第一部分sM8α真核表達(dá)載體的構(gòu)建、擴(kuò)增、測(cè)序鑒定及體外表達(dá)驗(yàn)證目的：檢測(cè)前列腺癌三系LNCaP、PC-3、DU145細(xì)胞中sM8α的表達(dá),并構(gòu)建sM8α真核表達(dá)載體（pcDNA3.1（-）-sM8a-His質(zhì)粒）并進(jìn)行測(cè)序。測(cè)序鑒定成功后,將pcDNA3.1（-）-sM8a-His質(zhì)粒轉(zhuǎn)染雄激素依賴性前列腺癌LNCaP細(xì)胞,為研究sM8α對(duì)前列腺癌腫瘤生物學(xué)行為的影響提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。方法：1)逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（RT-PCR）檢測(cè)前列腺癌三系LNCaP、 PC-3、DU145細(xì)胞中sM8α的表達(dá),通過(guò)高保真PCR獲得sM8a-His片段,通過(guò)雙酶切和T4連接酶構(gòu)建pcDNA3.1（-）-sM8a-His質(zhì)粒,進(jìn)行測(cè)序后,與pubmed上的基因序列進(jìn)行比對(duì)。2)傳代培養(yǎng)293T細(xì)胞,并將pcDNA3.1（-）-sM8a-His質(zhì)粒及空載對(duì)照質(zhì)粒分別轉(zhuǎn)染到293T細(xì)胞中,48h后western-bloting鑒定sM8a-His融合蛋白表達(dá)。結(jié)果：RT-PCR檢測(cè)到sM8a mRNA在三種前列腺癌細(xì)胞中低表達(dá)。成功構(gòu)建pcDNA3.1（-）-sM8a-His質(zhì)粒并且測(cè)序完全正確。pcDN... 

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【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
引言
第一部分 sM8α真核表達(dá)載體的構(gòu)建、擴(kuò)增、測(cè)序鑒定及體外表達(dá)驗(yàn)證
    材料和方法
    研究結(jié)果
    討論
第二部分 sM8α對(duì)前列腺癌LNCaP細(xì)胞體外腫瘤生物學(xué)行為影響
    材料和方法
    研究結(jié)果
    討論
第三部分 前列腺癌LNCaP細(xì)胞中sM8α和絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）信號(hào)通路的關(guān)系
    材料和方法
    研究結(jié)果
    討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀博士期間發(fā)表的科研成果目錄
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]有絲分裂激活蛋白激酶激活與前列腺癌的惡化進(jìn)展[J]. 葉定偉,李慧,Priscilla Chauvin,孫穎浩,錢松溪,鄭家富,馬永江.  腫瘤防治雜志. 2002(02)



本文編號(hào)：3037789