目的通過構(gòu)建2型糖尿病（T2DM）動物模型及高糖刺激體外培養(yǎng)足細胞,測定T2DM大鼠模型腎組織、體外培養(yǎng)足細胞中microRNA-26a-5p（miR-26a-5p）、nephrin、瞬時受體電位陽離子通道蛋白6（TRPC6）及凋亡相關蛋白cleaved-caspase-3和bax/bcl-2的表達水平和足細胞凋亡情況,并應用miR-26a-5p mimics、inhibitor轉(zhuǎn)染高糖刺激體外培養(yǎng)的足細胞,觀察上述指標的變化,探討miR-26a-5p對TRPC6介導的糖尿病腎�。╠iabetic nephropathy,DN）足細胞損傷的作用及其可能機制,為DN足細胞的保護提供新的臨床思路和治療靶點。方法體內(nèi)實驗選取30只SPF級、雄性Wistar大鼠,隨機分為兩組,其中20只用于構(gòu)建T2DM大鼠模型,具體方法為采用高糖高脂喂養(yǎng)并聯(lián)合腹腔注射小劑量鏈脲佐菌素（streptozotocin,STZ,30 mg/kg）,另設正常對照組（NC組）10只。對于建模達到要求的大鼠留取血、尿及腎臟標本,測定兩組大鼠24小時尿白蛋白排泄率（UAE）、尿肌酐（Ucr）、內(nèi)生肌酐清除率（CCr）、空腹... 

【文章來源】：青島大學山東省

【文章頁數(shù)】：59 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

B、C分別為兩組大鼠KW/BW、CCr和UAE的比較

結(jié)果151.3光鏡下兩組大鼠的腎臟病理表現(xiàn)光鏡下，HE染色及PAS染色顯示，NC組大鼠腎小球結(jié)構(gòu)未見明顯異常，毛細血管管腔等顯示清晰，無明顯閉塞，系膜細胞及基質(zhì)未見增生，基底膜無明顯增厚。而較NC組相比，DM組大鼠腎組織腎小球體積明顯增大，毛細血管襻擴張，腎小球系膜細胞增生，基底膜增厚。如圖2（A-D）。NC組T2DM組圖2兩組大鼠光鏡下腎臟結(jié)構(gòu)病理改變。A、B:HE染色（×400）；C、D:PAS染色（×400）1.4電鏡下足細胞超微結(jié)構(gòu)改變電子顯微鏡下NC組大鼠足突排列整齊清晰，基底膜未見明顯增厚，足細胞整體結(jié)構(gòu)的完整性良好（如圖3A）；而DM組大鼠足突排列紊亂，足突融合率較正常組明顯升高[(74.70±3.55)%vs.(4.26±1.19)%，P<0.05，圖3B、圖4]，腎小球基底膜不同程度彌漫性增厚。

青島大學碩士學位論文16NC組T2DM組圖3兩組大鼠足細胞電鏡超微結(jié)構(gòu)改變（透射電鏡，×8000）圖4兩組大鼠足突融合率。*P＜0.05vsNC組1.5兩組大鼠腎臟免疫組化結(jié)果圖5A、B可見，NC組大鼠腎組織nephrin基本呈連續(xù)線性分布在腎小球，而DM組大鼠nephrin表達明顯降低，染色強度明顯減弱，積分平均值明顯減少（P<0.05，如圖5E）；但免疫組化結(jié)果顯示TRPC6在DM組大鼠腎臟表達及積分平均值較NC組明顯增多，如圖5C、D、F。

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3144213