目的:采用體外培養(yǎng)細(xì)胞的方法,觀察中藥復(fù)方腎纖康對(duì)轉(zhuǎn)化生長因子-β1（transforming growth factor-β1,TGF-β1）刺激大鼠腎小管上皮細(xì)胞（NRK-52E）轉(zhuǎn)分化的作用,從細(xì)胞分子水平探討腎纖康對(duì)腎間質(zhì)纖維化的作用及其機(jī)制。方法:采用腎纖康及鹽酸貝那普利片給大鼠灌胃,每天分灌2次,持續(xù)5天。5天后大鼠腹主動(dòng)脈采血,分離血清,即得相應(yīng)藥物含藥血清。體外培養(yǎng)NRK-52E細(xì)胞,培養(yǎng)基為含有10%胎牛血清的DMEM/High-glouse培養(yǎng)基。將NRK-52E細(xì)胞分為6組:正常對(duì)照組（A組,10%正常大鼠血清）、模型組（B組）、低劑量組（C組,2.5%腎纖康含藥血清）、中劑量組（D組,5%腎纖康含藥血清）、高劑量組（E組,10%腎纖康含藥血清）、貝那普利組（F組,10%貝那普利含藥血清）。后5組均用10ng/ml的TGF-β1誘導(dǎo)刺激,經(jīng)藥物干預(yù)細(xì)胞72h后,觀察藥物對(duì)NRK-52E細(xì)胞形態(tài)的影響,采用免疫熒光技術(shù)檢測α-SMA、Smad3、Smad7蛋白的表達(dá)情況,Real-time PCR檢測α-SMA、TGF-β1、Smad3、Smad7mRNA的表達(dá)水平... 

【文章來源】：西南醫(yī)科大學(xué)四川省

【文章頁數(shù)】：67 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

各組NRK-52E細(xì)胞的形態(tài)變化（x200）

d 組 e 組 f 組圖 1 各組 NRK-52E 細(xì)胞的形態(tài)變化（x200）Picture 1 Morphological changes of NRK-52E cells in every group（x200）表 2 各組 NRK-52E 細(xì)胞增殖的情況Table 2 Proliferation of NRK-52E cells in every group分組 OD 值（n=5， x±s） 細(xì)胞存活率（%）a 組 1.0926±0.0941 100b 組 1.1684±0.0679 * 106.94c 組 1.1426±0.0950 # 104.58d 組 1.0928±0.0535 # 100.02e 組 1.0862±0.0464 # 99.41f 組 1.1824±0.0436 # 108.22

2、腎纖康含藥血清對(duì) TGF-β1 誘導(dǎo)的 NRK-52E 細(xì)胞一般形態(tài)的影響正常的 NRK-52E 細(xì)胞（A 組）生長良好，各細(xì)胞之間連接緊密，排列成多邊形或者卵圓形，像“鋪路石”一樣平鋪在培養(yǎng)皿上；單純TGF-β1 刺激 72h 后細(xì)胞（B 組）形態(tài)出現(xiàn)明顯改變，大部分細(xì)胞失去其原有形態(tài)，拉長呈梭形，細(xì)胞之間排列欠緊密；腎纖康含藥血清各劑量組（C 組、D 組、E 組）細(xì)胞形態(tài)發(fā)生變化，但變化程度均較B 組減輕，且隨著劑量的增加，細(xì)胞形態(tài)變化逐漸接近于正常NRK-52E 細(xì)胞；F 組細(xì)胞很少部分呈梭形，大部分為仍為“鋪路石”狀，與 E 組細(xì)胞變化大致相同。見圖 3。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：2933202