糖尿病腎�。╠iabetic nephropathy,DN）是糖尿病眾多慢性并發(fā)癥中最常見和最嚴重的一種,DN的重要病理基礎是腎小球系膜細胞增生和細胞外基質（ECM）堆積誘發(fā)腎小球硬化,TGF-β1是最重要的致纖維化因子。研究表明,miR-130b在DN患者外周血和DN小鼠腎組織中均顯著降低,提示miR-130b可能受TGF-β1調控而發(fā)生表達水平的改變,而TGF-β1是誘導DN發(fā)生的關鍵調節(jié)因子,從而加重腎臟纖維化,可能的機制主要是利用TGF-β1/Smads途徑調節(jié)下游纖維化因子ColI、ColIV、FN等靶基因的表達,但其具體的調控機制尚不清楚。因此,闡明TGF-β1/Smads和mi R-130b之間的相互作用,對了解和防治糖尿病腎病具有十分重要意義。研究目的:本項目重點研究人腎小球系膜HMC細胞在高糖環(huán)境、TGF-β1誘導及轉染miR-130b mimics/inhibitor后HMC細胞纖維化的內在聯系,揭示mi R-130b在DN中纖維化過程中的作用機制,為DN的預防、診斷和治療提供新思路。研究方法:1.臨床標本已征得河南科技大學倫理委員會審核批準及病人本人同意并簽署知情... 

【文章來源】：河南科技大學河南省

【文章頁數】：72 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第1章 前言
    1.1 研究現狀、成果
    1.2 研究目的、方法
    1.3 創(chuàng)新點
    1.4 展望
第2章 材料與方法
    2.1 糖尿病腎病病人病理切片材料與方法
        2.1.1 研究對象
        2.1.2 主要實驗試劑
        2.1.3 主要儀器設備
        2.1.4 試劑配制
        2.1.5 標本處理
        2.1.6 HE染色
        2.1.7 Mason染色
        2.1.8 免疫組化
    2.2 HMC細胞培養(yǎng)方法及各實驗分組
        2.2.1 細胞株
        2.2.2 主要實驗試劑
        2.2.3 主要實驗儀器
        2.2.4 常用試劑配制
        2.2.5 細胞培養(yǎng)方法
        2.2.6 實驗細胞分組
        2.2.7 Western blot實驗
        2.2.8 qRT-PCR實驗
        2.2.9 免疫熒光實驗
第3章 結果
    3.1 糖尿病腎病病人病理切片特征結果
        3.1.1 HE染色結果
        3.1.2 Masson染色結果
        3.1.3 免疫組化染色結果
    3.2 高糖培養(yǎng)HMC細胞結果
        3.2.1 qRT-PCR檢測miR-130b結果
        3.2.2 纖維化蛋白因子ColⅠ、ColⅣ、FN結果
    3.3 miR-130b對HMC細胞纖維化的影響結果
        3.3.1 qRT-PCR檢測miR-130b結果
        3.3.2 纖維化蛋白因子ColⅠ、ColⅣ、FN結果
        3.3.3 纖維化蛋白因子ColⅠ、ColⅣ、FN免疫熒光結果
    3.4 TGF-β1對HMC細胞的影響結果
        3.4.1 qRT-PCR檢測miR-130b結果
        3.4.2 纖維化蛋白因子ColⅠ、ColⅣ、FN結果
        3.4.3 纖維化蛋白因子ColⅠ、ColⅣ、FN免疫熒光結果
    3.5 miR-130b對TGF-β1誘導的HMC細胞的影響結果
        3.5.1 qRT-PCR檢測miR-130b結果
        3.5.2 纖維化蛋白因子ColⅠ、ColⅣ、FN結果
        3.5.3 纖維化蛋白因子ColⅠ、ColⅣ、FN免疫熒光結果
    3.6 miR-130b對TGF-β1誘導的HMC細胞Smads蛋白的影響結果
        3.6.1 qRT-PCR檢測Smads蛋白mRNA結果
        3.6.2 Western blot檢測Smads蛋白結果
        3.6.3 Smads蛋白免疫熒光結果
第4章 討論
    4.1 糖尿病腎病病人病理切片特征討論
    4.2 高糖培養(yǎng)HMC細胞討論
    4.3 miR-130b對HMC細胞纖維化的影響的討論
    4.4 TGF-β1對HMC細胞的影響的討論
    4.5 miR-130b對TGF-β1誘導的HMC細胞的影響的討論
    4.6 miR-130b對TGF-β誘導的HMC細胞Smads蛋白的影響的討論
第5章 結論
參考文獻
縮略語詞匯表
附錄I 圖及說明
致謝
攻讀學位期間的研究成果


【參考文獻】：
期刊論文
[1]糖尿病腎病的動物模型[J]. 朱紅平,劉芳,付平.  中國中西醫(yī)結合腎病雜志. 2015(07)
[2]冬蟲夏草對大鼠糖尿病腎病的保護作用機制研究[J]. 張莉,鄢艷,胡秀華,何艷.  江西醫(yī)藥. 2014(11)



本文編號：3040067