目的:PERK通過活化下游e IF2α和Nrf-2兩條信號通路發(fā)揮促凋亡或抗凋亡效應(yīng),PERK內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激通路活化通過調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡參與多種疾病的發(fā)病。新近研究表明糖尿病腎病存在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激及PERK/e IF2α通路活化,然而,PERK/e IF2α通路活化與腎組織細(xì)胞凋亡間的關(guān)系尚不明確。本研究在證明糖尿病腎組織存在GRP78/PERK/e IF2α內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激信號通路活化,以及組織細(xì)胞凋亡增加的前期工作基礎(chǔ)上,擬采用RNA干擾技術(shù)下調(diào)e IF2α和Nrf-2基因表達(dá),通過體外實驗旨在明確:⑴糖尿病腎組織細(xì)胞凋亡與PERK/e IF2α和（或）PERK/Nrf-2信號通路活化的關(guān)系;⑵高糖和血管緊張素Ⅱ誘導(dǎo)腎小管上皮細(xì)胞凋亡,是否依賴PERK/e IF2α和（或）PERK/Nrf-2信號通路活化;⑶e IF2α和Nrf-2何為誘導(dǎo)凋亡的關(guān)鍵分子。本項目的意義在于為糖尿病腎病治療篩選新的有效的分子干預(yù)靶點。方法:體外培養(yǎng)腎小管上皮細(xì)胞（NRK-52E）,分別單獨轉(zhuǎn)染e IF2α-si RNA、Nrf-2-si RNA慢病毒載體,用熒光顯微鏡觀察轉(zhuǎn)染效率,確定MOI值。轉(zhuǎn)染后的NRK-52E細(xì)... 

【文章來源】：山西醫(yī)科大學(xué)山西省

【文章頁數(shù)】：53 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
常用縮略詞中英文對照表
前言
1 實驗材料與方法
    1.1 主要儀器
    1.2 主要試劑及耗材
    1.3 實驗細(xì)胞
    1.4 實驗方法
    1.5 統(tǒng)計學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 熒光顯微鏡觀察NRK-52E細(xì)胞感染效果
    2.2 熒光定量PCR（RT-PCR）篩選有效靶點
    2.3 流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果
    2.4 Western blot分析
    2.5 免疫組化檢測e IF2α、Nrf-2蛋白的表達(dá)
    2.6 TUNEL結(jié)果
3 討論
4 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
在學(xué)期間承擔(dān)/參與的科研課題與研究成果
個人簡歷


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78研究進(jìn)展[J]. 吳逸園,楊業(yè)鵬,李載權(quán).  生理科學(xué)進(jìn)展. 2009(02)
[2]細(xì)胞因子與糖尿病腎病[J]. 王昱,鮑曉榮.  實用診斷與治療雜志. 2007(11)
[3]接近正常的血糖對糖尿病微血管并發(fā)癥的影響[J]. 丁鶴林.  國外醫(yī)學(xué)(內(nèi)科學(xué)分冊). 1995(09)



本文編號：2972137