本文關(guān)鍵詞：替米沙坦對(duì)單純性肥胖小鼠血清脂聯(lián)素、尿微量白蛋白及腎臟病理的作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：研究目的肥胖目前是全球共存的一個(gè)嚴(yán)重的公共衛(wèi)生問(wèn)題。近年來(lái)肥胖的發(fā)病率大幅度增長(zhǎng),預(yù)測(cè)表明,2030年全球人口將有58%為超重或是肥胖。超重及肥胖可增加2型糖尿病、高血壓、心血管疾病及腎臟疾病發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)。Weisinger早在1974年就已提出肥胖可導(dǎo)致蛋白尿的產(chǎn)生,即肥胖相關(guān)性腎病(obesity-related glomerulopathy,ORG)。已有多項(xiàng)研究證實(shí),肥胖導(dǎo)致尿微量白蛋白(urinary microalbumin,m ALB)排泄增多與血清脂聯(lián)素(adiponectin,ADP)水平下降有關(guān),給予過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體γ(peroxisome proliferator activated receptor gamma,PPARγ)激動(dòng)劑吡格列酮干預(yù)后,血清ADP水平升高,尿m ALB排泄減少。替米沙坦結(jié)構(gòu)與吡格列酮類似,多項(xiàng)研究證實(shí)替米沙坦也具有PPARγ激活作用,可提高血清ADP水平。本研究針對(duì)替米沙坦的PPARγ激活作用對(duì)單純性肥胖小鼠血清ADP、尿m ALB排泄、腎臟PPARγm RNA表達(dá)水平、腎臟足細(xì)胞緊密連接蛋白-1(zonula occludens-1,ZO-1)表達(dá)水平及腎臟病理改變的影響,探討替米沙坦作為PPARγ激動(dòng)劑于ORG治療的意義。研究方法8周齡雄性ob/ob小鼠24只和其同系C57BL/6J小鼠8只,適應(yīng)性飼養(yǎng)1周,測(cè)量小鼠體質(zhì)量。ob/ob肥胖小鼠按其體質(zhì)量分層隨機(jī)分為三組:模型組(M組,n=8)、替米沙坦治療組(T1組,n=8)、氯沙坦治療組(T2組,n=8);C57BL/6J小鼠為對(duì)照組(C組,n=8)。T1組給予替米沙坦5mg·kg-1·d-1灌胃,T2組給予氯沙坦5mg·kg-1·d-1灌胃,C組、M組小鼠予以等量蒸餾水灌胃。每周一早上8:00測(cè)定各組小鼠體質(zhì)量,根據(jù)小鼠體質(zhì)量調(diào)整給藥劑量,上述步驟連續(xù)12周。實(shí)驗(yàn)前后分別采集各組小鼠血液及24h尿液標(biāo)本,測(cè)定小鼠血糖、血清ADP及24h尿m ALB。實(shí)驗(yàn)結(jié)束12周末處死小鼠,摘取小鼠兩側(cè)腎臟并稱重。一側(cè)腎臟置于無(wú)菌凍存管于液氮中保存,實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time polymerase chain reaction,q-PCR)測(cè)定腎臟PPARγm RNA表達(dá)水平;另側(cè)腎臟用10%中性甲醛固定,石蠟包埋切片,HE染色后于光鏡下觀察腎組織病理改變,取10個(gè)正切的腎小球切面,測(cè)量腎小球直徑并取平均值;免疫組化方法檢測(cè)腎臟ZO-1表達(dá)水平。比較四組小鼠體質(zhì)量、血清ADP、24h尿m ALB、腎臟PPARγm RNA表達(dá)水平、腎臟濕重、腎小球直徑及腎臟ZO-1表達(dá)水平的差異,并將血清ADP、24h尿m ALB、腎臟PPARγm RNA表達(dá)水平、腎臟ZO-1表達(dá)水平與其他指標(biāo)行相關(guān)性分析。使用SPSS 20.0軟件行數(shù)據(jù)處理及分析,P0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。實(shí)驗(yàn)結(jié)果1.小鼠一般情況1.1實(shí)驗(yàn)前ob/ob小鼠及C57BL/6J小鼠體質(zhì)量、24h尿m ALB及血糖比較:實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前ob/ob小鼠平均體質(zhì)量顯著高于同系同周齡C57BL/6J小鼠(P0.01),且ob/ob小鼠平均體質(zhì)量超過(guò)C57BL/6J小鼠平均體質(zhì)量的20%,達(dá)到小鼠肥胖標(biāo)準(zhǔn)。ob/ob小鼠24h尿m ALB明顯高于C57BL/6J小鼠(P0.01)。ob/ob小鼠及C57BL/6J小鼠血糖水平存在差異(P0.01),但實(shí)驗(yàn)前后ob/ob小鼠血糖均16.7mmol/L,排除小鼠糖尿病診斷,故可排除糖尿病所致的肥胖小鼠尿m ALB增多,明確肥胖小鼠尿m ALB由肥胖所致。1.2實(shí)驗(yàn)前后各組小鼠體質(zhì)量比較:實(shí)驗(yàn)前M組、T1組及T2組小鼠體質(zhì)量均超過(guò)C組小鼠體質(zhì)量(P0.01);M組、T1組及T2組小鼠體質(zhì)量無(wú)顯著性差異(P0.05)。實(shí)驗(yàn)后M組、T1組及T2組小鼠體質(zhì)量均明顯超過(guò)C組小鼠體質(zhì)量(P0.01);T1組小鼠體質(zhì)量低于M組及T2組(P0.01)。M組及T2組小鼠體質(zhì)量無(wú)明顯差異(P0.05)。2.24小時(shí)尿微量白蛋白:2.1各組實(shí)驗(yàn)前后比較:實(shí)驗(yàn)后M組小鼠24h尿m ALB較實(shí)驗(yàn)前增加(P0.01);實(shí)驗(yàn)后T1、T2組小鼠24h尿m ALB較實(shí)驗(yàn)前減少(P0.01);C組小鼠24h尿m ALB較實(shí)驗(yàn)前后無(wú)變化(P0.05)。2.2各組小鼠之間比較:實(shí)驗(yàn)前后M組、T1組及T2組小鼠24h尿m ALB均明顯高于C組(P0.01);實(shí)驗(yàn)后T1組、T2組小鼠24h尿m ALB明顯低于M組小鼠(P0.01,P=0.01);T1組小鼠24h尿m ALB明顯低于T2組小鼠24h尿m ALB(P=0.027)。3.血清脂聯(lián)素3.1各組實(shí)驗(yàn)前后比較:實(shí)驗(yàn)后M組、T2組小鼠血清ADP水平較實(shí)驗(yàn)前明顯降低(P0.01);實(shí)驗(yàn)后T1組小鼠血清ADP水平明顯高于實(shí)驗(yàn)前(P0.01);C組小鼠血清ADP水平無(wú)明顯變化(P0.05)。3.2各組小鼠之間比較:實(shí)驗(yàn)前后M組、T1組及T2組小鼠血清ADP水平均明顯低于C組(P0.01);實(shí)驗(yàn)前M組、T1組及T2組小鼠血清ADP水平無(wú)明顯差異(P=0.174、P=0.183、P=0.973);實(shí)驗(yàn)后T1組小鼠血清ADP水平高于M組小鼠及T2組小鼠(P=0.003、P=0.005);實(shí)驗(yàn)后M組、T2組血清ADP水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.862)。4.腎臟PPARγm RNA表達(dá)水平:M組、T1組、T2組小鼠PPARγm RNA表達(dá)水平均低于C組(P0.01);T1組小鼠腎臟PPARγm RNA表達(dá)水平高于M組小鼠(P=0.026);T1組小鼠腎臟PPARγm RNA表達(dá)水平高于T2組小鼠(P=0.035);T2組小鼠腎臟PPARγm RNA表達(dá)水平與M組小鼠差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.886)。5.腎臟病理改變5.1腎臟濕重(右腎):C組小鼠腎臟濕重低于M組小鼠、T2組小鼠腎臟(P0.01);M組小鼠腎臟濕重高于T1組小鼠腎臟(P=0.005),與T2組小鼠腎臟濕重?zé)o明顯差異(P=0.377)。T1組小鼠腎臟濕重低于T2組小鼠腎臟(P=0.04)。5.2腎臟組織病理改變:光鏡下C組小鼠腎臟病理結(jié)果提示其腎小球、腎小管、內(nèi)皮細(xì)胞及系膜細(xì)胞均正常;M組、T2組小鼠腎臟病理提示腎小球細(xì)胞數(shù)目明顯增加、腎小球肥大、體積增大,腎小球基底膜明顯增厚;系膜區(qū)明顯增寬,并可見(jiàn)系膜細(xì)胞及基質(zhì)增生,部分伴有局灶節(jié)段性腎小球硬化及間質(zhì)纖維化。T1組小鼠腎臟病理提示腎小球內(nèi)皮細(xì)胞、系膜細(xì)胞基本正常,腎小球硬化程度較M組及T2組小鼠輕。5.3腎小球直徑:M組、T2組小鼠腎小球直徑明顯大于C組、T1組小鼠腎小球直徑(P0.01);T1組小鼠腎小球直徑小于T2組小鼠腎小球直徑(P0.01);T2組小鼠腎小與M組小鼠腎小球直徑無(wú)明顯差異(P=0.945)。6.腎臟ZO-1表達(dá)水平:M組及T2組小鼠腎臟ZO-1表達(dá)水平低于C組小鼠腎臟ZO-1表達(dá)水平(P0.01);T1組小鼠腎臟ZO-1表達(dá)水平低于C組小鼠腎臟ZO-1表達(dá)水平(P=0.079);M組及T2組小鼠腎臟ZO-1表達(dá)水平低于T1組小鼠腎臟ZO-1表達(dá)水平(P0.01)。7.相關(guān)性分析:7.1小鼠24h尿mALB與體質(zhì)量、右側(cè)腎臟濕重及腎小球直徑呈正相(r1=0.853、r2=0.631、r3=0.830;P10.01、P20.01、P30.01),與血清ADP水平、腎臟PPARγm RNA表達(dá)水平及腎臟ZO-1表達(dá)水平呈負(fù)相關(guān)(r4=-0.773、r5=-0.469、r6=-0.731;P40.01、P5=0.007、P60.01)。7.2小鼠血清ADP水平與腎臟PPARγm RNA與ZO-1表達(dá)水平呈正相(r7=0.434、r8=0.811;P7=0.013、P80.01),與小鼠體質(zhì)量、右側(cè)腎臟濕重、24h尿m ALB及腎小球直徑呈負(fù)相關(guān)(r9=-0.743、r10=-0.523、r4=-0.773、r11=-0.722;P90.01、P10=0.002、P40.01、P110.01)。7.3小鼠腎臟PPARγm RNA表達(dá)水平與血清ADP水平、腎臟ZO-1表達(dá)水平呈正相關(guān)(r7=0.434、r12=0.386;P7=0.013、P12=0.029),與小鼠體質(zhì)量、右側(cè)腎臟濕重、24h尿m ALB及腎小球直徑呈負(fù)相關(guān)(r13=-0.381、r14=-0.340、r5=-0.469、r15=-0.547;P13=0.034、P14=0.047、P5=0.007、P15=0.001)。7.4小鼠腎臟ZO-1表達(dá)水平與血清ADP水平、腎臟PPARγm RNA表達(dá)水平呈正相關(guān)(r8=0.811、r12=0.386;P80.01、P12=0.029),與小鼠體質(zhì)量、右側(cè)腎臟濕重、24h尿m ALB及腎小球直徑呈負(fù)相關(guān)(r16=-0.770、r17=-0.493、r6=-0.731、r18=-0.787;P160.01、P17=0.004、P60.01、P180.01)。實(shí)驗(yàn)結(jié)論1、肥胖小鼠24h尿m ALB排泄量增加、血清ADP水平下降、腎臟PPARγm RNA及腎臟ZO-1表達(dá)水平下降;腎臟病理提示腎小球體積增大部分伴有局灶節(jié)段硬化。2、替米沙坦及氯沙坦可通過(guò)改善腎臟血流動(dòng)力學(xué)及非血流動(dòng)力學(xué)效應(yīng)減少單純性肥胖小鼠24h尿m ALB排泄量。3、替米沙坦通過(guò)其特殊的PPARγ激活作用,提高單純性肥胖小鼠血清ADP水平、腎小球足細(xì)胞ZO-1表達(dá)增加并抑制腎小球肥大、減少24h尿m ALB排泄,使其較其他ARB類藥物于單純性肥胖小鼠腎臟有更強(qiáng)的保護(hù)作用。
【關(guān)鍵詞】：替米沙坦 肥胖相關(guān)性腎病 過(guò)氧化物酶體增殖物受體 γ 脂聯(lián)素 尿微量白蛋白 緊密連接蛋白-1
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R589.2;R692
【目錄】：

• 中文摘要4-8
• Abstract8-14
• 縮略語(yǔ)/符號(hào)說(shuō)明14-16
• 前言16-18
• 研究現(xiàn)狀、成果16-17
• 研究目的、方法17-18
• 對(duì)象和方法18-31
• 結(jié)果31-44
• 討論44-50
• 結(jié)論50-51
• 參考文獻(xiàn)51-56
• 發(fā)表論文和參加科研情況說(shuō)明56-57
• 綜述 ARB在慢性腎臟病中應(yīng)用57-67
• 綜述參考文獻(xiàn)63-67
• 致謝67-68
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷68

  本文關(guān)鍵詞：替米沙坦對(duì)單純性肥胖小鼠血清脂聯(lián)素、尿微量白蛋白及腎臟病理的作用，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：291745