【摘要】：目的探究卡介苗對(duì)膀胱腫瘤細(xì)胞及代謝產(chǎn)物的作用和影響,對(duì)卡介苗治療膀胱腫瘤細(xì)胞的可能機(jī)制進(jìn)行初步的探索。方法通過膀胱灌注N-甲基亞硝基脲(MNU)誘導(dǎo)并建立大鼠的膀胱腫瘤模型,將膀胱腫瘤細(xì)胞和正常移行上皮細(xì)胞進(jìn)行原代培養(yǎng)。按照培養(yǎng)液的不同成分將其分為5組,利用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)法檢測各組細(xì)胞上清液中的腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白細(xì)胞介素-10(IL-10)的濃度。利用噻唑藍(lán)(MTT)法測定卡介苗抑制腫瘤細(xì)胞生長的藥物濃度。利用末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)缺口末端標(biāo)記法(TUNEL)檢測細(xì)胞凋亡情況。結(jié)果在灌注的15只大鼠中,2只大鼠在灌注2次后死亡,3只大鼠灌注3次后死亡,解剖死亡大鼠均未發(fā)現(xiàn)明顯的腫瘤。再對(duì)其余10只大鼠完成膀胱灌注后,其中8只大鼠解剖后發(fā)現(xiàn)有明顯的腫瘤。MTT結(jié)果顯示:卡介苗對(duì)膀胱腫瘤細(xì)胞的生長具有抑制作用,其抑制率與卡介苗的濃度呈現(xiàn)正相關(guān)。ELISA檢測各組細(xì)胞上清液中TNF-α濃度在B組為(160.654±5.775)ng/L,D組為(124.443±4.972)ng/L的濃度,與其他三組相比差異有顯著性;IL-10濃度在B組為(16.973±3.428)ng/L,E組為(20.327±2.721)ng/L,蛋白水平明顯高于其他三組。各組細(xì)胞均未發(fā)現(xiàn)細(xì)胞凋亡。對(duì)原代膀胱腫瘤細(xì)胞的鑒定顯示:利用HE染色可發(fā)現(xiàn)腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞核體積增大,核漿比增高,有的可發(fā)現(xiàn)細(xì)胞核仁數(shù)目增加,有的細(xì)胞核呈現(xiàn)墨水滴樣,核仁比較明顯。結(jié)論卡介苗對(duì)大鼠膀胱腫瘤細(xì)胞的增長具有抑制作用,沒有發(fā)生細(xì)胞凋亡,且腫瘤細(xì)胞自身分泌的IL-10、TNF-α可以參與調(diào)節(jié)。

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本文編號(hào)：2603120