目的探討ferroportin異常表達(dá)在前列腺癌和乳腺癌細(xì)胞增殖中的作用,并進(jìn)一步明確其調(diào)節(jié)的分子機(jī)制。方法通過qRT-PCR和Western blot檢測ferroportin在乳腺癌組織中的mRNA和蛋白表達(dá)水平,構(gòu)建ferroportin高表達(dá)質(zhì)粒,應(yīng)用ferroportin高表達(dá)質(zhì)粒和ferroportin特異性shRNA轉(zhuǎn)染前列腺癌PC3細(xì)胞和乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞,建立ferroportin穩(wěn)定高、低表達(dá)的腫瘤細(xì)胞系,運(yùn)用細(xì)胞計(jì)數(shù)、MTT和BrdU等方法檢測ferroportin異常表達(dá)對腫瘤細(xì)胞增殖的影響,克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測其對腫瘤形成能力的作用,并通過構(gòu)建腫瘤動(dòng)物模型對體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行驗(yàn)證；為了探討ferroportin異常表達(dá)的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)機(jī)制,我們通過文獻(xiàn)檢索、網(wǎng)絡(luò)軟件和基因芯片等手段,對ferroportin啟動(dòng)子3.0kb區(qū)域進(jìn)行預(yù)測并選定Nrf2和MZF-1作為研究對象,應(yīng)用染色質(zhì)免疫共沉淀技術(shù)檢測Nrf2、MZF-1與ferroportin啟動(dòng)子的相互作用,然后構(gòu)建含有或不含Nrf2、MZF-1結(jié)合位點(diǎn)的luciferase報(bào)告基因質(zhì)粒,通過lucifer... 

【文章來源】：天津醫(yī)科大學(xué)天津市 211工程院校

【文章頁數(shù)】：106 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
縮略語/符號說明
前言
    研究現(xiàn)狀、成果
    研究目的、方法
一、Ferroportin異常表達(dá)對腫瘤細(xì)胞作用的研究
    1.1 對象和方法
        1.1.1 研究對象
        1.1.2 研究方法
    1.2 結(jié)果
        1.2.1 Ferroportin在乳腺癌病人組織中低表達(dá)
        1.2.2 Ferroportin低表達(dá)與乳腺癌預(yù)后不良密切相關(guān)
        1.2.3 Ferroportin穩(wěn)定高、低表達(dá)PC3和MDA-MB-231細(xì)胞的獲得
        1.2.4 降低內(nèi)源性ferroportin表達(dá)可促進(jìn)腫瘤細(xì)胞體外增殖
        1.2.5 上調(diào)ferroportin表達(dá)可抑制乳腺癌細(xì)胞的體外增殖能力
        1.2.6 降低內(nèi)源性ferroportin表達(dá)明顯促進(jìn)腫瘤細(xì)胞體內(nèi)生長
        1.2.7 Ferroportin表達(dá)上調(diào)抑制乳腺癌細(xì)胞的體內(nèi)增殖
    1.3 討論
    1.4 小結(jié)
二、MZF-1、Nrf2轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)ferroportin表達(dá)的機(jī)制研究
    2.1 對象和方法
        2.1.1 研究對象
        2.1.2 研究方法
    2.2 結(jié)果
        2.2.1 Nrf2在乳腺癌病人組織中低表達(dá)
        2.2.2 Nrf2可轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)ferroportin的表達(dá)
        2.2.3 基因芯片和數(shù)據(jù)軟件預(yù)測MZF-1可能是ferroportin的轉(zhuǎn)錄因子
        2.2.4 MZF-1在乳腺癌病人組織中低表達(dá)
        2.2.5 MZF-1可結(jié)合在ferroportin的啟動(dòng)子區(qū)域
        2.2.6 位點(diǎn)（-463/-458）是MZF-1調(diào)節(jié)ferroportin的主要結(jié)合位點(diǎn)
    2.3 討論
    2.4 小結(jié)
三、MZF-1低表達(dá)及其調(diào)節(jié)促進(jìn)前列腺癌細(xì)胞增殖的機(jī)制研究
    3.1 對象和方法
        3.1.1 研究對象
        3.1.2 研究方法
    3.2 結(jié)果
        3.2.1 降低內(nèi)源性MZF-1表達(dá)可促進(jìn)PC3細(xì)胞體外增殖
        3.2.2 上調(diào)MZF-1表達(dá)可抑制PC3細(xì)胞體外增殖能力
        3.2.3 miR-492高表達(dá)可明顯促進(jìn)PC3細(xì)胞體外增殖
        3.2.4 miR-492可通過靶向MZF-1 3'UTR區(qū)調(diào)節(jié)其表達(dá)
        3.2.5 AP4和c-Myb在乳腺癌病人組織中低表達(dá)
        3.2.6 降低內(nèi)源性AP4和c-Myb表達(dá)可降低MZF-1表達(dá)水平
        3.2.7 AP4和c-Myb結(jié)合在MZF-1啟動(dòng)子區(qū)域轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)MZF-1的表達(dá)
    3.3 討論
    3.4 小結(jié)
全文結(jié)論
論文創(chuàng)新點(diǎn)
參考文獻(xiàn)
發(fā)表論文和參加科研情況說明
綜述 Ferroportin的功能及其調(diào)節(jié)
    綜述參考文獻(xiàn)
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]我國惡性腫瘤發(fā)病現(xiàn)狀及趨勢[J]. 吳菲,林國楨,張晉昕.  中國腫瘤. 2012(02)
[2]前列腺癌發(fā)病趨勢的回顧和展望[J]. 葉定偉,李長嶺.  中國癌癥雜志. 2007(03)



本文編號：3141158