目的研究miR-506-3p對(duì)前列腺癌細(xì)胞化學(xué)敏感性的影響及其作用機(jī)制。方法用RT-qPCR檢測(cè)miR-506-3p和MTDH在前列腺癌細(xì)胞系和正常前列腺細(xì)胞系中的表達(dá)水平;以紫杉醇為誘導(dǎo)藥物構(gòu)建人前列腺癌耐藥細(xì)胞株P(guān)C-3/PTX,將PC-3/PTX細(xì)胞隨機(jī)分為5組:對(duì)照組、NC mimic組、miR-506-3p mimic組、LV-MTDH組、mimic+MTDH組,利用Lipofectamine 3000轉(zhuǎn)染試劑盒分別轉(zhuǎn)染對(duì)應(yīng)質(zhì)粒。檢測(cè)其存活率、IC50值、克隆細(xì)胞數(shù)目、凋亡率以及凋亡相關(guān)蛋白的表達(dá)水平;構(gòu)建MTDH野生型（WT）和突變型（MUT）,用雙熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)驗(yàn)證miR-506-3p與MTDH之間的靶向關(guān)系; Western blot檢測(cè)miR-506-3p mimic處理后PC-3/PTX細(xì)胞中MTDH的蛋白表達(dá)水平。結(jié)果 miR-506-3p在前列腺癌細(xì)胞中低表達(dá),而MTDH高表達(dá); miR-506-3p在PC-3/PTX細(xì)胞中的表達(dá)量顯著低于在前列腺癌細(xì)胞PC-3中的表達(dá)量;相比于對(duì)照組和NC mimic組,miR-506-3p mimic組的PC-3/PT... 

【文章來(lái)源】：局解手術(shù)學(xué)雜志. 2020,29(05)

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RT-qPCR檢測(cè)miR-506-3p與MTDH在前列腺癌細(xì)胞中的表達(dá)

用TargetScan軟件預(yù)測(cè)，發(fā)現(xiàn)在MTDH 3"UTR的978-985 bp區(qū)域存在has-miR-506-3p的潛在結(jié)合位點(diǎn)(圖4a)。用雙熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)驗(yàn)證，MTDH野生型較突變型能使熒光素酶活性顯著下降(圖4b)，說(shuō)明miR-506-3p與MTDH之間確實(shí)存在靶向關(guān)系。Western blot檢測(cè)發(fā)現(xiàn)miR-506-3p mimic組PC-3/PTX細(xì)胞中MTDH蛋白表達(dá)水平顯著低于對(duì)照組和NC mimic組(圖4c)，表明過(guò)表達(dá)miR-506-3p會(huì)抑制MTDH的表達(dá)，即miR-506-3p靶向抑制MTDH的表達(dá)。圖3 miR-506-3p過(guò)表達(dá)促進(jìn)前列腺癌耐藥細(xì)胞PC-3/PTX凋亡

圖2 miR-506-3p過(guò)表達(dá)抑制前列腺癌耐藥細(xì)胞PC-3/PTX生長(zhǎng)2.5 miR-506-3p通過(guò)靶向抑制MTDH的表達(dá)增強(qiáng)PC-3/PTX細(xì)胞的化學(xué)敏感性

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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本文編號(hào)：3140623