目的:分析前列腺癌細(xì)胞中胰島素的作用及其機制。方法:選取胰島素對三種細(xì)胞分別予以刺激,即:PC-3、LNCaP-AI以及LNCaP,胰島素受體表達(dá)變化選取免疫細(xì)胞化學(xué)（ICC,immuno cyto chemistry）法、蛋白免疫印跡（Western Blotting）以及實時熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)（Real-Time PCR）予以檢測;同時,選取細(xì)胞侵襲試驗（Transwell）、細(xì)胞劃痕試驗、四唑鹽（MTT）法以及細(xì)胞計數(shù)法分別對細(xì)胞接受刺激之前與刺激之后的侵襲能力、遷移、活力以及增殖的變化情況予以檢測;細(xì)胞接受刺激前后的Ras、ERK1/2、MEK1/2蛋白的表達(dá)選取Western Blotting予以檢測,在此基礎(chǔ)上對MAPK信號通路活性變化情況予以觀察。結(jié)果:三種前列腺癌細(xì)胞的胰島素受體在胰島素刺激下可在一定程度上增加其在mRNA及蛋白水平表達(dá),還可抑制LNCaP細(xì)胞的侵襲、遷移、活力以及增殖,能夠進(jìn)一步促進(jìn)PC-3細(xì)胞的侵襲、遷移、增殖等;但是,胰島素刺激之前與刺激之后LNCaP-AI細(xì)胞的侵襲、遷移、活力以及增殖無顯著變化;胰島素能夠使MEK、ERK磷酸化水平與LNCa ... 

【文章來源】：西南醫(yī)科大學(xué)四川省

【文章頁數(shù)】：64 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

胰島素對前列腺癌細(xì)胞中INSR蛋白水平表達(dá)的影響

圖 2 前列腺癌細(xì)胞增殖中胰島素的影響 2 The effect of insulin in prostate cancer cell proli*代表 P＜0.05，**代表 P＜0.01，#代表 P＞0.05vsPBS 對照 DHT、INS 刺激細(xì)胞 72h 之后，對 PC-3、LNCaP-AI 以及 收集，予以細(xì)胞計數(shù)，橫軸主要以時間（Day）為主，縱軸為主，對柱狀圖予以繪制，每一個小組對 3 個重復(fù)孔予以設(shè)腺癌細(xì)胞遷移能力中 INS 產(chǎn)生的影響分析 刺激細(xì)胞之后，對細(xì)胞遷移能力變化予以檢測，檢測主要。劃痕之后第 0d、3d 以及 6d 予以拍照。每一個小組隨機

3 INS 對前列腺癌細(xì)胞 Ras-MEK-ERK 信號通路活化的影3 The influence of the INS in the activation of Ras -signaling pathway in prostate cancer cellsNS 刺激 PC-3、LNCaP-AI 以及 LNCaP 細(xì)胞 36h 之后，收集取蛋白，檢測 Ras 水平變化，LNCaP 細(xì)胞 Ras 蛋白水平表C、D：分別在刺激之后 0min、15min、30min 以及 60min 提取蛋白，與 PBS 對照組比較，LNCaP 細(xì)胞 INS 組 MEK、到抑制。

【參考文獻(xiàn)】：
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本文編號：3011140