目的:探討組蛋白伴侶抗沉默功能蛋白1B（ASF1B）在前列腺癌細(xì)胞中的表達(dá)情況及其對(duì)體外細(xì)胞活力的影響。方法:以人前列腺癌PC-3細(xì)胞為研究對(duì)象,通過(guò)小干擾RNA（siRNA）來(lái)敲減ASF1B表達(dá)。細(xì)胞分為對(duì)照組、siRNA陰性對(duì)照載體（mock）組和siRNA-ASF1B組。采用MTT法測(cè)定ASF1B-siRNA處理PC-3細(xì)胞12、24和48 h的細(xì)胞活力。采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡和細(xì)胞周期分布情況。采用RT-qPCR檢測(cè)細(xì)胞中凋亡相關(guān)因子的mRNA表達(dá)水平,Western blot檢測(cè)細(xì)胞中MAPK/JNK/ERK信號(hào)通路相關(guān)蛋白的表達(dá)。結(jié)果:正常細(xì)胞（良性前列腺增生）中ASF1B的蛋白水平顯著低于PC-3細(xì)胞（P<0.01）。與對(duì)照組和mock組相比,用siRNA-ASF1B質(zhì)粒轉(zhuǎn)染PC-3細(xì)胞后的ASF1B蛋白表達(dá)水平顯著降低（P<0.01）,并且PC-3細(xì)胞的活力顯著降低（P<0.01）。流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果顯示,轉(zhuǎn)染siRNA-ASF1B質(zhì)粒的PC-3細(xì)胞凋亡率較對(duì)照組顯著升高（P<0.01）,且細(xì)胞周期被阻滯于G1期。RT-qPCR結(jié)果表明,與對(duì)照組... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)病理生理雜志. 2020,36(09)北大核心CSCD

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【部分圖文】：

Western blot分析BPH和PC-3細(xì)胞中ASF1B的蛋白水平

采用Western blot檢測(cè)MAPK/JNK/ERK信號(hào)通路的蛋白表達(dá)水平。結(jié)果顯示，與對(duì)照組和mock組相比，si RNA-ASF1B組PC-3細(xì)胞中MAP2K4和pJNK蛋白水平顯著升高（P<0.01），而p-ERK蛋白水平顯著降低（P<0.01），見(jiàn)圖5。圖3 流式細(xì)胞術(shù)分析各組處理12 h后PC-3細(xì)胞的凋亡和細(xì)胞周期分布

流式細(xì)胞術(shù)分析各組處理12 h后PC-3細(xì)胞的凋亡和細(xì)胞周期分布


本文編號(hào)：3112260