發(fā)布時間：2020-09-12 14:22

　　 目的前列腺癌轉移是前列腺癌難治和患者死亡的主要原因之一,早期準確預測和阻斷轉移信號通路是目前前列腺癌研究的難點和熱點,極具臨床意義和價值。腫瘤轉移促進因素與抑制因素的失衡是腫瘤轉移的主要原因,腫瘤細胞特有能量代謝模式(Warburg效應)的開啟及所帶來的一列效應(細胞代謝、轉移促進基因的激活等)在打破這種平衡狀態(tài)中發(fā)揮重要作用,其中甘氨酸脫羧酶(GLDC)與Warburg效應有著密切的相關性,但其具體機制有待闡明。因此,我們將探究GLDC與Warburg效應的關系及其介導前列腺癌轉移的分子機制。方法1.TCGA數(shù)據庫分析GLDC在正常前列腺組織和前列腺癌組織中的表達水平。Western Blot實驗驗證GLDC在前列腺癌細胞和組織標本中的表達水平。2.GLDC差異性表達后,細胞劃痕實驗、Transwell遷移及侵襲實驗,檢測前列腺癌細胞的平行遷移、垂直遷移及侵襲能力。3.GLDC差異性表達后,代謝組芯片分析前列腺癌細胞的代謝水平變化,葡萄糖攝取實驗、乳酸生成實驗及乳酸脫氫酶實驗檢測前列腺癌細胞葡萄糖攝取量、乳酸生成量及乳酸脫氫酶活性。4.將野生型GLDC過表達質粒及點突變酶失活GLDC質粒分別轉染22RV1細胞后,細胞劃痕實驗、Transwell遷移及侵襲實驗,檢測其平行遷移、垂直遷移及侵襲能力。葡萄糖攝取實驗、乳酸生成實驗及乳酸脫氫酶實驗,檢測其葡萄糖攝取量、乳酸生成量及乳酸脫氫酶活性。5.GLDC在前列腺癌中的臨床意義:單因素與多因素分析以及生存分析。結果1.GLDC在正常前列腺組織中的表達顯著低于前列腺癌組織。GLDC在局限性前列腺癌細胞(22RV1)、轉移性前列腺癌細胞(DU145、LnCaP)中的表達量依次增高。2.沉默或過表達GLDC可以顯著降低或提高前列腺癌細胞的平行遷移、垂直遷移及侵襲能力。3.代謝組芯片分析,發(fā)現(xiàn)GLDC差異性表達可顯著改變前列腺癌細胞的代謝水平。沉默或過表達GLDC可顯著降低或提高前列腺癌細胞葡萄糖攝取量、乳酸生成量及乳酸脫氫酶活性。4.22RV1細胞分別轉染野生型GLDC過表達質粒及點突變酶失活GLDC質粒后,均成功過表達了GLDC。與GLDC點突變酶失活的22RV1細胞相比,野生型GLDC過表達的22RV1細胞的平行遷移、垂直遷移及侵襲能力均顯著提高;葡萄糖攝取量、乳酸生成量及乳酸脫氫酶活性亦均明顯增加。5.單因素與多因素分析結果顯示,GLDC高表達是前列腺癌患者臨床進展的獨立危險因素。無進展生存率分析結果表明,GLDC高表達前列腺癌患者的無進展生存率明顯下降。結論1.GLDC高表達于前列腺癌組織和轉移性前列腺癌細胞。2.GLDC可促進前列腺癌的侵襲轉移。3.GLDC通過增強Warburg效應介導前列腺癌的侵襲轉移。4.GLDC酶活性是前列腺癌細胞侵襲轉移功能所必需的。5.GLDC的高表達與前列腺癌的臨床進展預后有著密切聯(lián)系。
【學位單位】：南方醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2019
【中圖分類】：R737.25
【部分圖文】：

逡逑組織中的表達顯著低于前列腺癌組織（圖１－１Ａ）。在同一個體中做配對分析后逡逑發(fā)現(xiàn)，ＧＬＤＣ在癌旁組織中的表達顯著低于前列腺癌組織（圖１－１Ｂ）。逡逑Ａ邐Ｂ逡逑ＴＣＧＡ－ＰＲＡＤ邐ＴＣＧＡ－ＰＲＡＤ逡逑？邐（Ｐ＝０．０００４）邐＿邐（Ｐ＝０．００２８）逡逑ｆ邋４－，邐邐二邐邋ｆ邋４－，邐邐＾邐逡逑ｉ３－邐？：邐ｊＭｔａｆ邐ｉ３－邐？：邐■■■：：■逡逑Ｉ邋２邋：：：：：：：疆�。插澹海海海海海海菏义希唬篭」衿逡逑Ｑ邋－１」邐Ｎｏｒｍａｌ邐Ｔｕｍｏｒ邐３邋？＊＊」邐Ｎｏ曑１邐Ｊｕｍｏｒ逡逑（３邐（ｎ＝５２）邐（ｎ＝４９７）邐？邐（ｎ＝５２）邐（ｎ＝５２｝逡逑圖１－１邋ＴＣＧＡ數(shù)據庫分析顯示ＧＬＤＣ在正常前列腺組織中的表達顯著低于前列腺癌組逡逑織（Ａ），而在同一個體中做配對分析發(fā)現(xiàn)，ＧＬＤＣ在癌旁組織中的表達顯著低于前列腺癌逡逑組織（Ｂ）。逡逑Ｆｉｇ．邋１－１邋ＴＣＧＡ邋ｄａｔａｂａｓｅ邋ａｎａｌｙｓｉｓ邋ｓｈｏｗｅｄ邋ｔｈａｔ邋ｔｈｅ邋ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ邋ｏｆ邋ＧＬＤＣ邋ｉｎ邋ｎｏｒｍａｌ邋ｐｒｏｓｔａｔｅ逡逑ｔｉｓｓｕｅ邋ｗａｓ邋ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ邋ｌｏｗｅｒ邋ｔｈａｎ邋ｔｈａｔ邋ｉｎ邋ｐｒｏｓｔａｔｅ邋ｃａｎｃｅｒ邋ｔｉｓｓｕｅ邋（Ａ）

逡逑組織中的表達顯著低于前列腺癌組織（圖１－１Ａ）。在同一個體中做配對分析后逡逑發(fā)現(xiàn)，ＧＬＤＣ在癌旁組織中的表達顯著低于前列腺癌組織（圖１－１Ｂ）。逡逑Ａ邐Ｂ逡逑ＴＣＧＡ－ＰＲＡＤ邐ＴＣＧＡ－ＰＲＡＤ逡逑？邐（Ｐ＝０．０００４）邐＿邐（Ｐ＝０．００２８）逡逑ｆ邋４－，邐邐二邐邋ｆ邋４－，邐邐＾邐逡逑ｉ３－邐？：邐ｊＭｔａｆ邐ｉ３－邐？：邐■■■：：■逡逑Ｉ邋２邋：：：：：：：疆！２邋：：：：：：：漱逡逑；：\」衿逡逑Ｑ邋－１」邐Ｎｏｒｍａｌ邐Ｔｕｍｏｒ邐３邋？＊＊」邐Ｎｏ曑１邐Ｊｕｍｏｒ逡逑（３邐（ｎ＝５２）邐（ｎ＝４９７）邐？邐（ｎ＝５２）邐（ｎ＝５２｝逡逑圖１－１邋ＴＣＧＡ數(shù)據庫分析顯示ＧＬＤＣ在正常前列腺組織中的表達顯著低于前列腺癌組逡逑織（Ａ），而在同一個體中做配對分析發(fā)現(xiàn)，ＧＬＤＣ在癌旁組織中的表達顯著低于前列腺癌逡逑組織（Ｂ）。逡逑Ｆｉｇ．邋１－１邋ＴＣＧＡ邋ｄａｔａｂａｓｅ邋ａｎａｌｙｓｉｓ邋ｓｈｏｗｅｄ邋ｔｈａｔ邋ｔｈｅ邋ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ邋ｏｆ邋ＧＬＤＣ邋ｉｎ邋ｎｏｒｍａｌ邋ｐｒｏｓｔａｔｅ逡逑ｔｉｓｓｕｅ邋ｗａｓ邋ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ邋ｌｏｗｅｒ邋ｔｈａｎ邋ｔｈａｔ邋ｉｎ邋ｐｒｏｓｔａｔｅ邋ｃａｎｃｅｒ邋ｔｉｓｓｕｅ邋（Ａ）

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1 馬建宏;曹開源;徐霖;鐘慧玲;張素粉;羅虹嬌;庹玖玲;張?zhí)?劉建中;;前列腺癌細胞轉移相關基因的篩選[J];熱帶醫(yī)學雜志;2015年11期

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本文編號：2817741