目的：本研究以膀胱尿路上皮癌患者的癌組織及正常人的膀胱組織為研究對(duì)象,采用RT-PCR、免疫組化方法檢測(cè)膀胱尿路上皮癌組織及正常膀胱組織的DNMT1、 SATB1的mRNA及蛋白的表達(dá)水平,并進(jìn)行相關(guān)性比較。材料與方法：收集從2011年8月到2012年6月在新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院泌尿外科膀胱尿路上皮癌手術(shù)切除標(biāo)本50例。標(biāo)本均經(jīng)病理學(xué)確診為膀胱尿路上皮癌,術(shù)前均未經(jīng)過化療和放療；另取15例正常人的膀胱組織做為對(duì)照（膀胱鏡檢時(shí)經(jīng)患者同意所取得）。每例標(biāo)本均分為兩份,一份液氮儲(chǔ)存以備采用RT-PCR檢測(cè)膀胱尿路上皮癌組織及正常膀胱粘膜組織中DNMT1、SATB1mRNA的表達(dá)。另一份采用多聚甲醛固定,常規(guī)脫水,石蠟包埋,3um連續(xù)切片,并烘干,脫蠟,水化,進(jìn)行鏈霉素抗生物素——過氧化酶（streptavidin peroxidase, SP）免疫組化染色,檢測(cè)膀胱尿路上皮癌組織及正常膀胱粘膜組織中DNMT1、SATB1蛋白的表達(dá)情況,探討DNMT1、SATB1的表達(dá)與患者臨床病理分級(jí)及分期的關(guān)系,及DNMT1與SATB1的蛋白表達(dá)在膀胱尿路上皮癌中的相互關(guān)系。每個(gè)切片分別隨機(jī)選取不重疊的5... 

【文章來源】：新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院河南省

【文章頁(yè)數(shù)】：52 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
目錄
摘要
Abstract
前言
第一部分
    1 材料與方法
        1.1 研究對(duì)象
        1.2 主要試劑儀器來源
        1.3 常用試劑配制
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 膀胱尿路上皮癌組織及正常組織中的總RNA的抽提
        2.2 RNA鑒定
        2.3 逆轉(zhuǎn)錄cDNA合成
        2.4 引物的設(shè)計(jì)及序列
        2.5 PCR反應(yīng)
    3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    4 結(jié)果
第二部分
    1 材料與方法
        1.1 研究對(duì)象
        1.2 試劑儀器主要來源
        1.3 實(shí)驗(yàn)所使用溶液的配制
            1.3.1 PBS的配制
            1.3.2 蘇木精液配制
            1.3.3 檸檬酸液的配制
            1.3.4 固定液4%多聚甲醛的配制
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 組織的相關(guān)處理
            2.1.1 取材后將組織進(jìn)行固定
            2.1.2 將組織充分洗滌以去除固定液
            2.1.3 將組織進(jìn)行脫水
            2.1.4 使組織透明
            2.1.5 組織的浸蠟
            2.1.6 組織的包埋
            2.1.7 組織的切片及撈片,烤片
        2.2 免疫組織化學(xué)SP法檢測(cè)SATB蛋白及SATB1蛋白的表達(dá)
            2.2.1 脫蠟以及水化
            2.2.2 抗原修復(fù)
            2.2.3 清洗組織片
            2.2.4 消除組織內(nèi)的內(nèi)源性過氧化物酶
            2.2.5 非特異染色阻斷劑的運(yùn)用
            2.2.6 除去非特異染色阻斷劑
            2.2.7 除去PBS液
            2.2.8 除去PBS液
            2.2.9 記錄圖片
        2.3 SATB1/DNMT1在膀胱癌中及正常膀胱組織中的蛋白表達(dá)的測(cè)量
    3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    4 結(jié)果
        4.1 SATB1/DNMT1在膀胱癌及正常膀胱粘膜組織中的表達(dá)情況
        4.2 SATB1/DNMT1在膀胱尿癌中的表達(dá)與臨床病理分級(jí)與分期的關(guān)系
        4.3 SATB1/DNMT1在膀胱癌中的陽(yáng)性表達(dá)的相關(guān)性
第三部分
參考文獻(xiàn)
綜述 SATB1及DNMT1與腫瘤關(guān)系的研究進(jìn)展
    參考文獻(xiàn)
英文縮略詞表
攻讀學(xué)位期間發(fā)表文章情況
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)歷



本文編號(hào)：3043280