糖尿病腎病（diabetic nephropathy,DN）是糖尿�。╠iabetes mellitus,DM）最嚴(yán)重的微血管并發(fā)癥之一。這種疾病是由于伴隨持續(xù)高血糖和DM狀態(tài)下的血流動力學(xué)因素,導(dǎo)致腎小球、腎小管或腎間質(zhì)的損害。足細(xì)胞和腎小球系膜細(xì)胞（glomerular mesangial cells,GMCs）是腎小球中不可或缺的兩類細(xì)胞,其異常的功能變化對DN的發(fā)展起到了關(guān)鍵的作用。外泌體是由細(xì)胞分泌的微囊泡,包含了多種分子,例如蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、DNA、mi RNA和micro RNA。它們在細(xì)胞通信中的作用引起了人們的廣泛關(guān)注。課題組前期研究顯示,高糖（high glucose,HG）誘導(dǎo)的GMCs釋放的外泌體可能通過攜帶TGF-β1細(xì)胞因子并影響足細(xì)胞功能。但是其更深入的機(jī)制暫時(shí)還不清楚。PI3K/Akt/FOXO信號通路在細(xì)胞存活和凋亡中起到了重要作用,FOXO被Akt在Thr24,Ser256,Ser319上磷酸化,促進(jìn)它們的出核轉(zhuǎn)運(yùn)和轉(zhuǎn)錄激活。越來越多的證據(jù)表明F0X01具有抑癌作用,因?yàn)樗诙喾N癌癥中具有抗增殖和促凋亡活性。小檗堿（berberine,BBR）是從黃連... 

【文章來源】：安徽醫(yī)科大學(xué)安徽省

【文章頁數(shù)】：78 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
英文縮略詞對照表（Abbreviation）
摘要
Abstract
1 前言
2 材料與儀器
    2.1 細(xì)胞株
    2.2 化學(xué)藥品和試劑
    2.3 儀器與設(shè)備
3 實(shí)驗(yàn)方法
    3.1 GMCs的培養(yǎng)和分組
    3.2 足細(xì)胞的培養(yǎng)和分組
    3.3 外泌體的的分離
    3.4 GMCs與足細(xì)胞共培養(yǎng)
    3.5 外泌體的鑒定和攝取
        3.5.1 外泌體的標(biāo)志蛋白鑒定
        3.5.2 外泌體的電鏡觀察與鑒定
        3.5.3 外泌體的粒徑分布
        3.5.4 外泌體的攝取鑒定
    3.6 細(xì)胞凋亡檢測
    3.7 免疫熒光實(shí)驗(yàn)
    3.8 細(xì)胞遷移能力檢測實(shí)驗(yàn)
    3.9 Western blot檢測
    3.10 體內(nèi)研究
    3.11 組織學(xué)
    3.12 免疫組織化學(xué)
    3.13 數(shù)據(jù)分析
4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    4.1 分離鑒定系膜細(xì)胞（GMCs）源外泌體
    4.2 GMCs源外泌體被足細(xì)胞攝取
    4.3 確定GMCs源外泌體對足細(xì)胞影響的最佳條件
    4.4 高糖誘導(dǎo)GMCs源外泌體參與足細(xì)胞功能的損傷
    4.5 檢測BBR的最適濃度
    4.6 檢測TGF-β1抑制劑的最適濃度
    4.7 BBR改善高糖誘導(dǎo)GMCs源外泌體對足細(xì)胞功能的損傷
    4.8 BBR 改善高糖誘導(dǎo) GMCs 源外泌體對足細(xì)胞的損傷作用可能是與調(diào)節(jié)PI3K-AKT-FOXO1-Bim/mTORC1 信號通路有關(guān)
    4.9 高糖誘導(dǎo)GMCs源外泌體對小鼠腎功能參數(shù)的影響
    4.10 高糖誘導(dǎo)的GMCs源外泌體對小鼠腎臟組織病理學(xué)的影響
    4.11 高糖誘導(dǎo)的GMCs源外泌體對小鼠腎皮質(zhì)中WT-1 蛋白分布和表達(dá)的影響
    4.12 PI3K/AKT-Bim 信號通路參與了高糖誘導(dǎo) GMCs 源外泌體引起的的腎小球損傷
5 討論
6 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄 個(gè)人簡歷
致謝
綜述 不同來源的外泌體對糖尿病腎病的影響
    參考文獻(xiàn)


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]小檗堿對高脂合并STZ誘導(dǎo)的糖尿病腎病大鼠腎臟FN與CTGF表達(dá)的影響[J]. 王鳳玲,唐麗琴,楊峰,朱玲娜,蔡明,魏偉.  安徽醫(yī)藥. 2013(04)



本文編號：3088175