目的建立腎癌細(xì)胞OS-RC-2骨轉(zhuǎn)移動(dòng)物模型，獲得病灶腫瘤細(xì)胞株，并對(duì)兩組細(xì)胞間的基因表達(dá)譜進(jìn)行對(duì)比分析，篩選差異表達(dá)基因。方法通過脛骨平臺(tái)向脛骨髓腔內(nèi)注射OS-RC-2細(xì)胞，待局部成瘤后取病灶腫瘤細(xì)胞，循環(huán)注射，最后獲得的腫瘤細(xì)胞株與OS-RC-2細(xì)胞之間分別以MTT法檢測增殖能力，Transwell法檢測侵襲能力，流式細(xì)胞技術(shù)檢測細(xì)胞周期變化。提取兩組細(xì)胞的mRNA，通過基因芯片技術(shù)進(jìn)行雜交掃描和分析，結(jié)合KEGG網(wǎng)站數(shù)據(jù)庫的信號(hào)通路分析，篩選出相關(guān)基因，并以RT-PCR及Western blot法分別驗(yàn)證篩選出的基因在mRNA及蛋白水平上的表達(dá)差異。結(jié)果建立腎癌骨轉(zhuǎn)移動(dòng)物模型，獲得高骨轉(zhuǎn)移能力細(xì)胞株OS-RC-2-BM-3，基因芯片掃描得到差異基因共1196個(gè)，其中上調(diào)基因926個(gè)，下調(diào)基因270個(gè)，根據(jù)KEGG數(shù)據(jù)庫篩選出HIF-1α及HSP90，RT-PCR結(jié)果及Western結(jié)果均與基因芯片掃描符合。結(jié)論腎癌細(xì)胞OS-RC-2骨轉(zhuǎn)移與多個(gè)基因相關(guān)，其中HIF-1α及HSP90可能起到關(guān)鍵作用。 

【文章來源】：華中科技大學(xué)湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：50 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

成瘤的裸鼠

裸鼠下肢u-CT掃描三維成像

圖.3 a 圖為取材之后第二天的倒置相差b 圖為反復(fù)貼壁法后分離純化得到c 圖為 OS-RC-2祖細(xì)胞。0.500.550.600.650.700.750.800.850.900.951.001.051.10ODOO

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]HSP90在腫瘤中的研究[J]. 胡秀娟,王雪峰.  醫(yī)學(xué)綜述. 2008(01)



本文編號(hào)：3146384