目的：本研究以膀胱尿路上皮癌患者的癌組織及正常人的膀胱組織為研究對象,采用RT-PCR、免疫組化方法檢測膀胱尿路上皮癌組織及正常膀胱組織的DNMT1、 SATB1的mRNA及蛋白的表達水平,并進行相關(guān)性比較。材料與方法：收集從2011年8月到2012年6月在新鄉(xiāng)醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院泌尿外科膀胱尿路上皮癌手術(shù)切除標本50例。標本均經(jīng)病理學確診為膀胱尿路上皮癌,術(shù)前均未經(jīng)過化療和放療；另取15例正常人的膀胱組織做為對照（膀胱鏡檢時經(jīng)患者同意所取得）。每例標本均分為兩份,一份液氮儲存以備采用RT-PCR檢測膀胱尿路上皮癌組織及正常膀胱粘膜組織中DNMT1、SATB1mRNA的表達。另一份采用多聚甲醛固定,常規(guī)脫水,石蠟包埋,3um連續(xù)切片,并烘干,脫蠟,水化,進行鏈霉素抗生物素——過氧化酶（streptavidin peroxidase, SP）免疫組化染色,檢測膀胱尿路上皮癌組織及正常膀胱粘膜組織中DNMT1、SATB1蛋白的表達情況,探討DNMT1、SATB1的表達與患者臨床病理分級及分期的關(guān)系,及DNMT1與SATB1的蛋白表達在膀胱尿路上皮癌中的相互關(guān)系。每個切片分別隨機選取不重疊的5... 

【文章來源】：新鄉(xiāng)醫(yī)學院河南省

【文章頁數(shù)】：52 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
目錄
摘要
Abstract
前言
第一部分
    1 材料與方法
        1.1 研究對象
        1.2 主要試劑儀器來源
        1.3 常用試劑配制
    2 實驗方法
        2.1 膀胱尿路上皮癌組織及正常組織中的總RNA的抽提
        2.2 RNA鑒定
        2.3 逆轉(zhuǎn)錄cDNA合成
        2.4 引物的設(shè)計及序列
        2.5 PCR反應
    3 統(tǒng)計學分析
    4 結(jié)果
第二部分
    1 材料與方法
        1.1 研究對象
        1.2 試劑儀器主要來源
        1.3 實驗所使用溶液的配制
            1.3.1 PBS的配制
            1.3.2 蘇木精液配制
            1.3.3 檸檬酸液的配制
            1.3.4 固定液4%多聚甲醛的配制
    2 實驗方法
        2.1 組織的相關(guān)處理
            2.1.1 取材后將組織進行固定
            2.1.2 將組織充分洗滌以去除固定液
            2.1.3 將組織進行脫水
            2.1.4 使組織透明
            2.1.5 組織的浸蠟
            2.1.6 組織的包埋
            2.1.7 組織的切片及撈片,烤片
        2.2 免疫組織化學SP法檢測SATB蛋白及SATB1蛋白的表達
            2.2.1 脫蠟以及水化
            2.2.2 抗原修復
            2.2.3 清洗組織片
            2.2.4 消除組織內(nèi)的內(nèi)源性過氧化物酶
            2.2.5 非特異染色阻斷劑的運用
            2.2.6 除去非特異染色阻斷劑
            2.2.7 除去PBS液
            2.2.8 除去PBS液
            2.2.9 記錄圖片
        2.3 SATB1/DNMT1在膀胱癌中及正常膀胱組織中的蛋白表達的測量
    3 統(tǒng)計學分析
    4 結(jié)果
        4.1 SATB1/DNMT1在膀胱癌及正常膀胱粘膜組織中的表達情況
        4.2 SATB1/DNMT1在膀胱尿癌中的表達與臨床病理分級與分期的關(guān)系
        4.3 SATB1/DNMT1在膀胱癌中的陽性表達的相關(guān)性
第三部分
參考文獻
綜述 SATB1及DNMT1與腫瘤關(guān)系的研究進展
    參考文獻
英文縮略詞表
攻讀學位期間發(fā)表文章情況
致謝
個人簡歷



本文編號：3043280