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嬰兒雙歧桿菌介導HSV-TK/GCV對前列腺癌PC-3細胞裸鼠移植瘤細胞凋亡的影響

發(fā)布時間:2021-04-06 14:58
  目的:研究嬰兒雙歧桿菌(bifidobacterium infantis,BI)介導單純皰疹病毒胸苷激酶(herpes simplex virus thymidine kinase,HSV-TK)/丙氧鳥苷(ganciclovir,GCV)自殺基因系統(tǒng)對PC-3細胞裸鼠移植瘤細胞凋亡的影響。方法:采用前列腺癌PC-3細胞懸液皮下注射法建立裸鼠前列腺癌模型,并隨機分為4組,每組各12例,分別經(jīng)尾靜脈注射BI-p GEX-TK(重組質粒組)、BI-p GEX-5X-1(空質粒組)、BI(空嬰兒雙歧桿菌組)和生理鹽水(生理鹽水組),聯(lián)合腹腔注射GCV,4周后,稱取裸鼠質量及腫瘤質量。TUNEL法檢測各組腫瘤細胞凋亡情況,real-time PCR、Western blot分別檢測各組腫瘤組織中Fas、FAP-1、casepase3和casepase8的m RNA及蛋白表達水平。結果:重組質粒組荷瘤裸鼠體質量明顯高于其余3組(F=12.952,P=0.000),腫瘤組織質量明顯降低(F=7.795,P=0.000);重組質粒組凋亡指數(shù)明顯高于其他3組(F=45.895,P=0.000);重組質... 

【文章來源】:重慶醫(yī)科大學學報. 2015,40(10)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】:5 頁

【圖文】:

嬰兒雙歧桿菌介導HSV-TK/GCV對前列腺癌PC-3細胞裸鼠移植瘤細胞凋亡的影響


荷瘤裸鼠前列腺癌組織病理切片(HE)

腫瘤組織,凋亡,裸鼠,荷瘤


鼠中隨機選取1只,處死后取出腫瘤,固定,石蠟包埋,切片,HE染色。光鏡下觀察,見腫瘤細胞排列較紊亂,細胞體積較大、形態(tài)不一致,細胞核大小及染色深淺不一,呈腺癌特征(圖1)。2.2各組裸鼠及荷瘤體質量BI-pGEX-TK組較生理鹽水組、BI組和BI-pGEX-5X-1組裸鼠質量增加(F=12.952,P=0.000),荷瘤質量降低(F=7.795,P=0.000)。生理鹽水組、BI組和BI-pGEX-5X-1組之間比較,裸鼠質量、荷瘤質量差異均無統(tǒng)計學意義,見表1。2.3TUNEL法檢測腫瘤組織凋亡TUNEL法檢測發(fā)現(xiàn)各組裸鼠前列腺癌組織中有不同程度的凋亡(圖2),BI-pGEX-TK組較生理鹽水組、BI組和BI-pGEX-5X-1組凋亡明顯增加(F=45.895,P=0.000)。生理鹽水組、BI組和BI-pGEX-5X-1組之間比較,凋亡程度無統(tǒng)計學意義,結果見表1。2.4Real-timePCR檢測裸鼠前列腺癌組織casepase3、case-pase8、Fas及FAP-1的mRNA表達Real-timePCR結果顯示BI-pGEX-TK組casepase3(F=70.611,P=0.000)、casepase8(F=73.781,P=0.000)及Fas(F=70.077,P=0.000)的mRNA表達水平較生理鹽水組、BI組和BI-pGEX-5X-1組明顯增加,而FAP-1的mRNA表達水平較生理鹽水組、BI組和BI-pGEX-5X-1組明顯降低(F=46.880,P=0.000)。生理鹽水組、BI組和BI-pGEX-5X-1組之間相互比較,casepase3、casepase8、Fas及FAP-1的mRNA表達差異均無統(tǒng)計學意義,見表2。A.放大倍數(shù)200×B.放大倍數(shù)400×圖1荷瘤裸鼠前列腺癌組織病理切片(HE)Fig.1Histopathologicalappearanceofthexenograftsinnudemice(HE)表1各組裸鼠、荷瘤體質量及凋亡指數(shù)(x±s)Tab.1Thenudemiceandtumorweightsandapoptoticindexofeachgroup(x±s)組別樣本量(n)裸鼠體質量(g)荷瘤體質量(

半定量分析,生理鹽水,組分


?硌嗡?櫸直鷯隑I組及BI-pGEX-5X-1組比較,P值分別為:0.615、0.155;BI組與BI-pGEX-5X-1組比較,P值為0.352。Fas結果中:BI-pGEX-TK組分別與生理鹽水組、BI組及BI-pGEX-5X-1組比較,P值均為:0.000;生理鹽水組分別與BI組及BI-pGEX-5X-1組比較,P值分別為:0.093、0.509;BI組與BI-pGEX-5X-1組比較,P值為0.299。FAP-1結果中:BI-pGEX-TK組分別與生理鹽水組、BI組及BI-pGEX-5X-1組比較,P值均為:0.000;生理鹽水組分別與BI組及BI-pGEX-5X-1組比較,P值分別為:0.206、0.099;BI組與BI-pGEX-5X-1比較,P值為0.688圖3Westernblot半定量分析結果Fig.3TheanalysisofWesternblot1.生理鹽水組;2.BI組;3.BI-pGEX-5X-1組;4.BI-pGEX-TK組1234casepase3casepase8FasFAP-1β-actin—1350—

【參考文獻】:
期刊論文
[1]細胞凋亡途徑及其機制[J]. 李敏,林俊.  國際婦產(chǎn)科學雜志. 2014(02)
[2]雙歧桿菌在腫瘤靶向性基因治療中的應用[J]. 王琳,浦寅飛,王衣祥,郭傳瑸.  國際口腔醫(yī)學雜志. 2013(02)
[3]低氧與腫瘤[J]. 孫恒,李雪冰,方靖.  生命科學. 2013(02)
[4]嬰兒雙歧桿菌介導HSV-TK/GCV自殺基因治療系統(tǒng)對大鼠膀胱癌組織細胞凋亡及Fas/FasL表達的影響[J]. 喻備,王亞榮,殷祥瑞,唐偉.  中國醫(yī)科大學學報. 2012(10)
[5]兩歧雙歧桿菌在荷瘤鼠模型中的靶向定植及對巨噬細胞的免疫激活[J]. 江虹銳,魯志剛,馬玉彥,劉寧.  腫瘤. 2009(08)



本文編號:3121644

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