目的觀察人腎小管上皮細胞（HK-2細胞）缺氧/復氧（hypoxia/reoxygenation,H/R）損傷時線粒體動力相關蛋白1（dynamin-related protein 1,Drp1）、Nod樣受體熱蛋白結構域相關蛋白3（nucleotide binding oligomerization domain-like receptor family pyrin domain containing 3,Nlrp3）以及炎性因子的表達改變和細胞焦亡情況,探討Drp1在H/R誘導腎小管上皮細胞焦亡中的作用。方法 HK-2細胞用含10%胎牛血清的DMEM/F12液培養(yǎng)于37℃、5%CO2和95%O2的恒溫培養(yǎng)箱。將細胞分為正常對照組、H/R組、H/R+Drp1抑制劑（H/R+Mdivi-1）組、H/R+si Nlrp3腺病毒（H/R+si Nlrp3）組、H/R+空腺病毒（H/R+Scra）組。檢測細胞培養(yǎng)液上清乳酸脫氫酶LDH活性,Western blot檢測Drp1、Nlrp3、凋亡相關蛋白-1（caspase-1）、IL-1β表達,2’,7’-二氯熒光黃雙乙酸鹽（DCFH-DA）檢... 

【文章來源】：第三軍醫(yī)大學學報. 2016,38(11)北大核心

【文章頁數】：6 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 主要試劑
    1.2 細胞培養(yǎng)
    1.3 實驗分組和缺氧/復氧細胞模型的制備
    1.4 細胞轉染
    1.5 細胞焦亡的檢測
    1.6 DCFH-DA檢測細胞活性氧水平
    1.7 蛋白質免疫印跡分析
    1.8 統(tǒng)計學分析
2 結果
    2.1 缺氧/復氧時HK-2細胞發(fā)生焦亡
    2.2 缺氧/復氧時HK-2細胞Drp1、Nlrp3、活性氧的表達
    2.3 Drp1抑制劑Mdivi-1減輕細胞活性氧、Nlrp3表達以及缺氧/復氧誘導的HK-2細胞焦亡
    2.4 si Nlrp3能減少Nlrp3的表達和炎癥反應以及HK-2細胞焦亡
3 討論


【參考文獻】：
期刊論文
[1]P2X7/NALP3在急性腎小管壞死腎組織中的表達及意義[J]. 曹雪嬌,侯衛(wèi)平,張媛媛,袁發(fā)煥.  第三軍醫(yī)大學學報. 2014(06)



本文編號：3028693