋巴細(xì)胞免疫,這里我們研究了終末期腎病患者B淋巴細(xì)胞重鏈的組成和變化。免疫組庫(kù)（immune repertoire,IR）是指在任何指定時(shí)間,某個(gè)個(gè)體的循環(huán)系統(tǒng)中所有功能多樣性B淋巴細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞的總和。B細(xì)胞抗原受體(（B cell receptor,BCR）是B細(xì)胞識(shí)別抗原的一種膜表面免疫球蛋白（SmIg）,具有抗原結(jié)合特異性。BCR由兩條重鏈和兩條輕鏈連接而成,其中重鏈分為可變區(qū)（V區(qū)）、恒定區(qū)（C區(qū)）、跨膜區(qū)及胞質(zhì)區(qū);而輕鏈則只有V區(qū)和C區(qū)。V區(qū)由VH和VL兩個(gè)結(jié)構(gòu)域組成,它們各由三個(gè)互補(bǔ)決定區(qū)（CDR1、CDR2和CDR3）組成,CDR的氨基酸組成和排列順序呈現(xiàn)高度多樣性,在同一個(gè)體內(nèi),可高達(dá)109～1012,構(gòu)成容量巨大的BCR庫(kù),賦予個(gè)體識(shí)別各種抗原、產(chǎn)生特異性抗體的巨大潛能,這三個(gè)CDR均參與對(duì)抗原的識(shí)別,共同決定BCR的抗原特異性。免疫組庫(kù)擁有6種主要的肽鏈,分別為BCR的輕鏈和重鏈、TCR的a、β、γ和δ鏈。免疫組庫(kù)中每一種免疫蛋白彼此間結(jié)構(gòu)... 

【文章來(lái)源】：南方醫(yī)科大學(xué)廣東省

【文章頁(yè)數(shù)】：81 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－１??免疫組擇■：測(cè)序（Ｉｍｍｕｎｅ?Ｒｅｐｅｒｔｏｉｒｅ?ｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ（ＩＲ－ＳＥＱ））以?Ｔ／Ｂ?淋巴細(xì)胞??為研究目標(biāo)，以多重ＰＣＲ或５’ＲＡＣＥ技術(shù)目的擴(kuò)增決定Ｂ細(xì)胞受體（ＢＣＲ）??或Ｔ細(xì)胞受體（ＴＣＲ）多樣性的互補(bǔ)決定區(qū)（ＣＤＲ區(qū)），再結(jié)合高通量測(cè)序技??

重疊群組裝的信息。??Ｉｌｌｕｍｉｎａ測(cè)序基本步驟：首先將帶接頭的模板片段結(jié)合到微流板芯片上，然??后在芯片上進(jìn)行橋接擴(kuò)增，形成局部的單模板克隆（圖１－２）。??１２??

?延伸?退火??圖１－２橋式擴(kuò)增??Ｆｉｇｕｒｅ?１－２?Ｂｒｉｄｇｅ?ｔｙｐｅ?ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ??然后開(kāi)始測(cè)序，每個(gè)循環(huán)加入４種不同熒光標(biāo)記的核苷酸，在ＤＮＡ聚合酶??的作用卜＿按照堿基Ｋ補(bǔ)配對(duì)的原則進(jìn)行模板ＤＮＡ鏈的延伸。？個(gè)反應(yīng)結(jié)柬后，??測(cè)序儀激發(fā)熒光Ｎ時(shí)采集熒光佶號(hào)，通過(guò)對(duì)不同熒光信號(hào)的識(shí)別辨別不Ｎ堿基。??Ｉ?只別完成后洗脫未結(jié)合的堿基洗脫，然＾進(jìn)入下一個(gè)循環(huán)，累積多個(gè)循環(huán)后即??可得到每個(gè)模板的ＤＮＡ序列。（圖卜３）??１３??


本文編號(hào)：3209165