目的觀(guān)察人腎小管上皮細(xì)胞（HK-2細(xì)胞）缺氧/復(fù)氧（hypoxia/reoxygenation,H/R）損傷時(shí)線(xiàn)粒體動(dòng)力相關(guān)蛋白1（dynamin-related protein 1,Drp1）、Nod樣受體熱蛋白結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白3（nucleotide binding oligomerization domain-like receptor family pyrin domain containing 3,Nlrp3）以及炎性因子的表達(dá)改變和細(xì)胞焦亡情況,探討Drp1在H/R誘導(dǎo)腎小管上皮細(xì)胞焦亡中的作用。方法 HK-2細(xì)胞用含10%胎牛血清的DMEM/F12液培養(yǎng)于37℃、5%CO2和95%O2的恒溫培養(yǎng)箱。將細(xì)胞分為正常對(duì)照組、H/R組、H/R+Drp1抑制劑（H/R+Mdivi-1）組、H/R+si Nlrp3腺病毒（H/R+si Nlrp3）組、H/R+空腺病毒（H/R+Scra）組。檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)液上清乳酸脫氫酶LDH活性,Western blot檢測(cè)Drp1、Nlrp3、凋亡相關(guān)蛋白-1（caspase-1）、IL-1β表達(dá),2’,7’-二氯熒光黃雙乙酸鹽（DCFH-DA）檢... 

【文章來(lái)源】：第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào). 2016,38(11)北大核心

【文章頁(yè)數(shù)】：6 頁(yè)

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 主要試劑
    1.2 細(xì)胞培養(yǎng)
    1.3 實(shí)驗(yàn)分組和缺氧/復(fù)氧細(xì)胞模型的制備
    1.4 細(xì)胞轉(zhuǎn)染
    1.5 細(xì)胞焦亡的檢測(cè)
    1.6 DCFH-DA檢測(cè)細(xì)胞活性氧水平
    1.7 蛋白質(zhì)免疫印跡分析
    1.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 缺氧/復(fù)氧時(shí)HK-2細(xì)胞發(fā)生焦亡
    2.2 缺氧/復(fù)氧時(shí)HK-2細(xì)胞Drp1、Nlrp3、活性氧的表達(dá)
    2.3 Drp1抑制劑Mdivi-1減輕細(xì)胞活性氧、Nlrp3表達(dá)以及缺氧/復(fù)氧誘導(dǎo)的HK-2細(xì)胞焦亡
    2.4 si Nlrp3能減少Nlrp3的表達(dá)和炎癥反應(yīng)以及HK-2細(xì)胞焦亡
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]P2X7/NALP3在急性腎小管壞死腎組織中的表達(dá)及意義[J]. 曹雪嬌,侯衛(wèi)平,張媛媛,袁發(fā)煥.  第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào). 2014(06)



本文編號(hào)：3028693