糖尿病腎�。╠iabetic nephropathy,DN）是糖尿病眾多慢性并發(fā)癥中最常見和最嚴(yán)重的一種,DN的重要病理基礎(chǔ)是腎小球系膜細(xì)胞增生和細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）堆積誘發(fā)腎小球硬化,TGF-β1是最重要的致纖維化因子。研究表明,miR-130b在DN患者外周血和DN小鼠腎組織中均顯著降低,提示miR-130b可能受TGF-β1調(diào)控而發(fā)生表達(dá)水平的改變,而TGF-β1是誘導(dǎo)DN發(fā)生的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子,從而加重腎臟纖維化,可能的機(jī)制主要是利用TGF-β1/Smads途徑調(diào)節(jié)下游纖維化因子ColI、ColIV、FN等靶基因的表達(dá),但其具體的調(diào)控機(jī)制尚不清楚。因此,闡明TGF-β1/Smads和mi R-130b之間的相互作用,對(duì)了解和防治糖尿病腎病具有十分重要意義。研究目的:本項(xiàng)目重點(diǎn)研究人腎小球系膜HMC細(xì)胞在高糖環(huán)境、TGF-β1誘導(dǎo)及轉(zhuǎn)染miR-130b mimics/inhibitor后HMC細(xì)胞纖維化的內(nèi)在聯(lián)系,揭示mi R-130b在DN中纖維化過程中的作用機(jī)制,為DN的預(yù)防、診斷和治療提供新思路。研究方法:1.臨床標(biāo)本已征得河南科技大學(xué)倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)及病人本人同意并簽署知情... 

【文章來(lái)源】：河南科技大學(xué)河南省

【文章頁(yè)數(shù)】：72 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第1章 前言
    1.1 研究現(xiàn)狀、成果
    1.2 研究目的、方法
    1.3 創(chuàng)新點(diǎn)
    1.4 展望
第2章 材料與方法
    2.1 糖尿病腎病病人病理切片材料與方法
        2.1.1 研究對(duì)象
        2.1.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑
        2.1.3 主要儀器設(shè)備
        2.1.4 試劑配制
        2.1.5 標(biāo)本處理
        2.1.6 HE染色
        2.1.7 Mason染色
        2.1.8 免疫組化
    2.2 HMC細(xì)胞培養(yǎng)方法及各實(shí)驗(yàn)分組
        2.2.1 細(xì)胞株
        2.2.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑
        2.2.3 主要實(shí)驗(yàn)儀器
        2.2.4 常用試劑配制
        2.2.5 細(xì)胞培養(yǎng)方法
        2.2.6 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞分組
        2.2.7 Western blot實(shí)驗(yàn)
        2.2.8 qRT-PCR實(shí)驗(yàn)
        2.2.9 免疫熒光實(shí)驗(yàn)
第3章 結(jié)果
    3.1 糖尿病腎病病人病理切片特征結(jié)果
        3.1.1 HE染色結(jié)果
        3.1.2 Masson染色結(jié)果
        3.1.3 免疫組化染色結(jié)果
    3.2 高糖培養(yǎng)HMC細(xì)胞結(jié)果
        3.2.1 qRT-PCR檢測(cè)miR-130b結(jié)果
        3.2.2 纖維化蛋白因子ColⅠ、ColⅣ、FN結(jié)果
    3.3 miR-130b對(duì)HMC細(xì)胞纖維化的影響結(jié)果
        3.3.1 qRT-PCR檢測(cè)miR-130b結(jié)果
        3.3.2 纖維化蛋白因子ColⅠ、ColⅣ、FN結(jié)果
        3.3.3 纖維化蛋白因子ColⅠ、ColⅣ、FN免疫熒光結(jié)果
    3.4 TGF-β1對(duì)HMC細(xì)胞的影響結(jié)果
        3.4.1 qRT-PCR檢測(cè)miR-130b結(jié)果
        3.4.2 纖維化蛋白因子ColⅠ、ColⅣ、FN結(jié)果
        3.4.3 纖維化蛋白因子ColⅠ、ColⅣ、FN免疫熒光結(jié)果
    3.5 miR-130b對(duì)TGF-β1誘導(dǎo)的HMC細(xì)胞的影響結(jié)果
        3.5.1 qRT-PCR檢測(cè)miR-130b結(jié)果
        3.5.2 纖維化蛋白因子ColⅠ、ColⅣ、FN結(jié)果
        3.5.3 纖維化蛋白因子ColⅠ、ColⅣ、FN免疫熒光結(jié)果
    3.6 miR-130b對(duì)TGF-β1誘導(dǎo)的HMC細(xì)胞Smads蛋白的影響結(jié)果
        3.6.1 qRT-PCR檢測(cè)Smads蛋白mRNA結(jié)果
        3.6.2 Western blot檢測(cè)Smads蛋白結(jié)果
        3.6.3 Smads蛋白免疫熒光結(jié)果
第4章 討論
    4.1 糖尿病腎病病人病理切片特征討論
    4.2 高糖培養(yǎng)HMC細(xì)胞討論
    4.3 miR-130b對(duì)HMC細(xì)胞纖維化的影響的討論
    4.4 TGF-β1對(duì)HMC細(xì)胞的影響的討論
    4.5 miR-130b對(duì)TGF-β1誘導(dǎo)的HMC細(xì)胞的影響的討論
    4.6 miR-130b對(duì)TGF-β誘導(dǎo)的HMC細(xì)胞Smads蛋白的影響的討論
第5章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
縮略語(yǔ)詞匯表
附錄I 圖及說明
致謝
攻讀學(xué)位期間的研究成果


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]糖尿病腎病的動(dòng)物模型[J]. 朱紅平,劉芳,付平.  中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合腎病雜志. 2015(07)
[2]冬蟲夏草對(duì)大鼠糖尿病腎病的保護(hù)作用機(jī)制研究[J]. 張莉,鄢艷,胡秀華,何艷.  江西醫(yī)藥. 2014(11)



本文編號(hào)：3040067