目的探討雌激素受體β（ERβ）干擾質(zhì)粒對前列腺癌PC3細(xì)胞生物學(xué)行為的影響,以及ERK1/2信號通路在其中的作用。方法針對ERβ特定靶定位置,構(gòu)建干擾質(zhì)粒psilencer-2.1-U6-neo-sh ERβ（sh ERβ）,利用Lipofectemine2000作為載體將sh ERβ轉(zhuǎn)染PC3細(xì)胞,采用G418篩選穩(wěn)定低表達(dá)ERβ的PC3細(xì)胞。Real-time PCR及Western blot檢測ERβ的表達(dá)。實(shí)驗(yàn)分為空白對照組、陰性對照組、sh ERβ組,將3組細(xì)胞注射在裸鼠皮下建立移植瘤模型,空白對照組未加入任何處理因素;陰性對照組轉(zhuǎn)染空質(zhì)粒psilencer-2.1-U6-neo;sh ERβ組轉(zhuǎn)染重組質(zhì)粒psilencer-2.1-U6-neo-sh ERβ。繪制腫瘤生長曲線和稱取瘤重;應(yīng)用免疫組織化學(xué)檢測腫瘤組織ERβ的表達(dá)及ERK1/2活化;應(yīng)用Western blot檢測腫瘤組織VEGF的表達(dá)。結(jié)果測序比對分析表明成功完成了干擾質(zhì)粒psilencer-2.1-U6-neo-sh ERβ的構(gòu)建,Real-time PCR及Western blot結(jié)果顯示成功轉(zhuǎn)染并篩選出... 

【文章來源】：廣東醫(yī)學(xué). 2017,38(18)北大核心

【文章頁數(shù)】：5 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 psilencer-2.1-U6-neo-sh ERβ質(zhì)粒構(gòu)建
        1.2.2 細(xì)胞培養(yǎng)及轉(zhuǎn)染
        1.2.3 ERβ的表達(dá)
        1.2.4 實(shí)驗(yàn)分組
        1.2.5 建立裸鼠移植瘤模型
        1.2.6 腫瘤組織切片免疫組化檢測
        1.2.7 腫瘤組織Western blot檢測
    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 干擾質(zhì)粒構(gòu)建和細(xì)胞轉(zhuǎn)染
        2.1.1 psilencer-2. 1-U6-neo-sh ERβ的測序
        2.1.2 ERβ的表達(dá)
    2.2 體內(nèi)致瘤能力
    2.3 移植瘤組織ERβ蛋白表達(dá)和ERK1/2蛋白活化
    2.4 移植瘤組織VEGF蛋白表達(dá)
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]去勢抵抗性前列腺癌（CRPC）的藥物治療新進(jìn)展[J]. 劉兆博,王春喜.  中國老年學(xué)雜志. 2015(09)
[2]多種腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合前列腺特異性抗原檢測在前列腺癌診斷中的價(jià)值[J]. 謝沖,黃其偉,王國民,唐群業(yè),郭劍明.  中華泌尿外科雜志. 2015 (03)
[3]前列腺癌患者血清微小RNA表達(dá)譜的初步研究[J]. 丁翔,崔鳳梅,侯建全,歐陽駿,浦金賢,李綱,呂金星,黃玉華,徐曉峰,嚴(yán)春寅.  中華泌尿外科雜志. 2015 (03)
[4]前列腺癌發(fā)病機(jī)制中雄激素和雄激素受體信號的作用[J]. 鮑文華,陳福軍,楊澤.  中國老年保健醫(yī)學(xué). 2015(01)
[5]腫瘤發(fā)病及治療中ER的作用[J]. 張翠翠,陳夢云,軒菡,張博.  現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué). 2014(10)
[6]雌激素受體在前列腺癌中的表達(dá)分布及預(yù)后意義[J]. 劉余慶,盧劍,陸敏,馬然,洪鍇,黃毅,馬潞林.  中華泌尿外科雜志. 2013 (05)



本文編號：3023365